PCR实验方法步骤：

方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μ进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

技术服务内容：

实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳，以软件分析电泳条带的灰度值（IOD值），通过与内参基因的灰度值比较，判断目的mRNA的相对表达量。

特点优势：
1. 特异性：玛尔摩分枝杆菌PCR检测试剂盒供应使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过GenBank及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
 2.   重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
3.   灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
4.   实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
5.   优势1：序列资源丰富，除GenBank公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6.   优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

DDR1 Others Human 人 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 人细胞裂解液 (阳性对照) DL-Malicacid苹果酸1毫克CP，99%

非洲绿猴肾细胞系/HCV-NS2;Vero-HCV-NS2固绿 FCF brillicnt bluq G 323-42-9

IL4 Others Mouse 小鼠 IL4 / Ierleukin-4 (Q136D,Y139D) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 罗丹明 B Rhodamine B (Dye content, ≥95%) 81-88-9 25G 染色剂

心肌细胞Many types of cells包装：5 ×105方(1ml)Cyclooctane环辛酮25克BR，97%

猕猴肌肉细胞;MMm7 人细胞，HT-29细胞 Bcap-37(癌细胞)(蛋酸))
EB病毒转化的人B细胞;KMY0920盐酸洛美沙星Lomefloxacin HCl质量规格：>98.5%,BR

293FT细胞，表达SV40T抗原人胚肾上皮细胞 大鼠肝细胞瘤,H4-II-E-C3细胞 CL-0324BT-20(人癌细胞)5×106cells/瓶×2盐酸洛美沙星（标准品）Lomefloxacin HCl质量规格：含量测定

BC-009(人癌细胞) 5×106cells/瓶×2氯替泼诺Loteprednol Etabonate质量规格：>99.0%

HTEpC-c 人类气管上皮细胞(HTEpC) 500,000cells 人平滑肌细胞HBVSMC氯替泼诺(标准品)Loteprednol Etabonate质量规格：HPLC>99.0%,标准品

原代内皮细胞培养特制添加剂Many types of cells包装：5/2.5/1ml洛伐他汀Lovastatin,Monacolin K质量规格：>99%,BR,可用于细胞培养
玛尔摩分枝杆菌PCR检测试剂盒供应人胎盘绒毛膜细胞完全培养基 100mLN-氧基奥氮平Olanzapine N-Oxide质量规格：美国进口

MA-891细胞，小鼠癌高转移细胞 L929(成纤维细胞) 人葡萄膜色素细胞;UM氨曲南Aztreonam质量规格：> 95%,BR

CCL7 Protein Human 重组人 MCP-3 / CCL7 蛋白 (His 标签)氨曲南（标准品）Aztreonam质量规格：HPLC>95%,标准品

RH-35(大鼠细胞) 5×106cells/瓶×2 甲型 H7N8 (A/mallard/Netherlands/33/2006) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 巴卡丁 IIIBaccatin III质量规格：度> 98%,BR，可用于细胞培养

人肺转化细胞;AE1201巴卡丁 III（标准品）Baccatin III质量规格：HPLC>98%,标准品
AGRP Others Mouse 小鼠 AGRP / AgRP 人细胞裂解液 (阳性对照) X-SA琼脂培养基shēng huà shì jì容量：RT1把/包

MEG-01 人成巨核细胞细胞偶氮录膦mN;2-(4-录-2-膦醋基本偶氮)-7-(3-肖基本偶氮)-1,8-二羌基-3,6-二磺醋 Chlorophosphonczo MN 77320-04-0

MSTO-211H人细胞株 Human lung cancer cell line MSTO-211H RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS (50%) Glutaraldehyde solution (Grade I, 50% ...  10ML 通用试剂

MIF Protein Human 重组人 MIF / GLIF 蛋白 (His 标签)L-天门冬酸钾shēng huà shì jì容量：RT25克

人胚;WI-38 [WI38] 人成纤维细胞完全培养基 100mL(二硫代苏糖醇)
反应五要素：
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数*个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。