使用方法：
收到细胞骨髓间充质干细胞现货供应后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

公司产品仅用于科研
中文名称： 骨髓间充质干细胞现货供应
简称：骨髓间充质干细胞

种属：

来源：

培养基：

状态：

产品规格：

单位：

货号：AE1310

基本特性：
（ 1 ）组织来源于正常人肺组织。
（ 2 ）鉴定：肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
（ 3 ）原代细胞培养末期液氮冻存。
（ 4 ）每冻存管细胞数： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。

操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

溴化铯，英文名或英文缩写：Cesium bromide，级别：BR，95%，规格：500克  Humanβ-Thromboglobulin,β-TGELISAKit 人β血小板球蛋白/β环蛋白(β-TG)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

74124-79-1N,N’-琥珀基碳酸酯 (DSC) (2-8℃)N,N'-Disuccinimidyl te  HumanDehydroepiandrosteroneS7,DHEA-S7ELISA试剂盒人脱氢表雄同S7(DHEA-S7)ELISA试剂盒规格：96T/48T

xy7noGENPEROXIDEACS级10MLCOLD  组织ITK激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次

L-缬安醇 (S)-(+)-2-cmino-3-mqthyl-1-butcnol 06-48-4  HumanPlasmafibronectin,pFNELISAKit人血浆纤维连接蛋白(pFN)ELISA试剂盒规格：96T/48T

L-缬安醋 L-Vclinq 7-18-4  兔子纤溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
球蛋白抗原人IgGshēng huà shì jì容量：25毫升  mouseBeta-Endorphin,β-EPELISA试剂盒小鼠β内啡肽(β-EP)ELISA试剂盒规格：96T/48T

(糜蛋白酶)  ELISAKitIL-2小鼠白介素2规格：48T/96T

粘蛋白1克RT  Fishi-iodothyronine,T3ELISAKit鱼类三甲状腺原氨酸(T3)ELISA试剂盒规格：96T/48T

烯利 cLLYLPHOSPHONIC DICHLORIDq 1498-47-1  人金属硫蛋白(MT)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

啊奇每速相关物质F czithroMycin Rqlctqd CoMpound F;3'-N-dqMqthyl-3'-N-forMylczithroMycin 61069-8-0  小鼠胱天蛋白酶3(Casp-3)免疫试剂盒 Mouse Caspase 3,Casp-3 ELISA Kit
快速血细胞染液20片/箱  抑制素A(INH-A)ELISA试剂盒 ，英文名： INH-A ELISA Kit

VitaminB5 10g/25g/100g/500g原装 Sigma P2250  Mouse50%complemehemolysis,CH50ELISA试剂盒小鼠血清总补体(CH50)ELISA试剂盒规格：96T/48T

蛋白酶测试盒-胰蛋白酶测试盒shēng huà shì jì容量：RT20 个/包  ELISAKitCCB小鼠钙通道阻滞剂规格：48T/96T

4`-录本炳同 4'-Chloropropiophqnonq 682-2-8  Human8-epi-prostaglandinF2alpha,8-epi-PGF2αELISAKit人8-异构素F2α(8-epi-PGF2α)ELISA试剂盒规格：96T/48T

酰胺&甲叉双酰胺干粉shēng huà shì jì容量：保存：-20℃1KU  人抗红细胞抗体(RBC)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
骨髓间充质干细胞现货供应二硫代赤藓糖醇，英文名或英文缩写：DTE，级别：试剂级，98%，规格：1KU  大鼠毒蕈碱型乙酰胆碱受体(M-AChR)免疫试剂盒 Rat muscarinic acetylcholine receptor,M-AChR ELISA Kit

硅酮　OV-210SILICONE OV-210  CLIAKitfoSST-1(Humaoxicshocksyndrometoxin)ELISAKit人毒性休克综合征毒素1规格：48T/96T

β-烟酰腺嘌呤二核苷酸，英文名或英文缩写：β-DPN，级别：BR,，250-600u/mg，规格：25克  胚胎干细胞(ES)冻存试剂盒50次

乙醇氧化酶 Alcohol Oxidase 9073-63-6 250U 通用试剂  ELISAKitsCD28人可溶性白细胞分化抗原28规格：48T/96T

拂西汀相关物质B Fluoxqtinq Rqlctqd CoMpound B;N-Mqthyl-3-phqnylpropylcMinq 3280-89-4  小鼠5羟色胺受体2A(5-H 2A)ELISA试剂盒 ，英文名： 5-H 2A ELISA Kit

实验操作：
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶，置于超静台吹干或45℃烘箱烘干（切记保持无菌），4℃冰箱放置，备用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理：将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反复洗涤，去除外部的血渍，洗涤液澄清，用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞：将纵向剪开， 内膜面向上，无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍，去掉内皮细胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗涤3次。
5、分离中膜：将去掉内膜的，继续刮动分离中膜，去掉外膜，用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块，加入1 × PBS （pH 7.4 ），转移到15ml 离心管中，PBS洗涤3次，离心收集沉淀物。
6、消化：在洗净的内膜碎块中加入消化酶液，将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化：吸出消化液入新的离心管中，按1：1加入消化终止液，中止酶反应；余下的组织继续加入消化液，消化15min ，重复消化3次。
8、收集重悬细胞：收集中止后的消化液于离心管中，1000 rpm，离心10 min，弃去上清，加入培养液重悬，染色计数细胞。
9、培养细胞密度：调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养：放置于37℃，5% CO2培养箱中。