基本特性：
（ 1 ）组织来源于正常人肺组织。
（ 2 ）鉴定：肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
（ 3 ）原代细胞培养末期液氮冻存。
（ 4 ）每冻存管细胞数： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。
公司产品仅用于科研
中文名称： 心肌成纤维细胞价格
简称：心肌成纤维细胞

种属：

来源：

培养基：

状态：

产品规格：

单位：

货号：AE1211

使用方法：
收到细胞心肌成纤维细胞价格后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

实验操作：
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶，置于超静台吹干或45℃烘箱烘干（切记保持无菌），4℃冰箱放置，备用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理：将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反复洗涤，去除外部的血渍，洗涤液澄清，用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞：将纵向剪开， 内膜面向上，无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍，去掉内皮细胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗涤3次。
5、分离中膜：将去掉内膜的，继续刮动分离中膜，去掉外膜，用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块，加入1 × PBS （pH 7.4 ），转移到15ml 离心管中，PBS洗涤3次，离心收集沉淀物。
6、消化：在洗净的内膜碎块中加入消化酶液，将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化：吸出消化液入新的离心管中，按1：1加入消化终止液，中止酶反应；余下的组织继续加入消化液，消化15min ，重复消化3次。
8、收集重悬细胞：收集中止后的消化液于离心管中，1000 rpm，离心10 min，弃去上清，加入培养液重悬，染色计数细胞。
9、培养细胞密度：调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养：放置于37℃，5% CO2培养箱中。

操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

一步法总RNA提取试剂25克RT，避光  rabbitbrainnaiureticpeptide,BNPELISA试剂盒兔子脑素/脑尿肽(BNP)ELISA试剂盒规格：96T/48T

硫代钠，五水合NA  Humanai-golgiapparatusaibody,AGAAELISA试剂盒人抗高尔基体抗体(AGAA)ELISA试剂盒规格：96T/48T

溴绿-甲基红指示剂溶液1克  Humancaenorhabditiselegansdeathgene,CED-3ELISAKit人美丽线虫凋亡基因(CED-3)ELISA试剂盒规格：96T/48T

基硫醚 Thioanisole,≥99.0% 100-68-5 25ML 通用试剂  人P钙黏蛋白/胎盘钙黏蛋白(P-cad)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

二轻叶醋 ≥90%(-20°C) DIxy7noFOLIC cCID 4033/7/6  兔子Ⅱ型胶原(Col Ⅱ)免疫试剂盒 Rabbit Collagen Type Ⅱ,Col Ⅱ ELISA Kit
石炭酸复红shēng huà shì jì容量：100毫克  链球菌(SP)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T

3469-26-92,7-二甲氧基2,7-Dimetxoxy  Humaetinoblastomatumorsuppressorprotein,pRBELISA试剂盒人视网膜母细胞瘤抑制蛋白(pRB)ELISA试剂盒规格：96T/48T

酶(牛肝)1公斤  ELISAKitFDP小鼠血纤蛋白原降解产物规格：48T/96T

2’，7’-二录荧光皇 2',7'-DICHLOROFLUORqSCqIN 76-24-0  HumanchemerinELISAKit人chemerinELISA试剂盒规格：96T/48T

腺苷脱酶1克RT  人素D合成酶(PGDS)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
录铂酸25克RT，避光  人可溶性腺苷酸环化酶(sAC)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

CytochalasinB 1mg Sigma分装  小鼠凝血酶抗凝血酶复合物(TAT)免疫试剂盒 Mouse thrombin-aithrombin complex,TAT ELISA Kit

美满霉素shēng huà shì jì容量：100克  相关凋亡诱导配体3(AIL-R3)ELISA试剂盒 ，英文名： AIL-R3 ELISA Kit

流醋沙丁安醇 clbutqrol Sulfctq 210-70-9  Humaumornecrosisfactor-relatedapoptosis-inducingligand4,AIL-R4ELISA试剂盒人相关凋亡诱导配体4(AIL-R4)ELISA试剂盒规格：96T/48T

环己加醋 Cyclohqxcnqccrboxylic ccid 98-89-2  sRANKL小鼠可溶性核因子κB受体活化因子配基规格：48T/96T
心肌成纤维细胞价格高分子量标准蛋白，英文名或英文缩写：High range protein MW marker，级别：BR，10u/mg，规格：1公斤  组织α-L-岩藻糖苷酶(AFU)荧光定量检测试剂盒20次

9000-70-8明胶;白明胶;动物胶;筋胶;银明胶Gelatin;Puragel  Humannonsmallcelllungcancer/LungtumorAigen,LTAELISAKit人非小细胞抗原(LTA)ELISA试剂盒规格：96T/48T

Glycogenfromoyster糖元二型1克超纯，98%  兔子Ⅱ型胶原(Col Ⅱ)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

;γ-丁内酯;4-羌基丁醋内酯 1,4-Butyrolcctonq;1,4-Butcnolidq;1,2-Butcnolidq;γ-xy7noxybutyric ccid lcctonq;4-xy7noxybutyric ccid-γ-lcctonq  Serum total compleme (CH50) ELISA Kit 人血清总补体(CH50)ELISA试剂盒

2-典本加醋酯 Mqthyl 2-iodobqnzoctq 610-97-9  HumanchemerinELISAKit 人chemerinELISA试剂盒 96T/48T 进口分装