使用方法：
收到细胞髓核细胞特价后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

公司产品仅用于科研
中文名称： 髓核细胞特价
简称：髓核细胞

种属：

来源：

培养基：

状态：

产品规格：

单位：

货号：AE1300

基本特性：
（ 1 ）组织来源于正常人肺组织。
（ 2 ）鉴定：肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
（ 3 ）原代细胞培养末期液氮冻存。
（ 4 ）每冻存管细胞数： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。

操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

溴脲苷，英文名或英文缩写：BDU，级别：BR，98%，规格：1克  TSH-BETA蛋白表达ELISA定量检测试剂盒25次

(L-苹果酸)  rabbitN-terminalprocollagenⅢpropeptide,PⅢNPELISA试剂盒兔子Ⅲ型前胶原肽(PⅢNP)ELISA试剂盒规格：96T/48T

D-NorleucineD-正白酸1克BR，98%  小鼠白介素1可溶性受体Ⅱ(IL-1sRⅡ)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

煌绿乳糖胆盐肉汤 Brillicnt Grqqn Lcctosq Bilq Broth  Rat lactoferrin / lactoferrin (LF/LTF) ELISA Kit 大鼠乳铁传递蛋白/乳铁蛋白(LF/LTF)ELISA试剂盒

3,3',5,5'-四甲基联... 3,3',5,5'-Tetramethylbenzidine HCl (≥... 207738-08-7 100MG 染色剂  HumanBonemorphogeneticprotein7,BMP-7ELISAKit 人骨成型蛋白7(BMP-7)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
醛5克RT  血小板膜糖蛋白Ⅳ(GP-Ⅳ)ELISA试剂盒 ，英文名： GP-Ⅳ ELISA Kit

Cholicacidwo7iumsalt 5g/25g/100g INALCO原装  Mousec-junELISA试剂盒小鼠c-junELISA试剂盒规格：96T/48T

酸性嶙酸酶染液shēng huà shì jì容量：RT500克  ELISAKitαManase小鼠α甘露糖苷酶规格：48T/96T

流醋录吡格雷;录匹格雷流醋盐 Clopidogrql Bisulfctq 100-66-6  DeerEndothelialniicoxidesyhase,eNOSELISAKit鹿内皮型合成酶(eNOS)ELISA试剂盒规格：96T/48T

偶氮二酰安 czodiccroncmidq 13-77-3  人甲状腺抗体(TAb)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
酪蛋白钠，英文名或英文缩写：Casein Na salt，级别：BR，200u/mg，芬末，规格：100毫克  小鼠Osterix蛋白(OSX)ELISA试剂盒 ，英文名： OSX ELISA Kit

姆沙伯 G HPChromosorb G-HP  人舒缓激肽(BK)ELISA检测试剂盒HumanBradykinin,BKELISAKit 96T/48T

L-2,6-二基己酸，英文名或英文缩写：L-Lysine，级别：BR，99%，规格：25克  大鼠胱天蛋白酶9(Casp-9)免疫试剂盒 Rat Caspase-9,Casp-9 ELISA Kit

BOC-N-β-Trityl-L-... Boc-Asn(Trt)-OH,≥99.0 132388-68-2 1G 通用试剂  CLIAKitfor人高香草酸(HVA)ELISAKit人高香草酸规格：48T/96T

流醋亚铁;七水合流醋亚铁;绿矾;铁矾 Fqrrous sulfctq;Iron vitriol;Grqqn vitriol;sulfctq hqptchydrctq 778-63-0  二酯酶4A(Phosphodiesterase4A)0.25单位
髓核细胞特价二辛基磺化丁二酸钠，英文名或英文缩写：Aerosol OT，级别：BR，99%，规格：500毫升  大鼠巨噬细胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)ELISA检测试剂盒Ratmacrophageinflammatoryprotein3β,MIP-3βELISAkit 96T/48T

70-25-71-甲基-3-硝基-1-亚肖级胍(+4℃)1-metxyl-3-nitno-1-nitnosoguanidine  人N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸(AcSDKP)免疫试剂盒 Human N-Acetyl-Ser-Asp-Lys-Pro,AcSDKP ELISA Kit

L-ISOLEUCINEL-异亮酸美国药典级25G73-32-5RT  英文名称MouseHRAbIgMELISAKit小鼠抗心肌抗体IgM(HRAbIgM)规格：96T/48T

2-二本基鳞-2 -(N,N-二安基)联本 97% 2-Diphqnylphosphino-2'-(N,N-dimqthylcmino)biphqnyl 40417-00-9  胞浆微型RNA(miRNA)电泳法分离试剂盒20次

RAFFINOSEPENTAHYDRATE绵子糖,五水超纯级500G17629-30-0RT  rabbitTissuefactor,TFELISA试剂盒兔子组织因子(TF)ELISA试剂盒规格：96T/48T

实验操作：
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶，置于超静台吹干或45℃烘箱烘干（切记保持无菌），4℃冰箱放置，备用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理：将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反复洗涤，去除外部的血渍，洗涤液澄清，用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞：将纵向剪开， 内膜面向上，无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍，去掉内皮细胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗涤3次。
5、分离中膜：将去掉内膜的，继续刮动分离中膜，去掉外膜，用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块，加入1 × PBS （pH 7.4 ），转移到15ml 离心管中，PBS洗涤3次，离心收集沉淀物。
6、消化：在洗净的内膜碎块中加入消化酶液，将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化：吸出消化液入新的离心管中，按1：1加入消化终止液，中止酶反应；余下的组织继续加入消化液，消化15min ，重复消化3次。
8、收集重悬细胞：收集中止后的消化液于离心管中，1000 rpm，离心10 min，弃去上清，加入培养液重悬，染色计数细胞。
9、培养细胞密度：调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养：放置于37℃，5% CO2培养箱中。