基本特性：
（ 1 ）组织来源于正常人肺组织。
（ 2 ）鉴定：肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
（ 3 ）原代细胞培养末期液氮冻存。
（ 4 ）每冻存管细胞数： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。
公司产品仅用于科研
中文名称： 脾基质细胞直销
简称：脾基质细胞

种属：

来源：

培养基：

状态：

产品规格：

单位：

货号：AE1321

使用方法：
收到细胞脾基质细胞直销后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

实验操作：
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶，置于超静台吹干或45℃烘箱烘干（切记保持无菌），4℃冰箱放置，备用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理：将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反复洗涤，去除外部的血渍，洗涤液澄清，用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞：将纵向剪开， 内膜面向上，无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍，去掉内皮细胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗涤3次。
5、分离中膜：将去掉内膜的，继续刮动分离中膜，去掉外膜，用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块，加入1 × PBS （pH 7.4 ），转移到15ml 离心管中，PBS洗涤3次，离心收集沉淀物。
6、消化：在洗净的内膜碎块中加入消化酶液，将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化：吸出消化液入新的离心管中，按1：1加入消化终止液，中止酶反应；余下的组织继续加入消化液，消化15min ，重复消化3次。
8、收集重悬细胞：收集中止后的消化液于离心管中，1000 rpm，离心10 min，弃去上清，加入培养液重悬，染色计数细胞。
9、培养细胞密度：调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养：放置于37℃，5% CO2培养箱中。

操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

锌棒，英文名或英文缩写：Zinc，级别：超纯，98%，规格：50毫升  HumanSomatostatin,SSELISA试剂盒人生长抑素(SS)ELISA试剂盒规格：96T/48T

13X分子筛13X molecular sieve  ELISAKitCA-2小鼠酶2规格：48T/96T

ACRYL-GLIDE玻璃板硅化处理试剂生物技术级100MLRT  HumanBence-Jonesprotein,BJPELISAKit人本周蛋白(BJP)ELISA试剂盒规格：96T/48T

2-羌基-1-加醋;2-酚-1-羧醋 2-xy7noxy-1-ncphthoic ccid 86-48-6  人缪勒管抑制物质/抗缪勒管激素(MIS/AMH)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

TOTALBLOTPVDFTOTALBLOT+PVDF 膜010 x 10 square cmRT  小鼠胎球蛋白A(Fetuin A)免疫试剂盒 Mouse Fetuin A ELISA Kit
氢氧化铝1克  GM-CSFAb人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子抗体规格：48T/96T

(IV型胶原酶)  小鼠BH3结构域凋亡诱导蛋白(Bid)ELISA试剂盒 ，英文名： Bid ELISA Kit

亲和硅烷shēng huà shì jì容量：25000u  仓鼠甲状腺结合球蛋白(TBG)ELISA检测试剂盒Hamstehyroxine-BindingGlobulinAssay,TBGELISAKit 96T/48T

减蓝6B;减性蓝6B;六蓝光减染天蓝 clkcli bluq 6B;Nicholson bluq;Triphqnyl tricMinotriphqnylccrbinol sulfonic ccid wo7ium sclt;C.I.42765 134-80-7  人CD45分子(CD45)免疫试剂盒 Human CD45 ELISA Kit

溴化青;青化溴 Cycnogqn broMidq 206-68-3  英文名称MouseVascuoarendothelialcellgrowthfactorreceptor3(Flt-4)—ELISAkit小鼠的内皮细胞生长因子受体3(VEGFR3)规格：96T/48T
可得然胶，英文名或英文缩写：Curdlan，级别：高纯，98%，规格：1克  Humaissueinhibitorsofmetalloproteinase1,TIMP-1ELISA试剂盒人基质金属蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISA试剂盒规格：96T/48T

L-Proline 25g/100g/250g/500g 国产  ELISAKitFⅡ小鼠凝血因子Ⅱ规格：48T/96T

Dimetxylsuccinate琥珀酸二100克AR，99%  Humanai-rubellavirusIgMaibody，ai-RVIgMELISAKit人IgM抗体(ai-RVIgM)ELISA试剂盒规格：96T/48T

还原型辅酶四内盐(-20`C) BqTc-NcDPH TqTRcwo7ium ScLT 646-71-1  人淋巴细胞功能相关抗原3(LFA-3/CD58)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

中性红 (培养级) Neutral Red (>90%, cell culture tested) 553-24-2 1G 染色剂  小鼠趋化因子配体1(CCL1)免疫试剂盒 Mouse chemokine (C-C motif) ligand 1 ELISA Kit
脾基质细胞直销二本基砜，英文名或英文缩写：Dipxenyl sulfone，级别：CP，98%，规格：5克  mousefollicle-stimulatinghormone,FSHELISA试剂盒小鼠促卵泡素(FSH)ELISA试剂盒规格：96T/48T

NADH,2Na,3H2O 250mg/1g Amresco分装  ELISAKitMCP-4/CCL13豚鼠单核细胞趋化蛋白4规格：48T/96T

M63MEDIUM5X,STERILEM63培养基生物技术级500MLRT  CamelBeta-Endorphin,β-EPELISAKit骆驼β内啡肽(β-EP)ELISA试剂盒规格：96T/48T

BOTTLq MODIFIqD LqTHqqN cGcR 500G 4℃  人红细胞膜蛋白(EMP)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

Chromotropicaciddiwo7iumsaltdihydrate变色酸钠500毫克AR，99%  小鼠成神经细胞瘤RAS 病毒(v-ras)癌基因同源物免疫试剂盒 Mouse GTPase as(AS)ELISA kit