公司产品仅用于科研
中文名称： HeLa /DDP（HeLa /DDP）价格
简称：人细胞/DDP

种属：Human

来源：

培养基：   培养条件温度：37℃气相：95%空气，5%二氧化碳产品使用说明：仅供科研研究使用

状态：

产品规格：

单位：

货号：CE048
基本特性：
（ 1 ）组织来源于正常人肺组织。
（ 2 ）鉴定：肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
（ 3 ）原代细胞培养末期液氮冻存。
（ 4 ）每冻存管细胞数： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。

使用方法：
收到细胞HeLa /DDP（HeLa /DDP）价格后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

实验操作：
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶，置于超静台吹干或45℃烘箱烘干（切记保持无菌），4℃冰箱放置，备用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理：将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反复洗涤，去除外部的血渍，洗涤液澄清，用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞：将纵向剪开， 内膜面向上，无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍，去掉内皮细胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗涤3次。
5、分离中膜：将去掉内膜的，继续刮动分离中膜，去掉外膜，用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块，加入1 × PBS （pH 7.4 ），转移到15ml 离心管中，PBS洗涤3次，离心收集沉淀物。
6、消化：在洗净的内膜碎块中加入消化酶液，将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化：吸出消化液入新的离心管中，按1：1加入消化终止液，中止酶反应；余下的组织继续加入消化液，消化15min ，重复消化3次。
8、收集重悬细胞：收集中止后的消化液于离心管中，1000 rpm，离心10 min，弃去上清，加入培养液重悬，染色计数细胞。
9、培养细胞密度：调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养：放置于37℃，5% CO2培养箱中。
钨酸钾500克  人黏着斑激酶(FAK)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

SuperscriptII 2000u/10000u Invitrogen原装  小鼠脱氧胶原交联(DPD)免疫试剂盒 Mouse deoxypyridinoline,DPD ELISA Kit

氢氧化钡shēng huà shì jì容量：RT5克  转基因植物NOS基因核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T

队肖基本醇 4-nitnobqnzyl clcohol 619-73-8  HumanSolubleClusterofdiffereiation38,sCD38ELISA试剂盒人可溶性CD38(sCD38)ELISA试剂盒规格：96T/48T

葡聚糖T1000shēng huà shì jì容量：2000u  小鼠胃标志物CA199ELISAKit小鼠胃标志物CA199ELISAKit，48T/96T小鼠胃标志物CA199ELISAKit，48T/96T规格：48T/96T
葡聚糖T2000shēng huà shì jì容量：保存：-20℃500u  人抗肝特异性脂蛋白抗体(LSP)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

CollagenI 100mg Gibco分装  小鼠己糖激酶(HK)免疫试剂盒 Mouse Hexokinase,HK ELISA Kit

2′-脱氧腺苷-5′-单嶙酸25克RT  异质性胞核核糖核蛋白A1(hNP A1)ELISA试剂盒 ，英文名： hNP A1 ELISA Kit

四氧嘧啶四水(+4℃) clloxcn 20-71-2  Mouseadrenomedullin,ADMELISA试剂盒小鼠肾上腺髓质素(ADM)ELISA试剂盒规格：96T/48T

胞苷-5’-三鳞醋二内盐 Cytidinq-5'-triphosphctq diwo7ium sclt dihydrctq 8101-87-2  ELISAKitFASL小鼠凋亡相关因子配体规格：48T/96T
碱性碳酸shēng huà shì jì容量：RT5克  小鼠叶酸(FA)免疫试剂盒 Mouse Folic acid,FA ELISA Kit

94790-37-1本并三氮唑-N,N,N’,N’-四甲基脲六扶酯 (HBTU)(2-8℃)2-(1H-Benzotriazole-1-yl)-1,1,3,3-tetrametxyluronium hexafluorophosphate  病毒Ⅱ型(DFV-Ⅱ)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T

硅胶板GF25410毫克保存：-20℃  HumanProteinase3Aibody,PR3AbELISA试剂盒人蛋白酶3抗体(PR3Ab)ELISA试剂盒规格：96T/48T

十九酸 Nonadecanoic acid,≥98% 646-30-0 1G 通用试剂  ELISAKitFree-T3小鼠游离三甲状腺原氨酸规格：48T/96T

L-三梨糖 L-(-)-SORBOSq 87-79-6  HumanColonCancerAigen，CCAELISAKit人抗原(CCA)ELISA试剂盒规格：96T/48T
HeLa /DDP（HeLa /DDP）价格蛋白胨shēng huà shì jì容量：25克  Humanai-neuophilgranulesaibody,ANGAELISA试剂盒人抗中性粒细胞颗粒抗体(ANGA)ELISA试剂盒规格：96T/48T

13464-82-9铟 无水Indium sulfate  HumanCathepsinAibodies,CathAbELISAKit人组织蛋白酶抗体(CathAb)ELISA试剂盒规格：96T/48T

焦嶙酸钙shēng huà shì jì容量：RT1克  人EB病毒IgG(EBv IgG)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

(2-乙基)醚 Vinyl(2-chloroethyl),98% 110-75-8 25G 通用试剂  兔紧张素Ⅱ(ANG-Ⅱ)免疫试剂盒 Rabbit angiotension Ⅱ,ANG-Ⅱ ELISA Kit

/四氢硼钾//钾氢化硼/Potassium borohydride CP，95%，及 50克 国产  羟基胶原交联(OH-PYD)ELISA试剂盒 ，英文名： OH-PYD ELISA Kit
操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。