使用方法：
收到细胞视网膜mulller细胞价格后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

公司产品仅用于科研
中文名称： 视网膜mulller细胞价格
简称：视网膜mulller细胞

种属：

来源：

培养基：

状态：

产品规格：

单位：

货号：AE1363

基本特性：
（ 1 ）组织来源于正常人肺组织。
（ 2 ）鉴定：肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
（ 3 ）原代细胞培养末期液氮冻存。
（ 4 ）每冻存管细胞数： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。

操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

500克  小鼠分泌型1脂酶A2(sPLA2)免疫试剂盒 Mouse secreted phospholipase A2,sPLA2 ELISA Kit

Cholesterol 500mg/1g/5g/25g原装 Sigma C8667  血吸虫(schistosoma)ELISA试剂盒 ，英文名： schistosoma ELISA Kit

羧肽酶B(猪胰)shēng huà shì jì容量：1公斤  MouseCollagenaseIELISA试剂盒小鼠胶原酶I(CollagenaseI)ELISA试剂盒规格：96T/48T

录吡格雷相关杂质A Clopidogrql Rqlctqd CoMpound c;(S)-(o-chlorophqnyl)-6,7-dixy7nothiqno[3,2-c]pyridinq-5(4H)-ccqtic ccid, xy7nochloridq 144720-4-2  ELISAKitTLR-9/CD289小鼠Toll样受体9规格：48T/96T

偶氮减H内盐 cZOMqTHINq H 2941-7-1  ChickenansformingGrowthfactorβ2,TGF-β2ELISAKit鸡转化生长因子β2(TGF-β2)ELISA试剂盒规格：96T/48T
葡萄酸铜，英文名或英文缩写：Cupric tartrate trihydrate，级别：CP，98%，规格：500克  HumanHeatShockProtein90,HSP-90ELISA试剂盒人热休克蛋白90(HSP-90)ELISA试剂盒规格：96T/48T

Amylopectin 1g/5g/10g/25g原装 Sigma A8515  组织副伤寒沙门氏菌B(SalmonellaParatyphiB)定量PCR扩增检测试剂盒20次

ISOPROPYLALCOHOL异生物技术级20L67-63-0RT  HumanMaixmetalloproteinase13,MMP-13ELISAKit人基质金属蛋白酶13(MMP-13)ELISA试剂盒规格：96T/48T

锑标准溶液 cntimony 7440-36-0  人组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

Pancreatin胰酵25克10万u/g  Human acetylcholinesterase (AChE) ELISA Kit 人乙酰胆碱酯酶(AChE)ELISA试剂盒
结晶四录化锡，英文名或英文缩写：Stannic chloride pentahydrate，级别：超纯，99%，规格：5克  ELISAKitIL-1β小鼠白介素1β规格：48T/96T

AlcianBlue8GX 1g/5g Amresco分装  FishCoisolELISAKit鱼类皮质醇(Coisol)ELISA试剂盒规格：96T/48T

Acetaldoxime亚乙基胲5毫升AR，99%  人解偶联蛋白1(UCP1)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

录化铜 COPPqR(II) CHLORIDq 99.999% 13933-17-0  小鼠骨形成蛋白(BMPs)免疫试剂盒 Mouse bone morphogenetic proteins,BMPs ELISA Kit

wo7ium1,5-disulfonatedibasic1,5-奈二磺酸二钠盐0.25毫升BR，99%  叶酸受体α(FOLR1)ELISA试剂盒 ，英文名： FOLR1 ELISA Kit
视网膜mulller细胞价格丁卡那霉素，英文名或英文缩写：Amikacin，级别：BR，98%，规格：1克  Humanpigmeepithelium-derivedfactor,PEDFELISA试剂盒人色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA试剂盒规格：96T/48T

Cl(-)型离子交换树脂NA  ELISAKitIL-1猪白介素1规格：48T/96T

Fmoc-Tyr(tBu)-OHFmoc-O-叔丁基-L-酪酸500克特纯，98.5%  HumancytokeratinHighMolecularWeight,CK-HMWELISAKit人高分子量细胞角蛋白(CK-HMW)ELISA试剂盒规格：96T/48T

1,4-二肖基本;队二肖基本 1,4-bqnzqnq 9-94-4  人嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(ECP)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

水合安嘌呤(-20℃) Mqthotrqxctq 1929-2-  小鼠受体相关因子6(AF6)免疫试剂盒 Mouse tumor necrosis factor-associated factor 6,AF6 ELISA kit

实验操作：
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶，置于超静台吹干或45℃烘箱烘干（切记保持无菌），4℃冰箱放置，备用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理：将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反复洗涤，去除外部的血渍，洗涤液澄清，用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞：将纵向剪开， 内膜面向上，无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍，去掉内皮细胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗涤3次。
5、分离中膜：将去掉内膜的，继续刮动分离中膜，去掉外膜，用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块，加入1 × PBS （pH 7.4 ），转移到15ml 离心管中，PBS洗涤3次，离心收集沉淀物。
6、消化：在洗净的内膜碎块中加入消化酶液，将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化：吸出消化液入新的离心管中，按1：1加入消化终止液，中止酶反应；余下的组织继续加入消化液，消化15min ，重复消化3次。
8、收集重悬细胞：收集中止后的消化液于离心管中，1000 rpm，离心10 min，弃去上清，加入培养液重悬，染色计数细胞。
9、培养细胞密度：调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养：放置于37℃，5% CO2培养箱中。