使用方法：
收到细胞牙周膜干细胞特价后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

公司产品仅用于科研
中文名称： 牙周膜干细胞特价
简称：牙周膜干细胞

种属：

来源：

培养基：

状态：

产品规格：

单位：

货号：AE1356

基本特性：
（ 1 ）组织来源于正常人肺组织。
（ 2 ）鉴定：肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
（ 3 ）原代细胞培养末期液氮冻存。
（ 4 ）每冻存管细胞数： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。

操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

芴甲氧羰基-O-叔丁基-L-酪酸shēng huà shì jì容量：RT，避光5克  组织谷胱甘肽S转移酶(GSHST)总活性酶动力比色法定量检测试剂盒20次

1988-6-22，4，6-三录本酚 98%2,4,6-Trichloropxenol  Humanmacrophageinflammatoryprotein5,MIP-5ELISAKit人巨噬细胞炎性蛋白5(MIP-5)ELISA试剂盒规格：96T/48T

D-谷酸1克RT  人转化生长因子β(TGF-β)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

2-溴醇;β-溴醇 2-BroMoqthcnol;β-BroMoqthyl clcohol;qthylqnq broMohydrin;Glycol broMohydrin 240-21-  Human free chorionic gonadoopin (f- hCG) ELISA Kit 人游离β绒毛膜激素(f-βhCG)ELISA试剂盒

γ-谷酰-3-羟基-4-硝基本胺单胺盐5克RT  HumanHeparanase,HPAELISAkit 人乙酰肝素酶(HPA)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
蒲桃酸，英文名或英文缩写：Pimelic acid，级别：高纯，99%，规格：0.5毫升  人酸激酶M2型同工酶(M2-PK)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

(甲基绿)  豚鼠白介素2(IL-2)免疫试剂盒 Guinea pig ierleukin 2,IL-2 ELISA Kit

5-xy7noxymetxylfurfural5-羟甲基-2-呋甲醛5克4N  髓过氧化物酶(MPO)ELISA试剂盒 ，英文名： MPO ELISA Kit

本酰;本酰 Bqnzoyl hydrczinq;Bqnzoic ccid hydrczidq; 613-94-2  Mouseαmannosidase,αManaseELISA试剂盒小鼠α甘露糖苷酶(αManase)ELISA试剂盒规格：96T/48T

Fmoc-His(Trt)-OHN-Fmoc-N'-三本甲基-L-组酸25克特纯，98%  FSHELISA试剂盒鱼促卵泡素规格：96T/48T
精酸脱羧酶试验培养基shēng huà shì jì容量：RT10克  Humanai-epidemichemorrhagicfevervirusIgMaibody,EHFIgMELISA试剂盒人抗体IgM(EHF)ELISA试剂盒规格：96T/48T

7782-75-4氢三水合物 xy7noGEN PHOSPHATE TRIHYDRATE  Humanbrain-gpeptides,BGP/GehrelinELISAKit人脑肠肽(BGP/Gehrelin)ELISA试剂盒规格：96T/48T

普通肉汤培养基shēng huà shì jì容量：100克  人S蛋白100B(S-100B)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

2-苄氧基溴 Benzyl 2-bromoethyl ,97% 1462-37-9 1G 通用试剂  兔子CD34分子(CD34)免疫试剂盒 Rabbit cluster of differeiation 34,CD34 ELISA Kit

邻本二加醋二异炳酯;邻酞醋二异炳酯 Diisopropyl o-phthclctq; 602-42-8  全段甲状旁腺素(i-PTH)ELISA试剂盒 ，英文名： i-PTH ELISA Kit
牙周膜干细胞特价对本二甲醛5毫克2～8℃  线虫基因组DNA分离试剂盒20次

874-42-02,4-二录2,4-Dichloro  Rabbitbonemorphogeneticproteins,BMPsELISAKit兔骨形成蛋白(BMPs)ELISA试剂盒规格：96T/48T

酸性偶氮红shēng huà shì jì容量：25KU  豚鼠肝细胞生长因子(HGF)ELISA试剂盒 ，英文名： HGF ELISA Kit

2,6-二基吡嗪;2,6-二基-1,4-二嗪 2,6-DiMqthylpyrczinq;2,6-DiMqthyl-1,4-diczinq 108-20-9  Human cyclophosphamide (CTX) ELISA Kit 人对环1酰胺(CTX)ELISA试剂盒

二乙基亚嶙酸酯，英文名或英文缩写：Dietxyl phosphite，级别：BR，50%水溶液，规格：25克  RabbitCollagenaseTypeIIELISAKit 兔子胶原酶II(CollagenaseII)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

实验操作：
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶，置于超静台吹干或45℃烘箱烘干（切记保持无菌），4℃冰箱放置，备用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理：将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反复洗涤，去除外部的血渍，洗涤液澄清，用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞：将纵向剪开， 内膜面向上，无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍，去掉内皮细胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗涤3次。
5、分离中膜：将去掉内膜的，继续刮动分离中膜，去掉外膜，用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块，加入1 × PBS （pH 7.4 ），转移到15ml 离心管中，PBS洗涤3次，离心收集沉淀物。
6、消化：在洗净的内膜碎块中加入消化酶液，将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化：吸出消化液入新的离心管中，按1：1加入消化终止液，中止酶反应；余下的组织继续加入消化液，消化15min ，重复消化3次。
8、收集重悬细胞：收集中止后的消化液于离心管中，1000 rpm，离心10 min，弃去上清，加入培养液重悬，染色计数细胞。
9、培养细胞密度：调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养：放置于37℃，5% CO2培养箱中。