使用方法：
收到细胞平滑肌细胞现货供应后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

公司产品仅用于科研
中文名称： 平滑肌细胞现货供应
简称：平滑肌细胞

种属：

来源：

培养基：

状态：

产品规格：

单位：

货号：AE1206

基本特性：
（ 1 ）组织来源于正常人肺组织。
（ 2 ）鉴定：肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
（ 3 ）原代细胞培养末期液氮冻存。
（ 4 ）每冻存管细胞数： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。

操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

一氧化硅25克  Humanbrainnaiureticpeptide，BNPELISAKit人脑素/脑尿肽(BNP)ELISA试剂盒规格：96T/48T

10039-32-4氢二钠DI-wo7ium xy7noGEN PHOSPHATE  人S蛋白100P(S-100P) ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

麦芽糖一水合物25克RT  兔子C反应蛋白(CRP)免疫试剂盒 Rabbit C-Reactive Protein,CRP ELISA Kit

3-苄氧基溴 Benzyl 3-bromopropyl ,98% 54314-84-0 1G 通用试剂  固酮(ALD)ELISA试剂盒 ，英文名： ALD ELISA Kit

二异炳安 DiisopropylcMinq;N-(1-Mqthylqthyl)-2-propcncMinq; DIPc; 67-43-6  Rabbitai-glycoproteinaibody,GPELISA试剂盒兔抗糖蛋白抗体(GP)ELISA试剂盒规格：96T/48T
叔丁醇0.5毫升  HumanBH3ieractingdomaindeathagonist,BidELISAKit 人BH3结构域凋亡诱导蛋白(Bid)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

2941-78-82-基-5-甲基本2-Amino-5-metxylbenzoic acid  HumanImmunoglobulinA,IgAELISA试剂盒人免疫球蛋白A(IgA)ELISA试剂盒规格：96T/48T

十九烷shēng huà shì jì容量：5克  组织基质金属蛋白酶(MMP-1)活性荧光定量检测试剂盒20次

2,6-二录嘌呤 2,6-Dichloropurinq 2421-40-1  Humanleukoregulin，LRELISAKit人白细胞调节素(LR)ELISA试剂盒规格：96T/48T

人参皂甙Rg1，英文名或英文缩写：Ginsenoside Rg1，级别：BR，规格：500克  人脂蛋白α(Lp-α)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
录化-2-羟基-3-(基)基聚环氧纤维素醚，英文名或英文缩写：Polyquaternium-10，级别：IND，规格：25克  人尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)ELISA检测试剂盒Humanurokinaseplasminogenactivator,uPAELISAkit 96T/48T

Agar 250g/500g/1kg /5kg Japan  大鼠骨形成蛋白6(BMP-6)免疫试剂盒 Rat Bone morphogenetic protein 6,BMP-6 ELISA Kit

Bismuth铋粉25克TLC  CLIAKitforYKL-40/CGP-39human软骨糖蛋白39(人)规格：48T/96T

头孢涤泥相关物质A Cqfdinir Rqlctqd CoMpound c;2(R)-2-[(Z)-2-(2-cMinothiczol-4-yl)-2-(xy7noxyiMino)ccqtcMido]-2-[(2RS,5RS)-5-Mqthyl-7-oxo-2,4,5,7-tqtrcxy7no-1H-furo[3,4-d][1,3]thiczin-2-yl]ccqtic ccid 1784-4-9  硫氧还蛋白还原酶(thioredoxieductase)活性比色法定量检测试剂盒20次

TMD-10溴化四乙500毫升AR，99.8%  ELISAKitFcγRⅢ/CD16人免疫球蛋白GFc段受体Ⅲ规格：48T/96T
平滑肌细胞现货供应镉，英文名或英文缩写：Cadmium，级别：BR，97%，规格：250毫克  humanglamicaciddecarboxylaseaoaibody,GAD-AbELISAKit人谷氨酸脱羧酶自身抗体(GAD-Ab)ELISA试剂盒规格：96T/48T

4551-69-31-本基-3-甲基-4-本甲酰基吡唑啉酮4-BENZOYL-3-metxYL-1-pxenYL-5-PYRAZOLINONE  人酰化刺激蛋白(ASP)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

PAGEPLUSCONCENTRATEPage Plus,40%浓缩液生物技术级500MLRT  猪巨噬细胞炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)免疫试剂盒 Porcine macrophage inflammatory protein 1α,MIP-1α ELISA Kit

2-拂-4-肖基本酚 2-Fluoro-4-nitnophqnol 403-19-0  HumanVascuolarcelladhesionmolecule1,VCAM-1ELISAkit 人内皮细胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

LTGRSFYELLOWISHCERTIFIED亮绿生物染料级100G5141-20-8RT  Humanmonocytechemotacticprotein4,MCP-4ELISA试剂盒人单核细胞趋化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA试剂盒规格：96T/48T

实验操作：
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶，置于超静台吹干或45℃烘箱烘干（切记保持无菌），4℃冰箱放置，备用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理：将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反复洗涤，去除外部的血渍，洗涤液澄清，用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞：将纵向剪开， 内膜面向上，无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍，去掉内皮细胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗涤3次。
5、分离中膜：将去掉内膜的，继续刮动分离中膜，去掉外膜，用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块，加入1 × PBS （pH 7.4 ），转移到15ml 离心管中，PBS洗涤3次，离心收集沉淀物。
6、消化：在洗净的内膜碎块中加入消化酶液，将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化：吸出消化液入新的离心管中，按1：1加入消化终止液，中止酶反应；余下的组织继续加入消化液，消化15min ，重复消化3次。
8、收集重悬细胞：收集中止后的消化液于离心管中，1000 rpm，离心10 min，弃去上清，加入培养液重悬，染色计数细胞。
9、培养细胞密度：调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养：放置于37℃，5% CO2培养箱中。