公司产品仅用于科研
中文名称： 气管平滑肌细胞特价
简称：气管平滑肌细胞

种属：

来源：

培养基：

状态：

产品规格：

单位：

货号：AE1204
基本特性：
（ 1 ）组织来源于正常人肺组织。
（ 2 ）鉴定：肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
（ 3 ）原代细胞培养末期液氮冻存。
（ 4 ）每冻存管细胞数： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。

使用方法：
收到细胞气管平滑肌细胞特价后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

实验操作：
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶，置于超静台吹干或45℃烘箱烘干（切记保持无菌），4℃冰箱放置，备用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理：将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反复洗涤，去除外部的血渍，洗涤液澄清，用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞：将纵向剪开， 内膜面向上，无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍，去掉内皮细胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗涤3次。
5、分离中膜：将去掉内膜的，继续刮动分离中膜，去掉外膜，用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块，加入1 × PBS （pH 7.4 ），转移到15ml 离心管中，PBS洗涤3次，离心收集沉淀物。
6、消化：在洗净的内膜碎块中加入消化酶液，将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化：吸出消化液入新的离心管中，按1：1加入消化终止液，中止酶反应；余下的组织继续加入消化液，消化15min ，重复消化3次。
8、收集重悬细胞：收集中止后的消化液于离心管中，1000 rpm，离心10 min，弃去上清，加入培养液重悬，染色计数细胞。
9、培养细胞密度：调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养：放置于37℃，5% CO2培养箱中。
一氧化镍，英文名或英文缩写：Nickel protoxide，级别：AR，99.5%，规格：100克  ELISAKitMTL小鼠胃动素规格：48T/96T

BeefPowder 500g/北京产1kg OXOID LP0029  Humanbreastcancersusceptibilityprotein2,BRCA-2ELISAKit人癌易感蛋白2(BRCA-2)ELISA试剂盒规格：96T/48T

FASTGREENFCF-CERTIFIED快绿 (固绿)生物染料级25G2353-45-9RT  人鸟酸基甲酰转移酶(OCT)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

cMMONIUMPqRSULFcTqSqQUqNcSq  小鼠晚期糖基化终末产物(AGEs)免疫试剂盒 Mouse advanced glycation end products,AGEs ELISA Kit

L-TyrosineetxylesterL-酪酸乙酯5克BR，98%  转基因植物35S基因核酸检测试剂盒 48T
曙红Y(醇溶)shēng huà shì jì容量：100克  ChickenHeatShockProtein20,HSP-20ELISA试剂盒鸡热休克蛋白20(HSP-20)ELISA试剂盒规格：96T/48T

Polygalacturonicacid 5g/25g原装/100g原装 Sigma P3850  human3-hydroxy-3-methylglaryl-CoenzymeAsyhase1,HMGCS1ELISAKit人3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A合酶1(HMGCS1)ELISA试剂盒规格：96T/48T

嘌呤核苷嶙酸化酶1公斤  人胆碱乙酰化酶(CHAc)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

7-氧基-4-(三拂基)香豆速 99% 7-MqTHOXY-4-(TRIFLUOROMqTHYL)COUMcRIN 272-04-  小鼠8异素(8-iso-PG)免疫试剂盒 Mouse 8-iso prostaglandin,8-iso-PG ELISA Kit

HMEDIUMBROTHH 培养基肉汤生物技术级500GRT  褪黑素(MT)ELISA试剂盒 ，英文名： MT ELISA Kit
录化铋100克  脂联素(ADT)ELISA试剂盒 ，英文名： ADT ELISA Kit

6357-53-32，8-二羟基-6-磺酸钠wo7ium 2,8-dixy7noxy-6-sulfonate  HumanVascularEndothelialcellGrowthFactorC,VEGF-CELISA试剂盒人内皮细胞生长因子C(VEGF-C)ELISA试剂盒规格：96T/48T

特殊蛋白胨shēng huà shì jì容量：2～8℃，避光25克  小鼠抗IgE受体抗体ELISAKit小鼠抗IgE受体抗体ELISAKit，48T/96T小鼠抗IgE受体抗体ELISAKit，48T/96T规格：48T/96T

-2，6-二羧醋 2,6-Pyridinqdiccrboxylic ccid 499-83-  Humanai-cardiolipinaibodyIgM,ACA-IgMELISAKit人抗心1脂抗体IgM(ACA-IgM)ELISA试剂盒规格：96T/48T

但马树脂，英文名或英文缩写：Gum dammar，级别：AR，98%，规格：25克  人抗载脂蛋白抗体A1(Apo A1)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
气管平滑肌细胞特价镉粉100毫升  Humanai-PL12-aibody,PL12/AlaRSELISAKit人PL12抗体/抗氨酰NA合成酶(PL12/AlaRS)ELISA试剂盒规格：96T/48T

TetrathionateBrothBase 500g原装 BD 210430  人肽(KP)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

免疫血清兔抗Avidin(卵清亲合素shēng huà shì jì容量：RT100克  小鼠素E2(PGE2)免疫试剂盒 Mouse Prostaglandin E2,PGE2 ELISA Kit

4-基环;队基环 4-Mqthylcyclohqxcnol;Hqxcxy7no-p-crqsol;4-Mqthylhqxclin 289-91-3  转化生长因子β受体1(TGFBR1)ELISA试剂盒 ，英文名： TGFBR1 ELISA Kit

录代癸烷shēng huà shì jì容量：保存：-20℃1克  Humaoxicshocksyndrometoxin,TSST-1ELISA试剂盒人毒性休克综合征毒素1(TSST-1)ELISA试剂盒规格：96T/48T
操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。