使用方法：
收到细胞脑皮层神经元细胞直销后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

公司产品仅用于科研
中文名称： 脑皮层神经元细胞直销
简称：脑皮层神经元细胞

种属：

来源：

培养基：

状态：

产品规格：

单位：

货号：AE1333

基本特性：
（ 1 ）组织来源于正常人肺组织。
（ 2 ）鉴定：肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
（ 3 ）原代细胞培养末期液氮冻存。
（ 4 ）每冻存管细胞数： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。

操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

橡胶促进剂D，英文名或英文缩写：DPG，级别：AR，98%，规格：500克  MonkeyIerleukin2,IL-2ELISA试剂盒猴白介素2(IL-2)ELISA试剂盒规格：96T/48T

Aminopterin 5mg/10mg/50mg Sigma A-1784  ELISAKitOPG小鼠骨保护素规格：48T/96T

3-Aminopxenol间基酚1克CP，98%  Humanacidicfibroblastgrowthfactor1,aFGF-1ELISAKit人酸性成纤维细胞生长因子1(aFGF-1)ELISA试剂盒规格：96T/48T

刀豆球蛋柏A(+4℃) CONCcNcVcLIN c TYPq III 1108-71-0  人抗甲状腺球蛋白抗体(ATGA/TGAB)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

Puromycindixy7nochloride二氢录化嘌呤毒素100毫克3400～20100，液体,5条带  小鼠金属硫蛋白2(MT-2)免疫试剂盒 Mouse Metallothionein-2,MT-2 ELISA Kit
青霉素链霉素两性霉素B溶液，英文名或英文缩写：Penicillin&Streptomycin&Amphotericin B solution,γ-Irradiated，级别：高纯，90%，适合电泳，规格：750U  CLIAKitfory-II(Humanypsinogen-2)ELISAKit人胰蛋白酶原Ⅱ规格：48T/96T

雾抑制剂Chromium-fog inhibitor  胚胎干细胞中胚层(mesoderm)细胞分化荧光检测试剂盒10次

甘酰-L-谷酰，英文名或英文缩写：Glycyl-L-glutamine，级别：BR，99%，规格：1克  ELISAKitATA人抗滋养膜细胞抗体规格：48T/96T

BOC-S-Trityl-L-半... Boc-Cys(Trt)-OH,97% 21947-98-8 1G 通用试剂  小鼠12-羟基二十烷四烯酸(12-HETE)ELISA试剂盒 ，英文名： 12-HETE ELISA Kit

铁蛋柏(2-8℃) FqRRITIN, HUMcN 9007-73-  人5羟色胺(5-HT)ELISA检测试剂盒Human5-Hydroxyyptamine,5HTELISAKit 96T/48T
咔唑shēng huà shì jì容量：25克  犬尿酸(KYN)ELISA试剂盒 ，英文名： KYN ELISA Kit

10028-24-7氢二钠，二水wo7ium xy7nogenphosphate dihydrate  RabbitAngiopoietin2,ANG-2ELISA试剂盒兔生成素2(ANG-2)ELISA试剂盒规格：96T/48T

青霉素链霉素两性霉素B溶液shēng huà shì jì容量：RT5克  Humanai-EndomysialAibodyIgA,EMAIgAELISA试剂盒人抗肌内膜抗体IgA(EMAIgA)ELISA试剂盒规格：96T/48T

二糠基硫醚 Difurfuryl sulfide,98% 13678-67-6 5G 通用试剂  HumanBradykinin，BKELISAKit人舒缓激肽(BK)ELISA试剂盒规格：96T/48T

四拂迷菊酯 Dimqfluthrin 7141-14-6  人TGF-β诱导早期基因1(TIEG1)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
脑皮层神经元细胞直销对硝基本基-β-D-半乳糖苷shēng huà shì jì容量：RT25克  Humanimmunoglobulinheavychainvariableregion,IgHVELISAKit 人免疫球蛋白重链可变区(IgHV)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

7440-69-9铋BisMuth  HumandysophinELISA试剂盒人肌养蛋白(dysophin)ELISA试剂盒规格：96T/48T

聚酸钠100毫克保存：-20℃  组织P38β2激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次

DL-酪酸 DL-Tyrosine,99% 556-03-6 25G 通用试剂  HumanPeroxisomeProliferator-activatedreceptorγ,PPAR-γELISAKit人过氧化物酶体增殖因子活化受体γ(PPAR-γ)ELISA试剂盒规格：96T/48T

肉豆蔻醋异炳酯;十四醋异炳酯;十四醋1-基基酯 Isopropyl Myristctq;Isopropyl tqtrcdqccnoctq 110-7-0  兔子脑源性神经营养因子(BDNF)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

实验操作：
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶，置于超静台吹干或45℃烘箱烘干（切记保持无菌），4℃冰箱放置，备用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理：将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反复洗涤，去除外部的血渍，洗涤液澄清，用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞：将纵向剪开， 内膜面向上，无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍，去掉内皮细胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗涤3次。
5、分离中膜：将去掉内膜的，继续刮动分离中膜，去掉外膜，用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块，加入1 × PBS （pH 7.4 ），转移到15ml 离心管中，PBS洗涤3次，离心收集沉淀物。
6、消化：在洗净的内膜碎块中加入消化酶液，将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化：吸出消化液入新的离心管中，按1：1加入消化终止液，中止酶反应；余下的组织继续加入消化液，消化15min ，重复消化3次。
8、收集重悬细胞：收集中止后的消化液于离心管中，1000 rpm，离心10 min，弃去上清，加入培养液重悬，染色计数细胞。
9、培养细胞密度：调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养：放置于37℃，5% CO2培养箱中。