基本特性：
（ 1 ）组织来源于正常人肺组织。
（ 2 ）鉴定：肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
（ 3 ）原代细胞培养末期液氮冻存。
（ 4 ）每冻存管细胞数： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。
公司产品仅用于科研
中文名称： 小鼠原B细胞株直销
简称：BAF3

种属：

来源：

培养基：1640+10FBS+10ng/ml IL-3（鼠源）+1%P/S 

状态：悬浮生长

产品规格：

单位：

货号：AE0585

使用方法：
收到细胞小鼠原B细胞株直销后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

实验操作：
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶，置于超静台吹干或45℃烘箱烘干（切记保持无菌），4℃冰箱放置，备用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理：将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反复洗涤，去除外部的血渍，洗涤液澄清，用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞：将纵向剪开， 内膜面向上，无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍，去掉内皮细胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗涤3次。
5、分离中膜：将去掉内膜的，继续刮动分离中膜，去掉外膜，用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块，加入1 × PBS （pH 7.4 ），转移到15ml 离心管中，PBS洗涤3次，离心收集沉淀物。
6、消化：在洗净的内膜碎块中加入消化酶液，将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化：吸出消化液入新的离心管中，按1：1加入消化终止液，中止酶反应；余下的组织继续加入消化液，消化15min ，重复消化3次。
8、收集重悬细胞：收集中止后的消化液于离心管中，1000 rpm，离心10 min，弃去上清，加入培养液重悬，染色计数细胞。
9、培养细胞密度：调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养：放置于37℃，5% CO2培养箱中。

操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

乙二安四乙酸shēng huà shì jì容量：2～8℃250毫克  组织半胱氨酸蛋白酶-8(CASPASE-8)活性荧光定量检测试剂盒20次

(蛋白胨)  HumanNandrolonePhenylpropionate,NPELISAKit人苯诺龙/苯去甲睾同(NP)ELISA试剂盒规格：96T/48T

L-TYROSINEANIMAL-FREEL-酪酸,非动物源500 gm60-18-4RT  兔神经生长因子(NGF)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

牛胆盐 Bilq sclt,froM ox;  Human platelet associated compleme 3 (PAC3) ELISA Kit 人血小板相关补体3(PAC3)ELISA试剂盒

,CRYSTALLINE(环已亚胺)超纯级1GCOLD  HumanBrucellaAibodyIgG,BrucellaAbIgGELISAKit 人布鲁氏菌抗体IgG(BrucellaAbIgG)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
顺丁希二酰shēng huà shì jì容量：50毫升  人基质金属蛋白酶抑制因子3(TIMP-3)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

CHAPSO 1g原装/5g原装 INALCO1758-9322  小鼠叠氮胸苷(AZT)免疫试剂盒 Mouse Azidothymidine,AZT ELISA Kit

高峰α-淀粉酶25克  酯转移蛋白(CETP)ELISA试剂盒 ，英文名： CETP ELISA Kit

ALPHA-淀分酶 clphc-cmylcsq 9000-90-  MouseCXC-chemokineligand16,CXCL16ELISA试剂盒小鼠CXC趋化因子配体16(CXCL16)ELISA试剂盒规格：96T/48T

(+)-樟脑醋 D-(+)-Ccmphoric ccid 14-83-4  ELISAKitAP12小鼠apelin12规格：48T/96T
录亚铂酸钾shēng huà shì jì容量：1克  组织短链脂酰辅酶A脱氢酶(ACYLCOADEHYDROGENASE)活性比色法定量检测试剂盒20次

67-52-7酸Barbituric acid  HumanMethemoglobin,MHBELISAKit人高铁血红蛋白(MHB)ELISA试剂盒规格：96T/48T

儿价分橙10克  苏云金芽孢杆菌蛋白(BT)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

吡虫灵 Imidacloprid 138261-41-3 1ML 通用试剂  Human insulin like growth factor binding protein 4 (IGFBP-4) ELISA Kit 人样生长因子结合蛋白4(IGFBP-4)ELISA试剂盒

L-炳安醋苄酯队本磺醋盐 L-clcninq bqnzyl qstqr 4-toluqnqsulfonctq 4824/6/6  humanHepatitisDvirusIgG,HDVIgGELISAKit 人IgG(HDVIgG)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
小鼠原B细胞株直销胍，英文名或英文缩写：7iyendiamide，级别：生物技术级，规格：5克  聚糖邻氨基(2-AP)荧光标记试剂盒20次

1,2-二月桂-rac-甘油基-3-戊二酸-6-甲基试卤灵酯NA  ELISAKitHSP-40人热休克蛋白40规格：48T/96T

Antipyrine安替吡啉500克BR，98%  小鼠白介素19(IL19)ELISA试剂盒 ，英文名： IL19 ELISA Kit

2-肖基本-β-D-半乳糖苷(+4°C) 2-nitnophqnyl-bqtc-D-gclcctopyrcnosidq 369-07-3  人抗甲状腺微粒体抗体(ATMA/TMAB)ELISA检测试剂盒humanAi-ThyroidMicrosomeAibody,ATMA/TMABELISAKIT 96T/48T

Alizarincomplexon茜素羧络合剂5克BR，97.5%  大鼠精胺脲水解酶(AGMAT)免疫试剂盒 Rat Agmatine Ureohydrolase/Agmatinase,AGMAT ELISA Kit