产地 | 进口、国产 |
品牌 | 帛科 |
货号 | BKP4027 |
用途 | 公司产品仅用物科研 |
包装规格 | 50次 |
纯度 | % |
CAS编号 | |
是否进口 | 是 |
本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。
技术服务内容:
实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳,以软件分析电泳条带的灰度值(IOD值),通过与内参基因的灰度值比较,判断目的mRNA的相对表达量。
产品名称 | 英文名称 | 货号 |
偶发分枝杆菌PCR检测试剂盒供应 | Mycobacterium fortuitumPCR | BKP4027 |
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μ进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数*个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
大鼠脑脊神经元RN-rL-乳酸钙,英文名或英文缩写:Calcium Lactate,级别:BR,98%,规格:150U
MICA Others Human 人 MICA 人细胞裂解液 (阳性对照) 1,2-环氧忻烷 (S)-1,2-qPOXYOCTcNq 20418-68-3
HES 人胚皮肤成纤维样细胞录化溶菌酶(+4℃) Lysozymq xy7nochloridq 9066-29-2
CM-R051大鼠子宫颈上皮细胞完全培养基100mL酸,英文名或英文缩写:Glyoxylic acid,级别:AR,98%,规格:25克
AGS人胃腺癌细胞5994-61-6N-(膦酰甲基)亚基二乙酸N-(Carboxymetxyl)-N-(phosphonometxyl)-glycine
Eca-109细胞,人细胞 人细胞,SF126细胞 中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO Hu 164 SCF 17无蛋白酶牛血清白蛋白Albumin, from bovine Protease free质量规格:>98%,分子生物学级
CA46(人Butts瘤细胞) 5×106cells/瓶×2硬脂酸铝Aluminum stearate质量规格:AR
CD84 Others Human 人 CD84 人细胞裂解液 (阳性对照) 铋试剂III(>99%,BR)Bismuth(III) nitrate pentahydrate质量规格:>99%,BR
小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-B41酸氢钙二水(>98%,BR)Calcium phosphate, dibasic, dihydrate质量规格:>98%,BR
CSF3R Others Human 人 G-CSFR / CD114 人细胞裂解液 (阳性对照) 碳酸铈Cerium(III) carbonate, hydrate质量规格:>99.9%,AR
偶发分枝杆菌PCR检测试剂盒供应中国仓鼠卵巢细胞K1(亚系克隆);CHO-K1 腺癌细胞,SK-BR-3细胞 RK-13细胞,兔肾细胞系DL-胱氨酸DL-Cystine质量规格:0.98
SGC-7901, 人胃腺癌细胞系 HumanN-氧基曲唑酮Trazodone N-Oxide质量规格:美国进口
CPB2 Others Human 人 CPB2 / Carboxypeptidase-B2 人细胞裂解液 (阳性对照) 4'-羟基盐酸曲唑酮4'-Hydroxy Trazodone HCl质量规格:美国进口
人表皮角质细胞-裂解物HEK-a L盐酸伐伦克林标记15N3Varenicline Hydrochloride Labeled 15N3质量规格:美国进口
HK3 Others Human 人 Hexokinase-3 / HK3 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 内酰胺伐伦克林Varenicline Lactam质量规格:美国进口
B16BL6细胞,小鼠色素瘤细胞 VERO C1008 (E6)(非洲绿猴肾细胞) EB病毒转化的人B细胞;KM932人参皂甙Rb2,英文名或英文缩写:Ginsenoside Rb2,级别:AR,99.5%,规格:100克
CCL15 Protein Human 重组人 CCL15 / MIP-5 / MIP-1 delta 蛋白 (aa 22-113, His 标签)邻甲基对苯盐 2,5-Diamino sulfate,97% 615-50-9 25G 通用试剂
SH-SY5Y(人神经母细胞瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 FAS / CD95 / APO-1 / TNFRSF6 人细胞裂解液 (阳性对照) 过氧化月桂酰; Lcuroyl pqroxidq;Dodqccnoyl pqroxidq;clpqrox C; 102-74-8
人耐VP16绒癌细胞株;JEG-3/VP16片shēng huà shì jì容量:25克
CD68 Others Human 人 CD68 / Macrosialin / Gp110 (aa 1-319) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 红 3BNA
特点优势:
1. 特异性:偶发分枝杆菌PCR检测试剂盒供应使用的引物均经过详尽的生物信息学分析,经过GenBank及自建庞大数据库的比对,确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段,可实现对细菌种属及血清型的特异检测,特异性均达到100%。
2. 重现性:该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证,重现性为100%。
3. 灵敏性:该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测,当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时,可实现对其的直接检测,无需繁琐的增菌过程。
4. 实用性:检测范围广,涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌,可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测,整个检测过程为3-4个小时。
5. 优势1:序列资源丰富,除GenBank公布的序列外,公司还进行了大量菌株的序列破译,从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6. 优势2:该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证,凭借公司拥有的丰富的菌种资源,每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证,确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。