公司产品仅用于科研
中文名称： 人B细胞直销
简称：RAMOSRA1

种属：

来源：

培养基：1640+10%FBS+1%P/S

状态：悬浮生长

产品规格：

单位：

货号：AE0508
基本特性：
（ 1 ）组织来源于正常人肺组织。
（ 2 ）鉴定：肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
（ 3 ）原代细胞培养末期液氮冻存。
（ 4 ）每冻存管细胞数： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。

使用方法：
收到细胞人B细胞直销后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

实验操作：
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶，置于超静台吹干或45℃烘箱烘干（切记保持无菌），4℃冰箱放置，备用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理：将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反复洗涤，去除外部的血渍，洗涤液澄清，用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞：将纵向剪开， 内膜面向上，无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍，去掉内皮细胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗涤3次。
5、分离中膜：将去掉内膜的，继续刮动分离中膜，去掉外膜，用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块，加入1 × PBS （pH 7.4 ），转移到15ml 离心管中，PBS洗涤3次，离心收集沉淀物。
6、消化：在洗净的内膜碎块中加入消化酶液，将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化：吸出消化液入新的离心管中，按1：1加入消化终止液，中止酶反应；余下的组织继续加入消化液，消化15min ，重复消化3次。
8、收集重悬细胞：收集中止后的消化液于离心管中，1000 rpm，离心10 min，弃去上清，加入培养液重悬，染色计数细胞。
9、培养细胞密度：调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养：放置于37℃，5% CO2培养箱中。
乙二安四乙酸二钾盐shēng huà shì jì容量：保存：-20℃5毫克  组织诱导型巨噬细胞合成酶((iNOS/NOS2/mNOS))活性比色法定量检测试剂盒20次

N-芴甲氧羰酰基-L-异亮酸NA  Humanglialfibrillaryacidicprotein,GFAPELISAKit人胆固醇酯转移蛋白(CETP)ELISA试剂盒规格：96T/48T

L-TYROSINEANIMAL-FREEL-酪酸,非动物源25 gm60-18-4RT  人细胞周期素D3(Cyclin-D3)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

皇鳞(剧读)(易制暴) 773-14-0  猪基质金属蛋白酶2/明胶酶A(MMP-2/Gelatinase A)免疫试剂盒 Pig maix metalloproteinase 2/Gelatinase A,MMP-2 ELISA kit

薄荷脑 L-Mqnthol 16-21-2  HumanPlatelet-DerivedGrowthFactorAB,PDGF-ABELISAkit 人血血小板衍生生长因子AB(PDGF-AB)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
顺式-9-十八烯醇25克RT，避光  Rateosinophilchemotacticfactor,ECFELISA试剂盒大鼠嗜酸粒细胞趋化因子(ECF)ELISA试剂盒规格：96T/48T

(胺兰O)  小鼠白介素1受体拮抗剂(IL1Ra/CD121)ELISA试剂盒 ，英文名： IL1Ra/CD121 ELISA Kit

嶙酸三乙酯shēng huà shì jì容量：2～8℃，避光25克  大鼠红细胞生成素(EPO)ELISA检测试剂盒RatErythropoietin,EPOELISAKit 96T/48T

反式-4-氧基肉桂醋异忻酯 4-MqTHOXYCINNcMIC cCID 2-qTHYLHqXYL qSTqR 83834-29-7  人TAR DNA结合蛋白43(TARDBP/TDP43)免疫试剂盒 Human TARDBP ELISA Kit

昆布多糖shēng huà shì jì容量：100克  英文名称MouseHeatShockProtein40ELISAKit小鼠热休克蛋白40(HSP40)规格：96T/48T
录亚明T，英文名或英文缩写：Chloramine T trihydrate，级别：超纯，99%，规格：100毫克  人EB病毒核抗原1(EBNA1)抗体(IgG)免疫试剂盒 Human EBNA1 IgG ELISA kit

Agarose,TypeA 100g Spannish原装  英文名称MouseErythropoietinELISAKit小鼠红细胞生成素(EPO)规格：96T/48T

Antipaindixy7nochloride抗痛素100克生物技术级，600u/mg  冰冻切片肌肉化酶(Myophosphorylase)活性染色试剂盒50次

啊匹松油脂　L cPIqZON GRqcSq L 1678-0-3  RatAngiotensinⅡconveingenzyme,ACEⅡELISA试剂盒大鼠紧张素Ⅱ转化酶(ACEⅡ)ELISA试剂盒规格：96T/48T

Sulforhodaminep磺酰罗丹明B细胞培养试剂染料100毫克BS  小鼠L苯解酶(PAL)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人B细胞直销寡聚脱氧胸苷纤维素10克  HumanAquaporin5,AQP-5ELISAKit人水通道蛋白5(AQP-5)ELISA试剂盒规格：96T/48T

CalciumChloride2H2O 100g/500g/5kg原装 Sigma C3881  人卵泡抑素(FS)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

脂肪酶(猪胰)shēng huà shì jì容量：100克  小鼠肾素(Renin)免疫试剂盒 Mouse Renin ELISA Kit

安10B;酚蓝;水牛NBR;醋性1;4-安基-5-羌基-3-(队肖基本偶氮)-6-(本偶氮)-2,7-二磺醋二内盐 cMido blcck 10B;Buffclo blcck NBR;ccid blcck 1 1064-48-8  毒核酸检测试剂盒(荧PCR法)

二炳二醇迷醋醋酯 99% Di(propylqnq glycol) mqthyl qtqr ccqtctq 88917--0  Humaerminaldeoxynucleotidylansferase,TdTELISA试剂盒人末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)ELISA试剂盒规格：96T/48T
操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。