产地 | 科研 |
保存条件 | 低温冷藏 |
品牌 | 帛科 |
货号 | CE061 |
用途 | 公司产品仅用于科研 |
组织来源 | 上皮样 |
细胞形态 | Gi50 大于100nM |
是否是肿瘤细胞 | 否 |
CAS编号 | |
保质期 | 详见说明书 |
器官来源 | 详见说明书 |
免疫类型 | 详见说明书 |
品系 | 详见说明书 |
生长状态 | 详见说明书 |
物种来源 | Human |
包装规格 | |
纯度 | % |
是否进口 | 是 |
公司产品仅用于科研
中文名称: A2780/Cisplatin现货供应
简称:人顺铂耐药细胞
种属:Human
来源:上皮样
培养基:1640+10%FBS+1uM Cisplatinum
状态:Gi50 大于100nM
产品规格:贴壁
单位:
货号:CE061
基本特性:
( 1 )组织来源于正常人肺组织。
( 2 )鉴定:肌动蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
( 3 )原代细胞培养末期液氮冻存。
( 4 )每冻存管细胞数: 500000cells/1ml 。
( 5 )肌动蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
( 6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。
使用方法:
收到细胞A2780/Cisplatin现货供应后,请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜,以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中,37℃温浴3min左右;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后吸弃消化液,再加入完全培养液终止消化;
3) 用吸管轻轻吹打混匀,按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代,然后补充新鲜的完全培养基至5mL,放入37℃,5% CO2细胞培养箱中培养;
4) 待细胞完全贴壁后,培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。
实验操作:
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶,置于超静台吹干或45℃烘箱烘干(切记保持无菌),4℃冰箱放置,备用。
2、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理:将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS (pH 7.4 )中反复洗涤,去除外部的血渍,洗涤液澄清,用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞:将纵向剪开, 内膜面向上,无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍,去掉内皮细胞,用1 × PBS (pH 7.4 )洗涤3次。
5、分离中膜:将去掉内膜的,继续刮动分离中膜,去掉外膜,用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块,加入1 × PBS (pH 7.4 ),转移到15ml 离心管中,PBS洗涤3次,离心收集沉淀物。
6、消化:在洗净的内膜碎块中加入消化酶液,将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化:吸出消化液入新的离心管中,按1:1加入消化终止液,中止酶反应;余下的组织继续加入消化液,消化15min ,重复消化3次。
8、收集重悬细胞:收集中止后的消化液于离心管中,1000 rpm,离心10 min,弃去上清,加入培养液重悬,染色计数细胞。
9、培养细胞密度:调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养:放置于37℃,5% CO2培养箱中。
代乙酰胺1克 人干细胞抗原(PSCA)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
87-62-72,6-;2-基间二;1-基-2,6-二;2-基-1,3-二甲基本;连间2,6-Dimetxylaniline;2-AMino-1,3-dimetxylbenzene;vic-M-Xylidine;2,6-Xylidine;2-AMino-M-xylene;1-AMino-2,6-dimetxylbenzene 小鼠紧张素Ⅱ(ANG-Ⅱ)免疫试剂盒 Mouse angiotension Ⅱ,ANG-Ⅱ ELISA Kit
细胞松弛素Bshēng huà shì jì容量:1公斤 日本血吸虫(SJ)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T
2-溴-4-肖基 N-氧,97% 2-Bromo-4-nitnopyridinq 1-oxidq 209-43-0 Humaetinolbindingprotein4,RBP-4ELISA试剂盒人视黄醇结合蛋白4(RBP-4)ELISA试剂盒规格:96T/48T
鞣酸,英文名或英文缩写:Tannic acid,级别:CP,98%,规格:50毫升 ELISAKitTXB2小鼠素B2规格:48T/96T
大黄根酸shēng huà shì jì容量:100克 大鼠白介素2受体(IL-2R)ELISA检测试剂盒RatIerleukin-2receptor,IL-2RELISAkit 96T/48T
D-Glucose-6-PhosphateNa2 100mg/500mg/1g/5g Sigma G7250 人chemerin 免疫试剂盒 Human chemerin ELISA Kit
对本二酚100毫克 英文名称MousesecretoryIgAELISAKit小鼠分泌型IgA(sIgA)ELISA试剂盒规格:96T/48T
雾抑制剂 Chromium-fog inhibitor 冰冻切片免疫组织化学HRP酶联DAB直接检测试剂盒(含HRP一抗)10次
聚乙二醇 6000 Poly(ethylene glycol) 6,000 (PEG6000) 25322-68-3 500G 通用试剂 RatApolipoproteinH,Apo-HELISA试剂盒大鼠载脂蛋白H(Apo-H)ELISA试剂盒规格:96T/48T
纯水25克RT 猪雌激素(E)免疫试剂盒 Pig Esogen,E ELISA Kit
71119-23-82-吗啉乙磺酸钠 MES-NaMES wo7ium salt Humangrowthhormone,HGHELISAKIT 人生长因子(HGH)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
硫代钾shēng huà shì jì容量:RT500克 Humanoctameranscriptionfactor2A,OTF2AELISA试剂盒人八聚体转录因子(OTF2A)ELISA试剂盒规格:96T/48T
2,4-二肖基本安;1-安基-2,4-二肖基本 2,4-cnilinq;2,4-bqnzqncMinq;2,4-phqnylcMinq 1997--9 ELISAKitTM猪调节蛋白规格:48T/96T
血琼脂基础2号shēng huà shì jì容量:100克 HumanEsiol,E3ELISAKit人雌三醇(E3)ELISA试剂盒规格:96T/48T
A2780/Cisplatin现货供应赤霉素GA3500克 ELISAKitPEB1人空肠弯曲菌黏附蛋白规格:48T/96T
(Bovine) 小鼠Ⅳ型胶原α1(COL4α1)ELISA试剂盒 ,英文名: COL4α1 ELISA Kit
钪氧,英文名或英文缩写:Scandium oxide,级别:BR,98%,规格:100克 人特异性β1糖蛋白(SP1/PSβ1-G)ELISA检测试剂盒HumanPregnancySpecificβ1Glycoprotein,SP1/PSβ1-GELISAKit 96T/48T
典化铵;典化铔 cMMoniuM iodidq 107-06-4 大鼠抑制素免疫试剂盒 Rat Obestatin ELISA Kit
马尿酰-组酰-亮酸,英文名或英文缩写:N-Hippuryl-His-Leu hydrate,级别:BR,98%,规格:25克 CLIAKitforUP(HumanProteinuria)ELISAKit人规格:48T/96T
操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。