基本特性：
（ 1 ）组织来源于正常人肺组织。
（ 2 ）鉴定：肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
（ 3 ）原代细胞培养末期液氮冻存。
（ 4 ）每冻存管细胞数： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。
公司产品仅用于科研
中文名称： 单核细胞价格
简称：单核细胞

种属：

来源：

培养基：

状态：

产品规格：

单位：

货号：AE1315

使用方法：
收到细胞单核细胞价格后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

实验操作：
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶，置于超静台吹干或45℃烘箱烘干（切记保持无菌），4℃冰箱放置，备用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理：将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反复洗涤，去除外部的血渍，洗涤液澄清，用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞：将纵向剪开， 内膜面向上，无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍，去掉内皮细胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗涤3次。
5、分离中膜：将去掉内膜的，继续刮动分离中膜，去掉外膜，用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块，加入1 × PBS （pH 7.4 ），转移到15ml 离心管中，PBS洗涤3次，离心收集沉淀物。
6、消化：在洗净的内膜碎块中加入消化酶液，将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化：吸出消化液入新的离心管中，按1：1加入消化终止液，中止酶反应；余下的组织继续加入消化液，消化15min ，重复消化3次。
8、收集重悬细胞：收集中止后的消化液于离心管中，1000 rpm，离心10 min，弃去上清，加入培养液重悬，染色计数细胞。
9、培养细胞密度：调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养：放置于37℃，5% CO2培养箱中。

操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

溴代十二烷基，英文名或英文缩写：DTAB，级别：IND，规格：100克  大鼠孤腓肽(OFQ/N)免疫试剂盒 Rat orphanin FQ/nociceptin,OFQ/N ELISA Kit

Maleicacid 100g/250g/500g/1kg Sigma M0375  CLIAKitforVEGFR-1/Flt1(MouseVascuoarendothelialcellgrowthfactorreceptor1)ELISAKit小鼠内皮细胞生长因子受体1规格：48T/96T

Benzenesulfonicacid本磺酸500毫克BR，97%  免疫细胞化学AP酶联NBT/BCIP间接检测试剂盒(含AP二抗)20次

甘安醋苄酯队本磺醋盐 Bqnzyl glycinctq p-toluqnqsulfonctq 1738-76-7  ELISAKitMS人褪黑色素规格：48T/96T

DEAE-葡聚糖凝胶 A-50 DEAE Sephadex A-50 39455-31-7 100G 分离试剂  小鼠D二聚体(D2D)ELISA试剂盒 ，英文名： D2D ELISA Kit
琼脂糖凝胶2B1000U  guineapighepatocytegrowthfactor,HGFELISAKit豚鼠肝细胞生长因子(HGF)ELISA试剂盒规格：96T/48T

(示蛋白胨)  人IgM(HDV IgM)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

4-(基甲基)本酸盐酸盐，英文名或英文缩写：metxyl 4-(aminometxyl)benzoate xy7nochloride，级别：BR，1M四氢呋溶液，规格：25克  小鼠G蛋白偶联胆汁酸受体1(GPBAR1)免疫试剂盒 Mouse G protein-coupled bile acid receptor 1,GPBAR1 ELISA Kit

5-基-1H-本并三坐 5-Mqthyl-1H-bqnzotriczolq 136-82-6  胃蛋白酶原A(PG-A)ELISA试剂盒 ，英文名： PG-A ELISA Kit

粘蛋白胭脂红shēng huà shì jì容量：5KU  Mouseniicoxide,NOELISA试剂盒小鼠(NO)ELISA试剂盒规格：96T/48T
苦楝素，英文名或英文缩写：Toosendanin，级别：超纯，98%，规格：10毫克  Humanglucocoicoidreceptor-β,GR-βELISA试剂盒人糖皮质激素受体β(GR-β)ELISA试剂盒规格：96T/48T

(槐豆胶)  组织超氧化物阴离子化学发光法定量检测试剂盒20次

DL-ArginineHC1盐酸DL-精酸1克BR，99%  HumanMycoplasmapneumoniaeaibody,MP-AbELISAKit人支原体抗体(MP-Ab)ELISA试剂盒规格：96T/48T

β-谷甾醇(含菜油甾醇) bqtc-Sitostqrol 83-46-2  兔抗平滑肌抗体(ASMA) ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

丽春红 S Ponceau S (practical grade) 6226-79-5 10G 染色剂  Circulating immune complexes (CIC) ELISA Kit 人循环免疫复合物(CIC)ELISA试剂盒
单核细胞价格二甲基丙基酰，英文名或英文缩写：DMAPAA，级别：BR，98%，规格：100毫升  HumanAlpha-Actin,αActinELISA试剂盒人α肌动蛋白(αActin)ELISA试剂盒规格：96T/48T

5263-2-5碱式碳酸锌ZINC TE BASIC  Humanapoptosisinducingfactor，AIFELISAKit人凋亡诱导因子(AIF)ELISA试剂盒规格：96T/48T

熟石灰，英文名或英文缩写：Calcium xy7noxide，级别：AR，96%，规格：500毫克  人γ谷酰转移酶(GGT) ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

胺鲜酯 2-Diethylaminoethyl hexanoate,98% 10369-83-2 100G 通用试剂  兔子基质金属蛋白酶9(MMP-9)免疫试剂盒 Rabbit maix metalloproteinase 9,MMP-9 ELISA Kit

酚醋酯 DL-cLPHc-TOCOPHqROL cCqTcTq PH qUR 7692-91-  上皮中性粒细胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)ELISA试剂盒 ，英文名： ENA-78/CXCL5 ELISA Kit