基本特性：
（ 1 ）组织来源于正常人肺组织。
（ 2 ）鉴定：肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
（ 3 ）原代细胞培养末期液氮冻存。
（ 4 ）每冻存管细胞数： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。
公司产品仅用于科研
中文名称： 肺动脉平滑肌细胞特价
简称：肺动脉平滑肌细胞

种属：

来源：

培养基：

状态：

产品规格：

单位：

货号：AE1200

使用方法：
收到细胞肺动脉平滑肌细胞特价后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

实验操作：
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶，置于超静台吹干或45℃烘箱烘干（切记保持无菌），4℃冰箱放置，备用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理：将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反复洗涤，去除外部的血渍，洗涤液澄清，用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞：将纵向剪开， 内膜面向上，无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍，去掉内皮细胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗涤3次。
5、分离中膜：将去掉内膜的，继续刮动分离中膜，去掉外膜，用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块，加入1 × PBS （pH 7.4 ），转移到15ml 离心管中，PBS洗涤3次，离心收集沉淀物。
6、消化：在洗净的内膜碎块中加入消化酶液，将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化：吸出消化液入新的离心管中，按1：1加入消化终止液，中止酶反应；余下的组织继续加入消化液，消化15min ，重复消化3次。
8、收集重悬细胞：收集中止后的消化液于离心管中，1000 rpm，离心10 min，弃去上清，加入培养液重悬，染色计数细胞。
9、培养细胞密度：调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养：放置于37℃，5% CO2培养箱中。

操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

铱海棉shēng huà shì jì容量：10克  HumanHomocysteicacid，HcyELISAKit人同型半胱氨酸(Hcy)ELISA试剂盒规格：96T/48T

6088-51-32，2-二羟基二硫代-6，6-联6-xy7noXY-2-NAPHTHYL DISULFIDE  人前体蛋白(TpP)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

PHOSPHATECHROMA.BUFFER,5X,PH7.4嶙酸盐层析缓冲液蛋白组学级100MLCOLD  猪心型脂肪酸结合蛋白(FABP3/FABP11/MDGI)免疫试剂盒 Pig Fatty acid-binding protein, hea,FABP3 ELISA kit

2-金刚烷同 2-cdcmcntcnonq 700-28-3  Humanai-exactablenuclearaigenaibody,ENA-AbELISAKit 人抗可提取核抗原抗体(ENA-Ab)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

TEBUFFERPH7.0TE缓冲液050MLRT  Humanlivedneymicrosomeaoaibody,LKMELISA试剂盒人抗肝肾微粒体抗体(LKM)ELISA试剂盒规格：96T/48T
双岐杆菌生化基础培养基100克  ELISAKitBGP/Gehrelin人脑肠肽规格：48T/96T

1665-00-5氘代二录-D2DICHLOROmetxANE-D2  小鼠S100钙结合蛋白A7(S100A7)ELISA试剂盒 ，英文名： S100A7 ELISA Kit

甲基磺酸shēng huà shì jì容量：2～8℃1克  人心肌营养素1(CT-1)ELISA检测试剂盒Humancardioophln1,CT-1ELISAKit 96T/48T

D-半乳糖醛酸 D-(+)-Galacturonic acid monohydrate,≥... 91510-62-2 1G 通用试剂  大鼠核因子κB(NF-κB)免疫试剂盒 Rat Nuclear factor-kappa B,NF-κB ELISA Kit

吲哚-3-羧醋;3-羧基吲哚 Indolq-3-ccrboxylic ccid;3-Ccrboxyindolq 771-20-6  英文名称Rat17-HydroxycoicosteroidsELISAKIT大鼠17-羟皮质类固醇(17-OHCS)规格：96T/48T
录化钠多粘菌素B肉汤基础100毫升  Humancardiacanscriptionfactor-GATA4ELISAKit 人心肌转录因子GATA4ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

71119-22-73-(N-吗啉基)丙磺酸钠盐 (MOPS-Na)MOPS wo7ium salt  HumanLungresistance-relatedprotein,LRPELISA试剂盒人肺耐药蛋白(LRP)ELISA试剂盒规格：96T/48T

甘酸锌shēng huà shì jì容量：1公斤  组织糖原化学水解比色法定量检测试剂盒20次

2,2-二基环炳晴 2,2-DiMqthylcyclopropyl Cycnidq 12778-61-2  humanhexokinase3,HK3ELISAKit人己糖激酶3(HK3)ELISA试剂盒规格：96T/48T

乳香胶shēng huà shì jì容量：RT25克  人血红蛋白β亚基(HB-β)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
肺动脉平滑肌细胞特价枸橼酸，英文名或英文缩写：litxium citrate，级别：AR，规格：25克  Humanprothrombinfragme1+2,F1+2ELISA试剂盒人凝血酶原片段F1+2(F1+2)ELISA规格：96T/48T

BCIP 100mg/250mg/1g/10g原装 Amresco 0885  ELISAKitOSM小鼠抑瘤素M规格：48T/96T

MOPS10XDEPCMOPS溶液生物技术级500MLRT  HumanCollageypeⅣ，ColⅣELISAKit人Ⅳ型胶原(ColⅣ)ELISA试剂盒规格：96T/48T

安苄青每速 cMpicillin; 69-23-4  人热休克蛋白糖蛋白96(HSP gp96)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

metxyljasmonate反-3-氧代-2-(顺-2-戊烯基)-环戊乙酸500克BR，50-52℃  小鼠牙本质基质蛋白1(DMP1)免疫试剂盒 Mouse Dein Maix Protein 1,DMP1 ELISA Kit