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产地 | 科研 |
保存条件 | 低温冷藏 |
品牌 | 帛科 |
货号 | CE031 |
用途 | 公司产品仅用于科研 |
组织来源 | |
细胞形态 | 悬浮 |
是否是肿瘤细胞 | 否 |
CAS编号 | |
保质期 | 详见说明书 |
器官来源 | 详见说明书 |
免疫类型 | 详见说明书 |
品系 | 详见说明书 |
生长状态 | 详见说明书 |
物种来源 | Human |
包装规格 | |
纯度 | % |
是否进口 | 是 |
基本特性:
( 1 )组织来源于正常人肺组织。
( 2 )鉴定:肌动蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
( 3 )原代细胞培养末期液氮冻存。
( 4 )每冻存管细胞数: 500000cells/1ml 。
( 5 )肌动蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
( 6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。
公司产品仅用于科研
中文名称: HCT15/Fu价格
简称:人结氟尿嘧啶耐药株
种属:Human
来源:
培养基:1640+10%FBS+1%P/S +20ug/ml 5-FLU
状态:
产品规格:
单位:
货号:CE031
使用方法:
收到细胞HCT15/Fu价格后,请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜,以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中,37℃温浴3min左右;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后吸弃消化液,再加入完全培养液终止消化;
3) 用吸管轻轻吹打混匀,按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代,然后补充新鲜的完全培养基至5mL,放入37℃,5% CO2细胞培养箱中培养;
4) 待细胞完全贴壁后,培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。
实验操作:
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶,置于超静台吹干或45℃烘箱烘干(切记保持无菌),4℃冰箱放置,备用。
2、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理:将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS (pH 7.4 )中反复洗涤,去除外部的血渍,洗涤液澄清,用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞:将纵向剪开, 内膜面向上,无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍,去掉内皮细胞,用1 × PBS (pH 7.4 )洗涤3次。
5、分离中膜:将去掉内膜的,继续刮动分离中膜,去掉外膜,用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块,加入1 × PBS (pH 7.4 ),转移到15ml 离心管中,PBS洗涤3次,离心收集沉淀物。
6、消化:在洗净的内膜碎块中加入消化酶液,将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化:吸出消化液入新的离心管中,按1:1加入消化终止液,中止酶反应;余下的组织继续加入消化液,消化15min ,重复消化3次。
8、收集重悬细胞:收集中止后的消化液于离心管中,1000 rpm,离心10 min,弃去上清,加入培养液重悬,染色计数细胞。
9、培养细胞密度:调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养:放置于37℃,5% CO2培养箱中。
操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
无水氧化钡,英文名或英文缩写:Barium oxide,级别:CP,99%,规格:25克 HumanCalretinin,CRELISA试剂盒人钙结合蛋白(CR)ELISA试剂盒规格:96T/48T
Paclobutrazol 10g/250g 国产 重组逆转录病毒稳态表达细胞克隆冻存试剂盒50次
GENEPAGE6%EZSQUEEZE*CLDPAK*6% GENE-PAGE, 挤压式瓶装生物技术级5X75MLCOLD Humansolubleierleukin-1receptorⅠ,IL-1sRⅠELISAKit人白介素1可溶性受体Ⅰ(IL-1sRⅠ)ELISA试剂盒规格:96T/48T
紫外光吸收剂UV-360 Bisoctrizolq 103297-42-1 小鼠白介素4(IL-4)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Alloxanmonohydrate阿脲一水合物25克CP Rat heat shock protein 96 (HSP gp96) ELISA Kit 大鼠热休克蛋白糖蛋白96(HSP gp96)ELISA试剂盒
葡糖酸内酯shēng huà shì jì容量:100克 人抗纺锤体抗体(MSA)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
CollagenaseV 100mg Sigma分装 小鼠基质金属蛋白酶8/中性粒细胞胶原酶(MMP-8)免疫试剂盒 Mouse maix metalloproteinase 8/Neuophil collagenase,MMP-8 ELISA kit
5-胞苷二嶙酸单钠盐100克 乙酰辅酶A羧化酶合成酶(ACC)ELISA试剂盒 ,英文名: ACC ELISA Kit
cLLTqC-1000 MouseAmylinELISA试剂盒小鼠胰淀素(Amylin)ELISA试剂盒规格:96T/48T
松胞速B(-20℃) CYTOCHcLcSIN B 14930-96- ELISAKitCETP小鼠胆固醇酯转移蛋白规格:48T/96T
结合珠蛋白,英文名或英文缩写:Haptoglobin from pooled human plasma,级别:高纯,50u/mg,规格:100克 人转化生长因子β2(TGFβ2)免疫试剂盒 Human TGF β2 ELISA Kit
肉汤琼脂培养基Broth Agar Medium 硫嘌呤S-甲基转换酶(TPMT)ELISA试剂盒 ,英文名: TPMT ELISA Kit
COLOREDLAEMMLISTACKINGGELSOLUTION浓缩胶溶液(带颜色)蛋白组学级透明洋红色液体RTsigma Ratbasicfibroblastgrowthfactor,bFGFELISA试剂盒大鼠碱性成纤维生长因子(bFGF)ELISA试剂盒规格:96T/48T
5-溴-2- 5-Bromo-2-fluoro,97% 93777-26-5 5G 通用试剂 HumanCollageypeⅠ,ColⅠELISA试剂盒人Ⅰ型胶原(ColⅠ)ELISA试剂盒规格:96T/48T
阿米卡星/丁胺卡那霉素/阿米卡霉素/O-3-基-3-脱氧-alpha-D-葡糖基-(1→6)-O-(6-基-6-脱氧-alpha-D-葡糖基-(1→4)-N-(4-基-2-羟基-1-氧丁基)-2-脱氧-D-链霉胺盐/Amikacin sulfate salt BR,674-786ug/mg 250/1000毫克 国产/进口 HumanErythropoietin,EPOELISAKit人红细胞生成素(EPO)ELISA试剂盒规格:96T/48T
HCT15/Fu价格靛蓝胭脂红shēng huà shì jì容量:5克 ELISAKitP-PKC人化蛋白激酶C规格:48T/96T
D-Galacturonicacid 5g/10g/25g原装 Fluka 48280 小鼠CD34分子(CD34)ELISA试剂盒 ,英文名: CD34 ELISA Kit
酚酞二嶙酸四钠盐1克保存:-20℃ 大鼠凝血因子Ⅲ(FⅢ)ELISA检测试剂盒RatcoagulationfactorⅢ,FⅢELISAKit 96T/48T
姆沙伯 G NAW ChroMosorb G NcW; 人c-fos 免疫试剂盒 Human c-fos ELISA Kit
聚乙二醇 600 Poly(ethylene glycol) 600 (PEG 600) 25322-68-3 250G 通用试剂 英文名称MouseDPP4ELISAKit小鼠二肽基肽酶IV(DPP4)规格:96T/48T