产地 | 进口、国产 |
品牌 | 帛科 |
货号 | BKP4076 |
用途 | 公司产品仅用物科研 |
包装规格 | 50次 |
纯度 | % |
CAS编号 | |
是否进口 | 是 |
本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。
技术服务内容:
实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳,以软件分析电泳条带的灰度值(IOD值),通过与内参基因的灰度值比较,判断目的mRNA的相对表达量。
产品名称 | 英文名称 | 货号 |
奈瑟菌通用PCR检测试剂盒价格 | Neisseria spp.PCR | BKP4076 |
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μ进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数*个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
小鼠T细胞瘤细胞;Cyc-Tag(S49)十氢奈1克
PLAUR Others Mouse 小鼠 uPAR / PLAUR / CD87 人细胞裂解液 (阳性对照) 2,2’-双-4,4’-二羧醋二钾盐 2,2'-Biinoneolinq-4,4-diccrboxylic ccid diwo7ium sclt 979-88-4
家猫肺细胞;FCA-L2草酸高铁1克2~8℃
Spike Others MERS-CoV 中东呼吸综合征 MERS-CoV (HCoV-EMC/2012) Spike Protein S2 (aa 726-1296) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 金黄色葡萄球显色培养基100张/包RT
脑内皮细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)3,4-二甲基氧基NA
CGB7 Others Human 人 CGB7 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 硬脂酸钠(>95%,BR) stearate质量规格:>95%,BR
CL-0073DH82(犬巨噬细胞)5×106cells/瓶×2硫代硫酸钠无水(>98.5%,BC) thiosulfate anhydrous质量规格:>98.5%,BC
QGY-7701, 人细胞 细胞,Hep3B细胞 Hs 578T(癌细胞)Sulfo NHS LC BiotinSulfo NHS LC Biotin质量规格:BR
小鼠胚胎成骨细胞前体细胞;MC3T3-E1Sulfo NHS SS BiotinSulfo NHS SS Biotin质量规格:BR
SERPIND1 Others Mouse 小鼠 SerpinD1 / HCII 人细胞裂解液 (阳性对照) 四乙酰核糖(>98% (HPLC),BC)Tetraacetylribose质量规格:>98% (HPLC),BC
奈瑟菌通用PCR检测试剂盒价格人成纤维母细胞-胎儿(HDF-f)( 5×105 )达格列嗪;达格列净Dapagliflozin质量规格:>97%,BR,生化试剂级
RN-s, 大鼠纹状体神经元甘草查而酮 A(标准品)Licochalcone A质量规格:含量≥98.0%,标准品
人T瘤细胞Jurkat亚系;Jurkat77 大鼠肾成纤维细胞完全培养基 100mL三氯卡班Triclocarban 质量规格:>98.0%
P815 小鼠肥大细胞癌细胞氯法齐明(标准品)Clofazimine质量规格:供TCL鉴别用
CDNF Others Mouse 小鼠 CDNF / ARMETL1 人细胞裂解液 (阳性对照) 头孢呋辛酯Cefuroxime axetil质量规格:745~875μg/mg,USP
293T, SV40转化的人胚肾上皮细胞系 小鼠原B细胞,BA/F3细胞 Hs 181.Tes(正常人细胞)铜铁试剂shēng huà shì jì容量:100克
人肺粘液上皮样癌细胞;NCI-H2922,7-二溴芴 2,7-Dibromofluorqnq 16433-88-8
MET Others Human 人 c-MET / HGFR 人细胞裂解液 (阳性对照) 钽芬,英文名或英文缩写:Tantalum,级别:基准试剂,99.95%,规格:500毫克
人胚胎眼巩膜成纤维细胞;HFSF双岐杆菌生化基础培养基shēng huà shì jì容量:100克
EPHB1 Others Mouse 小鼠 EPHB1 / EPHT2 人细胞裂解液 (阳性对照) 2078-54-82,6-二异基本酚Propofol
特点优势:
1. 特异性:奈瑟菌通用PCR检测试剂盒价格使用的引物均经过详尽的生物信息学分析,经过GenBank及自建庞大数据库的比对,确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段,可实现对细菌种属及血清型的特异检测,特异性均达到100%。
2. 重现性:该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证,重现性为100%。
3. 灵敏性:该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测,当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时,可实现对其的直接检测,无需繁琐的增菌过程。
4. 实用性:检测范围广,涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌,可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测,整个检测过程为3-4个小时。
5. 优势1:序列资源丰富,除GenBank公布的序列外,公司还进行了大量菌株的序列破译,从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6. 优势2:该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证,凭借公司拥有的丰富的菌种资源,每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证,确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。