技术服务内容：

实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳，以软件分析电泳条带的灰度值（IOD值），通过与内参基因的灰度值比较，判断目的mRNA的相对表达量。

PCR实验方法步骤：

方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μ进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

特点优势：
1. 特异性：麻风分枝杆菌PCR检测试剂盒说明书使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过GenBank及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
 2.   重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
3.   灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
4.   实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
5.   优势1：序列资源丰富，除GenBank公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6.   优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

反应五要素：
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数*个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。
肺大平滑肌细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)聚乙二醇6000500克

Molt-4细胞，人T细胞(CD8+) 小鼠胰腺腺泡细胞癌细胞,MPC-83细胞 人尿道上皮细胞cDNAHUC cDNA2,2-联≥99% 2,2'-Dipyridyl 366-18-7

PA-1(人卵巢腺癌细胞) 5×106cells/瓶×2盐酸胍1克

CRFK(猫肾细胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0190RAW 264.7(小鼠单核巨噬细胞细胞)5×106cells/瓶×2 大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞;PC-12 [PC12]布氏肉汤25毫升

大鼠细胞;MMQ68399-77-93-(N-吗啉基)-2-羟基丙磺酸 (MOPSO)MOPSO
EB病毒转化的人B细胞;KMY0922 人表皮角质形成细胞完全培养基 100mL特比萘芬-d7盐酸盐Terbinafine-d7 Hydrochloride质量规格：美国进口

小鼠肾集合管细胞(SV40转化);M-1羟基特比萘芬Hydroxy Terbinafine质量规格：美国进口

C10ORF54 Others Human 人 B7-H5 / Gi24 / VISTA 人细胞裂解液 (阳性对照) 羟基特比萘芬β-D-葡萄糖苷酸Hydroxy Terbinafine β-D-Glucuronide质量规格：美国进口

U-87 MG人脑星形胶质母细胞瘤 U-87 MG of brain asocytic blastoma DMEM+10% FBS胸腺五肽Thymopentin质量规格：美国进口

SF767细胞，人细胞 阴沟肠杆菌 人主动脉内皮细胞总RNAHAEC NA替米考星1酸盐Tilmicosin phosphate salt质量规格：美国进口
麻风分枝杆菌PCR检测试剂盒说明书ICAM2 Others Mouse 小鼠 ICAM2 / CD102 人细胞裂解液 (阳性对照) N-亚硝基-N-甲基尿烷(>95.0%(GC))N-Methyl-N-nitrosourethane质量规格：>95.0%(GC)

人T瘤转基因细胞;Jurkat D,EMUG;4-甲基伞型酮-beta-D-葡糖苷酸4-MUG质量规格：>98%,BR

NOTCH1 Others Mouse 小鼠 Notch-1 / NOTCH1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 米诺地尔Minoxidil质量规格：>98%

CM-R030大鼠肠粘膜上皮细胞完全培养基100mL米诺地尔(标准品)Minoxidil质量规格：>98%,标准品

MCF-7 [MCF7], 人癌细胞系 牛胚气管细胞,EB细胞 Hs 578T(人成纤维细胞)米诺地尔（硫酸盐）敏乐啶Minoxidil Sulfate质量规格：>99.0%
CD80 Others Human 人 B7-1 / CD80 人细胞裂解液 (阳性对照) DHA脱氢醋酸10克BR

人口腔角质细胞裂解物HOKL盐酸环胞苷 Ancitabine hydrochloride 10212-25-6 1G 通用试剂

IGFBP6 Others Human 人 IGFBP6 / IBP-6 人细胞裂解液 (阳性对照) 六拂鳞醋 Hqxcfluorophosphoric ccid;

BRL-3A 大鼠正常肝细胞dTTP(2'-DEOXYTHYMIDINE-5'-TRIPHOSPHATE)TRIwo7iumSALTDIHYDRATE dTTP, Na3, 2H2O超级白色干燥结晶粉末FROZENsigma

CL-0118HT-29(人细胞)5×106cells/瓶×299-76-3尼泊金metxylparaben