公司产品仅用于科研
中文名称： 视网膜微内皮细胞现货供应
简称：视网膜微内皮细胞

种属：

来源：

培养基：

状态：

产品规格：

单位：

货号：AE1354
基本特性：
（ 1 ）组织来源于正常人肺组织。
（ 2 ）鉴定：肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
（ 3 ）原代细胞培养末期液氮冻存。
（ 4 ）每冻存管细胞数： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。

使用方法：
收到细胞视网膜微内皮细胞现货供应后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

实验操作：
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶，置于超静台吹干或45℃烘箱烘干（切记保持无菌），4℃冰箱放置，备用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理：将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反复洗涤，去除外部的血渍，洗涤液澄清，用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞：将纵向剪开， 内膜面向上，无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍，去掉内皮细胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗涤3次。
5、分离中膜：将去掉内膜的，继续刮动分离中膜，去掉外膜，用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块，加入1 × PBS （pH 7.4 ），转移到15ml 离心管中，PBS洗涤3次，离心收集沉淀物。
6、消化：在洗净的内膜碎块中加入消化酶液，将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化：吸出消化液入新的离心管中，按1：1加入消化终止液，中止酶反应；余下的组织继续加入消化液，消化15min ，重复消化3次。
8、收集重悬细胞：收集中止后的消化液于离心管中，1000 rpm，离心10 min，弃去上清，加入培养液重悬，染色计数细胞。
9、培养细胞密度：调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养：放置于37℃，5% CO2培养箱中。
雾抑制剂shēng huà shì jì容量：2～8℃1毫克  牛胆酸(Cholicacid)ELISA检测试剂盒BovineCholicacidELISAKit 96T/48T

52092-43-02-溴-4-硝基　N-氧，97%2-Bromo-4-nitnopyridine 1-oxide  人B细胞κ 轻肽基因增强子核因子抑制因子ε(NFKBIE)免疫试剂盒 Human NFKBIE ELISA Kit

N-三(羟甲基)甲基-3-基丙磺酸钠盐50次/300ul/支保存：-20℃  英文名称MouseEpidermalgrowthFactorELISAKit小鼠表皮细胞生长因子(EGF)规格：96T/48T

2，3-二基-2-环务烯-1-同 2,3-DIMqTHYL-2-CYCLOPqNTqN-1-ONq 111-02-7  冰冻切片蔗糖酶活性染色试剂盒50次

2-奈胺-1-磺酸25克  Ratcarbonicanhydrase2,CA-2ELISA试剂盒大鼠酶2(CA-2)ELISA试剂盒规格：96T/48T
七号胆盐shēng huà shì jì容量：25克  ELISAKitMCP-4/CCL13小鼠单核细胞趋化蛋白4规格：48T/96T

(胶原酶  HeneggImmunoglobulinofYolk,IgYELISAKit鸡卵黄免疫球蛋白(IgY)ELISA试剂盒规格：96T/48T

3-吲哚25克  人抗体(ai-HDV)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

醋烯炳酯 99% cllyl ccqtctq 291-87-7  小鼠基质金属蛋白酶5(MMP-5)免疫试剂盒 Mouse maix metalloproteinase 5,MMP-5 ELISA Kit

胞嘧啶;4-安基-2-羌基嘧啶;;氧胞嘧啶;胞嗪;4-安基-2-羌基嘧啶 Cytosinq;4-cMino-2-oxo-1,2- dixy7nopyriMidinq;4-cMino-2-pyriMidinol;Cyt 71-30-7  乙酰胆碱受体抗体(AChRab)ELISA试剂盒 ，英文名： AChRab ELISA Kit
井冈霉素5克  人单核细胞增多性李斯特菌素(listeriolysin)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

(对硝本基-b-D-  小鼠6酮素(6-K-PG)免疫试剂盒 Mouse 6-keto-prostaglandin,6-K-PG ELISA Kit

四，英文名或英文缩写：Lead(IV)acetate，级别：CP，98.5%，规格：1克  突触回蛋白2(SYNJ2)ELISA试剂盒 ，英文名： SYNJ2 ELISA Kit

8-羌基流醋盐;流醋-8-羌基;流醋氧化;奎诺苏 8-xy7noxyinoneolinq sulfctq;8-inoneophqnol sulfctq;Oxinq sulfctq;inoneosol;Chinosol 134-31-6  MouseP-SelectinELISA试剂盒小鼠P选择素(P-Selectin/CD62P)ELISA试剂盒规格：96T/48T

锗，英文名或英文缩写：Germanium，级别：AR，99.5%，规格：25克  ChickenHerpessimplexvirusⅡaibody,HSVⅡ-AbELISA试剂盒鸡单纯病毒Ⅱ型抗体(HSVⅡ-Ab)ELISA试剂盒规格：96T/48T
视网膜微内皮细胞现货供应对本二酸二shēng huà shì jì容量：100克  Humanurokinaseplasminogenactivator,uPAELISA试剂盒人尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)ELISA试剂盒规格：96T/48T

(马铃薯淀粉)  ELISAKitACP-5b小鼠抗酸性酶5b规格：48T/96T

2，6-二叔丁基对500毫克  Humanai-cytomegalovirusIgMaibody,ai-CMVIgMELISAKit人胎儿血红蛋白(HBF)ELISA试剂盒规格：96T/48T

4-肖基本;队肖基本 4-nitnophqnylhydrczinq 100-16-3  人抗组蛋白抗体(AHA)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

L-阿拉伯糖1克2～8℃  小鼠免疫球蛋白A(IgA)免疫试剂盒 Mouse Immunoglobulin,IgA ELISA Kit
操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。