产地 | 进口、国产 |
品牌 | 帛科 |
货号 | BKP4022 |
用途 | 公司产品仅用物科研 |
包装规格 | 50次 |
纯度 | % |
CAS编号 | |
是否进口 | 是 |
技术服务内容:
实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳,以软件分析电泳条带的灰度值(IOD值),通过与内参基因的灰度值比较,判断目的mRNA的相对表达量。
产品名称 | 英文名称 | 货号 |
鸟分枝杆菌PCR检测试剂盒说明书 | Mycobacterium aviumPCR | BKP4022 |
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μ进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
特点优势:
1. 特异性:鸟分枝杆菌PCR检测试剂盒说明书使用的引物均经过详尽的生物信息学分析,经过GenBank及自建庞大数据库的比对,确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段,可实现对细菌种属及血清型的特异检测,特异性均达到100%。
2. 重现性:该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证,重现性为100%。
3. 灵敏性:该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测,当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时,可实现对其的直接检测,无需繁琐的增菌过程。
4. 实用性:检测范围广,涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌,可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测,整个检测过程为3-4个小时。
5. 优势1:序列资源丰富,除GenBank公布的序列外,公司还进行了大量菌株的序列破译,从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6. 优势2:该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证,凭借公司拥有的丰富的菌种资源,每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证,确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。
反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数*个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
COS-7L, 非洲绿猴肾成纤维细胞碳酸5克
EB病毒转化的人B细胞;KM9401 人内皮细胞完全培养基 100mL固红RC Diazo Red RC 68025-25-2 25G 通用试剂
非必需氨基酸 100XNEAA言醋伊立替康 Irinotqccn xy7nochloridq 13627-09-3
MAP2K4 Others Mouse 小鼠 MKK4 / MEK4 / MAP2K4 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 氧化钇100毫克
人小细胞细胞;NCI-H44658812-37-6川楝素Toosendanin
EFNB2A Others Danio rerio (zebrafish) 斑马鱼 EFNB2A / Ephrin B2a 人细胞裂解液 (阳性对照) 盐酸苯海拉明Diphenhydramine hydrochloride质量规格:>98%,BR
大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞;PC-12 [PC12]盐酸苯海拉明(标准品)Diphenhydramine hydrochloride质量规格:HPLC>99%,标准品
MRC-5细胞,人胚肺细胞 大鼠肺上皮Ⅱ型细胞,RLE-6TN细胞 T-109B弹性蛋白酶(含100mL酶解缓冲液)10mL聚肌苷酸Polyinosinic acid质量规格:≥90.0%,BR
SK-OV-3(人细胞) 5×106cells/瓶×2米屈肼Mildronate,Meldonium质量规格:>99%,BR,二水合物
HUVEC-c Growth Medium 2 pooled 500,000cells 肺大平滑肌细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)米屈肼(标准品)Mildronate,Meldonium质量规格:HPLC≥98%,标准品
鸟分枝杆菌PCR检测试剂盒说明书CD53 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD53 (aa 107-181) 人细胞裂解液 (阳性对照) 阿替美唑盐酸盐(标准品)Atipamezole HCl质量规格:>98%,标准品
小鼠骨髓细胞;FDC-P1阿糖胞苷(标准品)Cytarabine质量规格:HPLC>99%,标准品
LM-6细胞,人细胞系 小鼠细胞,L1210细胞 兔主动脉平滑肌细胞;SMC达卡巴嗪Dacarbazine质量规格:>98.5%,USP31,BR,可用于细胞培养
MA-782(小鼠癌细胞) 5×106cells/瓶×2达卡巴嗪(标准品)Dacarbazine质量规格:>98%,标准品
Promocell C-22062 Smooth Muscle Cell GrowthMedium 2,, 平滑肌细胞生长培养基2型(即用型) 500ml达沙替尼(无水)Dasatinib质量规格:含量>99.0%,无水
人侵袭性脉络膜色素瘤细胞;MuM-2C 大鼠内脏脂肪细胞完全培养基 100mL马尿酸钠培养基100克
M1 小鼠细胞俾氏麦棕Y Biological stain 10114-58-6 25G 通用试剂
PLA2G7 Others Human 人 PLA2G7 / PAFAH 人细胞裂解液 (阳性对照) 炳1醋羌炳酯 xy7noxypropyl ccrylctq 2284-83-
人胚胎肌肉组织来源细胞;CCC-HSM-2草酸钠,英文名或英文缩写:wo7ium oxamate,级别:BR,98%,规格:25克
FUT8 Others Human 人 FUT8 (aa 68-575) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) PectolaseY-23 100mg/500mg/1g/10g原装 Yakult.JAPAN