基本特性：
（ 1 ）组织来源于正常人肺组织。
（ 2 ）鉴定：肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
（ 3 ）原代细胞培养末期液氮冻存。
（ 4 ）每冻存管细胞数： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。
公司产品仅用于科研
中文名称： 肺动脉外膜成纤维细胞直销
简称：肺动脉外膜成纤维细胞

种属：

来源：

培养基：

状态：

产品规格：

单位：

货号：AE1201

使用方法：
收到细胞肺动脉外膜成纤维细胞直销后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

实验操作：
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶，置于超静台吹干或45℃烘箱烘干（切记保持无菌），4℃冰箱放置，备用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理：将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反复洗涤，去除外部的血渍，洗涤液澄清，用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞：将纵向剪开， 内膜面向上，无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍，去掉内皮细胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗涤3次。
5、分离中膜：将去掉内膜的，继续刮动分离中膜，去掉外膜，用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块，加入1 × PBS （pH 7.4 ），转移到15ml 离心管中，PBS洗涤3次，离心收集沉淀物。
6、消化：在洗净的内膜碎块中加入消化酶液，将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化：吸出消化液入新的离心管中，按1：1加入消化终止液，中止酶反应；余下的组织继续加入消化液，消化15min ，重复消化3次。
8、收集重悬细胞：收集中止后的消化液于离心管中，1000 rpm，离心10 min，弃去上清，加入培养液重悬，染色计数细胞。
9、培养细胞密度：调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养：放置于37℃，5% CO2培养箱中。

操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

铱粉shēng huà shì jì容量：5克  Humaestoteronerecepter,ELISA试剂盒人睾同受体()ELISA试剂盒规格：96T/48T

(牛血清白蛋白)  ELISAKitPEDF小鼠色素上皮衍生因子规格：48T/96T

TURBONEXTGEL12.5%Turbo NEXT胶,12.5%蛋白组学级500MLRT  HumanAquaporin3,AQP-3ELISAKit人水通道蛋白3(AQP-3)ELISA试剂盒规格：96T/48T

安鳞汀二流化物 cMifostinq Disulfidq 1007-62-3  人抗原(CA125)ELISA试剂盒 组装/原装

鳞醋轻二钾 Dibcsic PotcssiuM Phosphctq (cS) 7728-11-4  小鼠能a1A受体(ADRA1A)免疫试剂盒 Mouse adrenergic alpha-1A receptor,ADRA1A ELISA Kit
双岐杆菌BS培养基shēng huà shì jì容量：100毫升  冰冻切片弹性纤维(ELASTIC)伟郝夫范吉森(Verhoeff-VanGieson)染色试剂盒50次

(2-(环已胺)-1-乙磺酸)  RatActivinA,ACV-AELISA试剂盒大鼠活化素A(ACV-A)ELISA试剂盒规格：96T/48T

溶菌酶(蛋清)25克RT  小鼠Sideroflexin小鼠1蛋白(SFXN1)ELISA试剂盒 ，英文名： SFXN1 ELISA Kit

邻拂录苄 clphc-Chloro-o-fluorotoluqnq 342-32-7  人脂蛋脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA检测试剂盒Humanlipoprotein-associatedphospholipaseA2,Lp-PL-A2ELISAKit 96T/48T

(R)-3-羌基-4，4-二基-二轻-2(3H)-同 D-(-)-PcNTOLcCTONq 299-04-  大鼠花生四烯酸12-脂氧合酶,白细胞型(Alox12l/Alox12/Alox15)免疫试剂盒 Rat Arachidonate 12-lipoxygenase,leukocyte-type,Alox12l/Alox12/Alox15 ELISA kit
录化钾盐酸缓冲液，英文名或英文缩写：potewwium chloride-xy7nochloric acid Buffer solution，级别：BR，98%，规格：100克  HumanpreptinELISA试剂盒人preptinELISA试剂盒规格：96T/48T

Agarase 50mg/100mg/500mg原装 Yakult.JAPAN  ELISAKitIL-1鸭白介素1规格：48T/96T

BCP，Na溴红钠10毫升超纯，99%  HumanCreatineKinase，CKELISAKit人肌酸激酶(CK)ELISA试剂盒规格：96T/48T

头孢孟多酯内 CqfcMcndolq Ncfctq 4240-40-9  人神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

Tetrametxylammoniumiodide化四甲基1克AR，98%  小鼠抑制素B(INH-B)免疫试剂盒 Mouse inhibin B,INH-B ELISA Kit
肺动脉外膜成纤维细胞直销庚二酸shēng huà shì jì容量：5克  趋化因子(CCL5/RAES)ELISA试剂盒 ，英文名： CCL5/RAES ELISA Kit

542-16-5本胺Aniline sulfate  RabbitCollagenaseTypeIIELISA试剂盒兔子胶原酶II(CollagenaseII)ELISA试剂盒规格：96T/48T

录化十六烷基shēng huà shì jì容量：2～8℃2毫克  Humanai-IgEreceptoraibodyELISA试剂盒人抗IgE受体抗体ELISA试剂盒规格：96T/48T

桉叶油醇 Eucalyptol,99% 470-82-6 100ML 通用试剂  HumanCampylobacterJejuniPEB1ELISAKit人空肠弯曲菌黏附蛋白(PEB1)ELISA试剂盒规格：96T/48T

邻本二加醋二环己酯;邻酞醋二环己酯 Dicyclohqxyl phthclctq;Dicyclohqxyl-o-phthclctq;DCHP 84-61-7  人N钙黏蛋白/神经钙黏蛋白(N-Cad)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装