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分枝杆菌属通用PCR检测试剂盒说明书
  • 品牌:帛科
  • 产地:进口、国产
  • 货号:BKP4038
  • 价格: ¥3800/盒
  • 发布日期: 2020-11-12
  • 更新日期: 2025-01-10
产品详请
产地 进口、国产
品牌 帛科
货号 BKP4038
用途 公司产品仅用物科研
包装规格 50次
纯度 %
CAS编号
是否进口

本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。

技术服务内容:

实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳,以软件分析电泳条带的灰度值(IOD值),通过与内参基因的灰度值比较,判断目的mRNA的相对表达量。

产品名称

英文名称

货号

分枝杆菌属通用PCR检测试剂盒说明书

Mycobacterium spp.PCR

BKP4038

PCR实验方法步骤:

方法
1
:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix
2mM             
4 μl     
引物110pM                 
2 μl     
引物210pM                 
2 μl     Taq
2U/μl               
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl  
1 μl     
ddH2O 50 μl  
PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2
:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93 40s → 58 30s → 72 60s,循环30-35次,在72 7min
3
:伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4待电泳检测或-20长期保存。
4
PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μ进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。

反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
引物扩增跨度: 200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
引物3'端的碱基,特别是最末及倒数*个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.11umol10100pmol,以*引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
EFNA5 Protein Human 重组人 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白 (His 标签)L(+)-2--5-脲戊酸,英文名或英文缩写:L-Citrulline,级别:BR99%,规格:25

HCC94(人子宫鳞癌细胞(高分化)) 5×106cells/瓶×2 肝动脉内皮细胞Many types of cells包装:5 × 105(1ml)1,2-二基本;邻二基本 1,2-Diqthylbqnzqnq 132-01-3

HUM, 正常人主动脉平滑肌细胞桑色速;摩林;;2,3,4,5,7-五羌基皇同 Morin;Tqtrcxy7noxyflcvcnol;2-xy7noxypqlcrgidqnolon;Ncturcl yqllow 8;Ncturcl yqllow 11;C.I. 75660 624022-01-3

SIRPG Others Cynomolgus 食蟹猴 SIRPG / SIRP gamma / CD172g 人细胞裂解液 (阳性对照) 媒染蓝B,英文名或英文缩写:Acid alizarin blue B,级别:ACS级,规格:1

人正常肺上皮细胞;BEAS-2B1114-34-7D-来苏糖D-LYXOSE
DYRK3 Others Human
DYRK3 / REDK 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 双壁碳纳米管(>50%) 小于5nm(直径),5-15μm(长度)Carbon Nanotube Double-walled (>50%) below 5nm(diam.), 5-15μm(length)质量规格:

tTA基因修饰的小鼠(B);F9-CAG-tTA-4D6交叉缝式碳纳米管 10-20nm(直径),5-15μm(长度)Carbon Nanotube Herringbone 10-20nm(diam.), 5-15μm(length)质量规格:>95%(TPO Method)

COLO 205细胞,细胞 正常人肝细胞,L-02细胞 CL-0056CCD-1095Sk(人浸润性导管癌旁皮肤细胞)5×106cells/瓶×2复壁碳纳米管 小于10nm(直径),5-15μm(长度)(允许温度上限:620)Carbon Nanotube Bundled Multi-walled below 10nm(diam.), 5-15μm(length) (allowable temperature limit : 620°C)质量规格:

APP基因转染CHO细胞株;7WD10复壁碳纳米管 小于10nm(直径),5-15μm(长度)Carbon Nanotube Multi-walled below 10nm(diam.), 5-15μm(length)质量规格:>95%(TPO Method)

CLEC4M Others Human CD299 人细胞裂解液 (阳性对照) 复壁碳纳米管 小于10nm(直径),1-2μm(长度)Carbon Nanotube Multi-walled below 10nm(diam.), 1-2μm(length)质量规格:>95%(TPO Method)
分枝杆菌属通用PCR检测试剂盒说明书IFNA4 Others Mouse 小鼠 IFNA4 / Ierferon alpha-4 人细胞裂解液 (阳性对照) 5,5-二甲基-1,3-环己二酮5,5-Dimethyl-1,3-cyclohexanedione质量规格:BR

JeKo-1 人套细胞瘤细胞5-氟胞苷(>98%,BR)5-Fluorocytidine质量规格:>98%,BR

22RV1人细胞 Human prostate cancer 22RV1 cells 4-甲基伞形酮-β-D-木糖苷4-Methylumbelliferyl-β-D-xylopyranoside Printable Reviews质量规格:0.99

其他细胞因子2-脱氧-D-核糖2-Deoxy-D-Ribose质量规格:>98%,BR

小鼠海马趾神经细胞(MH-h)(1×106) HCT116, 人结细胞 HumanD-半乳糖(标准品)D-Galactose质量规格:HPLC98%,标准品
大鼠细胞;Y3-Ag 1.2.32,7-二溴芴(>98.0%(GC))质量规格:>98.0%(GC)2,7-Dibromofluorene

QG-56细胞,肺扁平上皮癌细胞 人口腔上皮癌长春新碱耐药株,KB/V细胞 小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-C22,7-二溴-9-芴酮(>98.0%(GC))质量规格:>98.0%(GC)2,7-Dibromo-9-fluorenone

小鼠腹水瘤细胞;S-1802,7-二溴萘(>98.0%(GC))质量规格:>98.0%(GC)2,7-Dibromonaphthalene

IFNGR1 Others Human IFN-gamma R1 人细胞裂解液 (阳性对照) 2,7-二溴-9,9'-螺二[9H-](>98.0%(HPLC)(T))质量规格:>98.0%(HPLC)(T)2,7-Dibromo-9,9'-spirobi[9H-fluorene]

人小脑颗粒细胞裂解物HCGCL2,6-二甲基-3,5-庚二酮(>97.0%(GC))质量规格:>97.0%(GC)2,6-Dimethyl-3,5-heptanedione

特点优势:
1. 特异性:分枝杆菌属通用PCR检测试剂盒说明书使用的引物均经过详尽的生物信息学分析,经过GenBank及自建庞大数据库的比对,确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段,可实现对细菌种属及血清型的特异检测,特异性均达到100%
 2.   
重现性:该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证,重现性为100%
3.   
灵敏性:该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测,当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时,可实现对其的直接检测,无需繁琐的增菌过程。
4.   
实用性:检测范围广,涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌,可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测,整个检测过程为3-4个小时。
5.   
优势1:序列资源丰富,除GenBank公布的序列外,公司还进行了大量菌株的序列破译,从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6.   优势2:该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证,凭借公司拥有的丰富的菌种资源,每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证,确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。


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