产地 | 进口、国产 |
品牌 | 帛科 |
货号 | BKP4018 |
用途 | 公司产品仅用物科研 |
包装规格 | 50次 |
纯度 | % |
CAS编号 | |
是否进口 | 是 |
本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。
技术服务内容:
实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳,以软件分析电泳条带的灰度值(IOD值),通过与内参基因的灰度值比较,判断目的mRNA的相对表达量。
产品名称 | 英文名称 | 货号 |
非洲分枝杆菌PCR检测试剂盒说明书 | Mycobacterium africanumPCR | BKP4018 |
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μ进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数*个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
IL10RB Others Mouse 小鼠 IL10RB / IL10R2 人细胞裂解液 (阳性对照) 菊芬,英文名或英文缩写:Inulin,级别:生物技术级,98%,规格:5毫克
KYSE510 (s)-(+)-α-氧基-α-(三拂基)本酰录 (S)-(+)-cLPHc-MqTHOXY-cLPHc-TRIFLUOROMqTHYLPHqNYLcCqTYL CHLORIDq 0442-33-4
Ca Ski人肠转移细胞 Ca human cervical carcinoma Ski cells in iestinal metastasis RPMI-1640(GIBCO)+10%FBSL(-)木糖 L-XYLOSq 609-06-3
FLT3LG Protein Human 重组人 FLT3L / Flt3 ligand / FLT3LG 蛋白 (His 标签)BESTATIN贝他定(本丁抑制素)超级10MG58970-76-6Frozen
小鼠纤维细胞(MLF)(5×105) MiaPaCa-2, 人细胞 Human16052-06-5N-()-N’-丙磺酸 (EPPS)EPPS
EL4.IL-2 小鼠瘤细胞腺苷激酶抑制剂Adenosine Kinase Inhibitor质量规格:美国进口
ERBB2 Others Rhesus 恒河猴 ErbB2 / HER2 人细胞裂解液 (阳性对照) 2-氨基腺苷2-Amino Adenosine质量规格:美国进口
小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-B55'-乙基酰胺基-2',3'-亚异丙基腺苷5'-Ethylcarboxamido-2',3'-isopropylidene Adenosine质量规格:美国进口
CD81 Others Human 人 CD81 / TAPA-1 人细胞裂解液 (阳性对照) 别嘌醇核苷Allopurinol riboside质量规格:美国进口
CM-M069小鼠肾成纤维细胞完全培养基100mLN-乙酰两性霉素BN-Acetyl Amphotericin B质量规格:美国进口
非洲分枝杆菌PCR检测试剂盒说明书FGF14 Protein Human 重组人 FGF14 / SCA27 蛋白 (isoform 1B)DL-丙氨酰-DL-丙氨酸DL-Ala-DL-Ala质量规格:0.97
BNL 1ME A.7R.1(小鼠肝上皮细胞) 5×106cells/瓶×2 人肠微内皮细胞HIMECN-乙酰-DL-谷氨酸Ac-DL-Glu-OH质量规格:>98%,BR
人表皮角质细胞-胎儿HEK-fDL-α-氨基己二酸,2-氨基己二酸DL-a-Aminoadipic acid质量规格:>97%,混旋
VIPR2 Others Human 人 VIPR2 / VPAC2 人细胞裂解液 (阳性对照) DL-半胱氨酸盐酸盐,一水DL-Cysteine·HCl·H2O质量规格:0.98
兔眼Tenon's囊成纤维细胞;RYTFDL-胱氨酸盐酸盐DL-Cysteine hydrochloride质量规格:>98%,BR
S-180细胞,腹水瘤细胞 人细胞,CRL-2780细胞 非洲绿猴肾细胞;VERO顺式(2,3)-二氢丁苯那嗪质量规格:美国进口cis (2,3)-Dihydro Tetrabenazine
大鼠小肠隐窝上皮细胞;IEC-6反式(2,3)-二氢丁苯那嗪质量规格:美国进口trans (2,3)-Dihydro Tetrabenazine
SCARB1 Others Mouse 小鼠 SCARB1 / CD36L1 / CLA-1 人细胞裂解液 (阳性对照) 氟米三甲基乙酸质量规格:美国进口Flumethasone pivalate
上皮细胞培养基MEpiCM-prf爱维莫潘质量规格:美国进口Alvimopan
HA Others H7N2 甲型 H7N2 (A/ruddy turnstone/New Jersey/563/2006) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) N-去甲基拓扑替康质量规格:美国进口N-Desmethyl Topotecan
特点优势:
1. 特异性:非洲分枝杆菌PCR检测试剂盒说明书使用的引物均经过详尽的生物信息学分析,经过GenBank及自建庞大数据库的比对,确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段,可实现对细菌种属及血清型的特异检测,特异性均达到100%。
2. 重现性:该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证,重现性为100%。
3. 灵敏性:该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测,当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时,可实现对其的直接检测,无需繁琐的增菌过程。
4. 实用性:检测范围广,涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌,可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测,整个检测过程为3-4个小时。
5. 优势1:序列资源丰富,除GenBank公布的序列外,公司还进行了大量菌株的序列破译,从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6. 优势2:该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证,凭借公司拥有的丰富的菌种资源,每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证,确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。