PCR实验方法步骤：

方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μ进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

技术服务内容：

实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳，以软件分析电泳条带的灰度值（IOD值），通过与内参基因的灰度值比较，判断目的mRNA的相对表达量。

特点优势：
1. 特异性：牛分支杆菌卡介苗PCR检测试剂盒供应使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过GenBank及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
 2.   重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
3.   灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
4.   实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
5.   优势1：序列资源丰富，除GenBank公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6.   优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

IFNA13 Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 IFNA13 / Ierferon alpha-13 蛋白 (Fc 标签)Cholesterolesterase胆甾醇酯酶(猪胰)500克BR，800u/mg

J774A.1(小鼠单核巨噬细胞) 5×106cells/瓶×2 空肠弯曲杆菌亚麻酸 Methyl linolenate,≥99% 301-00-8 100MG 通用试剂

组织源性原代细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)/1ml4-羌基磺醋 HqPqS,1M SOLUTION 7362-42-9

EGFL7 Others Human 人 EGFL7 / VE-statin 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) TBSBUFFER,20XLIQUIDTBS缓冲液 20X 浓缩液超级4LRT

人低分化;GLC-82 [GLC82](a-环状糊精)
EFNB2 Others Rat 大鼠 Ephrin-B2 / EFNB2 人细胞裂解液 (阳性对照) 盐酸平阳霉素（标准品）Bleomycin A5 Hydrochloride 质量规格：HPLC含量测定

大鼠皮下脂肪细胞完全培养基 100mL琥乙红霉素（标准品）Erythromycin ethylsuccinate质量规格：杂质检查

FRhK-4恒河猴胚肾细胞 FRhK-4 Ganges RIver monkey embryo kidney cell DMEM培养基+10%FBS灰黄霉素（标准品）Griseofulvin质量规格：含量测定

IFNA1 Protein Rat 重组大鼠 IFN-alpha / IFNA1 / IFN 蛋白 (Fc 标签)Tivantinib(ARQ197)Tivantinib, ARQ 197质量规格：>98%，c-Met抑制剂

MCF 7B(人癌细胞) 5×106cells/瓶×2 BHK(幼仓鼠肾细胞)3-乙氧基－4－羟基苯（标准品）Ethyl vanillin质量规格：系统适应性
牛分支杆菌卡介苗PCR检测试剂盒供应ENPEP Others Mouse 小鼠 ENPEP / Aminopeptidase A 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 盐酸苯达莫司汀（标准品）Bendamustine HCl质量规格：HPLC>98%,标准品

CL-0310VE(人内皮细胞)5×106cells/瓶×2澳洲茄边碱（标准品）Solamargine质量规格：HPLC≥95%,标准品

RGC-5, 小鼠视网膜神经节细胞 人单核细胞型瘤，THP1细胞 GC-2spd(ts)(小鼠精母细胞)澳洲茄碱（标准品）Solasonine质量规格：HPLC≥94.50%,标准品

绿色荧光蛋白标记人细胞;MGC803-GFP安格洛苷 C（标准品）Angoroside C质量规格：>98%,标准品

EPCAM Others Human 人 EpCAM / OP1 人细胞裂解液 (阳性对照) 托瑞米芬Toremifene 质量规格：>98%,BR
hMoCD14+-PB-c single donorpre-screened 外周血来源的人类CD14+单核细胞，单一来源，预选型 10 million 人结膜成纤维细胞HConF4'-庚基苯乙酮(>96.0%(GC))质量规格：>96.0%(GC)4'-Heptylacetophenone

人眼球脉络膜成纤维细胞HOCF4'-正辛基苯乙酮(>95.0%(GC))质量规格：>95.0%(GC)4'-n-Octylacetophenone

SIRPG Others Cynomolgus 食蟹猴 SIRPG / SIRP gamma / CD172g 人细胞裂解液 (阳性对照) 4'-戊基苯乙酮(>95.0%(GC))质量规格：>95.0%(GC)4'-Pentylacetophenone

非洲绿猴肾细胞;CV-14-(反-4-丙基环己基)苯腈(>98.0%(GC))质量规格：>98.0%(GC)4-(trans-4-Propylcyclohexyl)benzonitrile

NCI-H1975细胞，人非小细胞 鼠肝星形细胞,HSC-T6细胞 CM-R047大鼠肠微细胞完全培养基100mL4-磺酰杯[4]芳烃水合物(>94.0%(T))质量规格：>94.0%(T)4-Sulfocalix[4]arene Hydrate
反应五要素：
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数*个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。