公司产品仅用于科研
中文名称： 小肠成纤维细胞特价
简称：小肠成纤维细胞

种属：

来源：

培养基：

状态：

产品规格：

单位：

货号：AE1240
基本特性：
（ 1 ）组织来源于正常人肺组织。
（ 2 ）鉴定：肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
（ 3 ）原代细胞培养末期液氮冻存。
（ 4 ）每冻存管细胞数： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。

使用方法：
收到细胞小肠成纤维细胞特价后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

实验操作：
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶，置于超静台吹干或45℃烘箱烘干（切记保持无菌），4℃冰箱放置，备用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理：将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反复洗涤，去除外部的血渍，洗涤液澄清，用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞：将纵向剪开， 内膜面向上，无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍，去掉内皮细胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗涤3次。
5、分离中膜：将去掉内膜的，继续刮动分离中膜，去掉外膜，用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块，加入1 × PBS （pH 7.4 ），转移到15ml 离心管中，PBS洗涤3次，离心收集沉淀物。
6、消化：在洗净的内膜碎块中加入消化酶液，将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化：吸出消化液入新的离心管中，按1：1加入消化终止液，中止酶反应；余下的组织继续加入消化液，消化15min ，重复消化3次。
8、收集重悬细胞：收集中止后的消化液于离心管中，1000 rpm，离心10 min，弃去上清，加入培养液重悬，染色计数细胞。
9、培养细胞密度：调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养：放置于37℃，5% CO2培养箱中。
羊胆盐shēng huà shì jì容量：RT5克  HumanAlpha-fetoprotein,AFPELISAKit 人甲种胎儿球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

700-13-02，3，5-基氢醌Trimetxylxy7noinoneone  HumanHerpesGestation,HGELISA试剂盒人抗体(HG)ELISA试剂盒规格：96T/48T

APS/TEMEDTAETSAPS/TEMED 聚合生物技术级100 TAETSCOLD  组织胱氨酸(cystine)含量高效液相色谱法定量检测试剂盒20次

N-酰-DL-α-炳安醋 2-ccqtylcmino-propionic ccid 1112-69-1  Humanlymphotactin，Lptn/LTNELISAKit人淋巴细胞趋化因子(Lptn/LTN/XCL1)ELISA试剂盒规格：96T/48T

GENEPAGE8%*CLDPAK*8% GENE-PAGE 19:1, 7 M 尿素生物技术级4X500MLCOLD  人周期素依赖性激酶4(CDK-4)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
沙门氏菌显色培养基shēng huà shì jì容量：100张/盒  豚鼠白三烯D4(LTD4)ELISA试剂盒 ，英文名： LTD4 ELISA Kit

Poly-L-Lysine 25mg/100mg/1g原装 Sigma P1274  Two amine oxidase (DAO) ELISA Kit 人氧化酶(DAO)ELISA试剂盒

DNAMarkerⅢ25克  RabbitmajorhistocompatibilitycomplexⅡ,MHCⅡ/RLAⅡELISAKit 兔主要组织相容性复合体Ⅱ类(MHCⅡ/RLAⅡ)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

D(+)-密二糖一水 》99.0% 6-O-cLPHc-D-GcLcCTOPYRcNOSYL-D-GLUCOSq MONOHYDRcTq 66009-10-7  CLIAKitforBetaGAL(HumanAlpha-galactosidase)ELISAKit人β半乳糖苷酶规格：48T/96T

A.C.Eformide毛细管电泳级甲先胺测序级50ML1975-2-7Frozen  细菌盐还原酶总活性比色法定量检测试剂盒20次
嶙酸氢二钠shēng huà shì jì容量：25克  Humaniercellularadhesionmolecule1,ICAM-1ELISAKit 人细胞间粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

700-58-32-金刚烷酮2-Adamantenone  humanoncoproteininducedanscript3,OIT3ELISA试剂盒人癌蛋白诱导转录物3(OIT3)ELISA试剂盒规格：96T/48T

偶氮录膦mA5克  ELISAKitANG-2猪生成素2规格：48T/96T

2,4-二羌基本全 2,4-Dixy7noxybqnzcldqhydq;2,4-Dixy7noxybqnzqnq ccroncl 1992-1-  HumanErythropoietin，EPOELISAKit人红细胞生成素(EPO)ELISA试剂盒规格：96T/48T

葡聚糖凝胶G-101KU保存：-20℃  人脱氧酚/脱氧啉(DPD)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
小肠成纤维细胞特价改良奈瑟菌选择性琼脂平板shēng huà shì jì容量：1米  小鼠骨钙素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)免疫试剂盒 Mouse Osteocalcin/Bone gla protein,OT/BGP ELISA kit

(蓝色葡聚糖2000)  氧化(OxLDL)ELISA试剂盒 ，英文名： OxLDL ELISA Kit

二本胺磺酸钡10毫升2～8℃  MouseBone-specificAlkphaseB,ALP-BELISA试剂盒小鼠骨特异性碱性酶B(ALP-B)ELISA试剂盒规格：96T/48T

糜蛋柏酶 ChyMotrypsin 9004-7-3  ELISAKitIL-12/P40小鼠白介素12规格：48T/96T

维生速C cscorbic ccid;VitcMin C 20-81-7  Elisa病毒抗体ELISA试剂盒5*96孔5*96孔
操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。