使用方法：
收到细胞小鼠调节T细胞特价后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

公司产品仅用于科研
中文名称： 小鼠调节T细胞特价
简称：TH1

种属：小鼠

来源：调节T细胞

培养基：1640

状态：悬浮

产品规格：

单位：

货号：AE0723

基本特性：
（ 1 ）组织来源于正常人肺组织。
（ 2 ）鉴定：肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
（ 3 ）原代细胞培养末期液氮冻存。
（ 4 ）每冻存管细胞数： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。

操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

乙二安盐酸盐shēng huà shì jì容量：25克  人单纯病毒抗原2(HSV-Ag2)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

157728-61-52,2-二甲基环2,2-Dimetxylcyclopnopyl yeni7e  小鼠5核苷酸酶(5-)免疫试剂盒 Mouse 5-Nucleotidase,5- ELISA Kit

MOPSwo7iumSALTMOPS, Na蛋白组学级100G71119-22-7RT  透明质酸(HA)ELISA试剂盒 ，英文名： HA ELISA Kit

2-录-3-拂 2-Chloro-3-fluoropyridinq 178-04-1  Mousepyruvatedehydrogenase-E1,PDHE1ELISA试剂盒小鼠同酸脱氢酶E1(PDHE1)ELISA试剂盒规格：96T/48T

Streptozotocin链脲菌佐素超纯级250MG  ChickenImmunoglobulinG,IgGELISA试剂盒鸡免疫球蛋白G(IgG)ELISA试剂盒规格：96T/48T
司班85，英文名或英文缩写：Span 85，级别：AR，87%，规格：100克  小鼠E1A激活基因阻遏子1(CREG1)ELISA试剂盒 ，英文名： CREG1 ELISA Kit

MaltExtract 100g/500g BD/Sigma分装  人烯醇式酸羧激酶(PCK)ELISA检测试剂盒Humanphosphoenolpyruvatecarboxykinase,PCKELISAKit 96T/48T

B9N-二甲基琥珀酰胺酸100克USP级，98.5%  大鼠谷氨酸免疫试剂盒 Rat Glamate ELISA Kit

录化苄;苄基录;录本 Bqnzyl chloridq;ω-Chlorotoluqnq;1-ChloroMqthylbqnzqnq  CLIAKitforVEGFR-2/Flk-1ELISAKit大鼠内皮细胞生长因子受体2规格：48T/96T

葡聚糖凝胶 Sephade... Sephadex G-25 Coarse 9041-35-4 100G 分离试剂  免疫细胞化学AP酶联NBT/BCIP基础检测试剂盒(无一抗和二抗)50次
罗丹宁10克RT  兔子Ⅲ型前胶原氨基端肽(PⅢ)免疫试剂盒 Rabbit procollagen Ⅲ N-terminal peptide,PⅢ ELISA Kit

盐葡萄糖胨水培养基Phosphate Glucose Peptone Water Medium  去乙酰化饥饿激素(dGHRL)ELISA试剂盒 ，英文名： dGHRL ELISA Kit

刚果红试纸100克  RabbitB-cellleukemia/lymphoma2,Bcl-2ELISA试剂盒兔子B细胞因子2(Bcl-2)ELISA试剂盒规格：96T/48T

聚乙二醇二 Poly(ethylene glycol) dimethyl ,M... 24991-55-7 100ML 通用试剂  Humanai-gliadinaibody,AGAELISA试剂盒人抗麦胶蛋白/麦醇溶蛋白抗体(AGA)ELISA试剂盒规格：96T/48T

二羌基炳同 Dixy7noxyccqtonq 1996/6/4  HumanC4bindingprotein，C4BPELISAKit人C4结合蛋白(C4BP)ELISA试剂盒规格：96T/48T
小鼠调节T细胞特价硅胶60薄层层析玻璃板shēng huà shì jì容量： 保存-20℃5KU  ELISAKitBGP/Gehrelin小鼠脑肠肽规格：48T/96T

Snailase 1g/10g/100g/1kg 国产  Humanai-prothrombinsaibodies,aPT1/aPT2ELISAKit人抗凝血素抗体(aPT1/aPT2)ELISA试剂盒规格：96T/48T

对基本磺酰胺1克  人粒细胞趋化蛋白-2(GCP-2/CXCL6)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

4-(三拂基)本硼醋 4-Trifluoromqthylphqnylboronic ccid 18796-39-4  小鼠酸性酶(PAP)免疫试剂盒 Mouse Prostatic Acid Phosphatase,PAP ELISA Kit

甲基白蛋白1公斤  转化生长因子-β诱导蛋白IG-H3(TGFBI/BIGH3)ELISA试剂盒 ，英文名： TGFBI/BIGH3 ELISA Kit

实验操作：
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶，置于超静台吹干或45℃烘箱烘干（切记保持无菌），4℃冰箱放置，备用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理：将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反复洗涤，去除外部的血渍，洗涤液澄清，用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞：将纵向剪开， 内膜面向上，无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍，去掉内皮细胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗涤3次。
5、分离中膜：将去掉内膜的，继续刮动分离中膜，去掉外膜，用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块，加入1 × PBS （pH 7.4 ），转移到15ml 离心管中，PBS洗涤3次，离心收集沉淀物。
6、消化：在洗净的内膜碎块中加入消化酶液，将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化：吸出消化液入新的离心管中，按1：1加入消化终止液，中止酶反应；余下的组织继续加入消化液，消化15min ，重复消化3次。
8、收集重悬细胞：收集中止后的消化液于离心管中，1000 rpm，离心10 min，弃去上清，加入培养液重悬，染色计数细胞。
9、培养细胞密度：调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养：放置于37℃，5% CO2培养箱中。