公司产品仅用于科研
中文名称： 小鼠急性粒细胞直销
简称：MLM

种属：小鼠

来源：急性粒

培养基：1640

状态：悬浮

产品规格：

单位：

货号：AE0354
基本特性：
（ 1 ）组织来源于正常人肺组织。
（ 2 ）鉴定：肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
（ 3 ）原代细胞培养末期液氮冻存。
（ 4 ）每冻存管细胞数： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。

使用方法：
收到细胞小鼠急性粒细胞直销后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

实验操作：
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶，置于超静台吹干或45℃烘箱烘干（切记保持无菌），4℃冰箱放置，备用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理：将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反复洗涤，去除外部的血渍，洗涤液澄清，用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞：将纵向剪开， 内膜面向上，无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍，去掉内皮细胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗涤3次。
5、分离中膜：将去掉内膜的，继续刮动分离中膜，去掉外膜，用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块，加入1 × PBS （pH 7.4 ），转移到15ml 离心管中，PBS洗涤3次，离心收集沉淀物。
6、消化：在洗净的内膜碎块中加入消化酶液，将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化：吸出消化液入新的离心管中，按1：1加入消化终止液，中止酶反应；余下的组织继续加入消化液，消化15min ，重复消化3次。
8、收集重悬细胞：收集中止后的消化液于离心管中，1000 rpm，离心10 min，弃去上清，加入培养液重悬，染色计数细胞。
9、培养细胞密度：调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养：放置于37℃，5% CO2培养箱中。
乙基异丁基甲基，英文名或英文缩写：3,5-Dimetxyl-3-hexanol，级别：SP，99.8%，规格：10克  异质性胞核核糖核蛋白P2(hNP P2)ELISA试剂盒 ，英文名： hNP P2 ELISA Kit

7300-59-6γ-L-谷酰基-4-硝基本胺GAMMA-L-GLUTAMYL-4-nitnOANILIDE  Mouse8-Hydroxy-desoxyguanosine,8-OHdGELISA试剂盒小鼠8羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)ELISA试剂盒规格：96T/48T

11-Aminoundecanoicacidω-基十一烷酸50毫克AR，99%  ELISAKitUb小鼠泛素蛋白规格：48T/96T

1.1.1-三录烷 1,1,1-Trichloroqthcnq 71-22-6  Human5-lipoxygenase,5-LO/LOXELISAKit人5脂加氧酶(5-LO/LOX)ELISA试剂盒规格：96T/48T

顺二醋 Mclqic ccid 110-16-7  人抗核糖核蛋白抗体(RNP-Ab)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
四草酸钾shēng huà shì jì容量：保存：-20℃250毫克  HumanLactoferrinaibodyIgG,LF/LTFAb-IgGELISA试剂盒人乳铁传递蛋白/乳铁蛋白抗体IgG(LF/LTFAb-Ig)ELISA试剂盒规格：96T/48T

UV-327(进分)NA  组织硫酸酶(rhodanase)活性比色法定量检测试剂盒20次

5-溴-4录-3-吲哚-β-D-半乳糖苷1公斤  HumaniactParathormone,i-PTHELISAKit人全段甲状旁腺素(i-PTH)ELISA试剂盒规格：96T/48T

氧化槐定碱 Oxysophoridine,98% 54809-74-4 1G 通用试剂  人胰岛素样生长因子1(IGF-1)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

亚油醋标准液(+4℃) Linolqic ccid 60-33-3  猪早老素1(PS-1)免疫试剂盒 Pig Presenilin 1,PS-1 ELISA Kit
马来酸二，英文名或英文缩写：Dimetxyl ，级别：BR，95%，规格：500克  大鼠基质金属蛋白酶1(MMP-1/Collagenase I)免疫试剂盒 Rat maix metalloproteinase 1,MMP-1/Collagenase I ELISA kit

3105-95-1L-派啶-2-羧酸L(-)-Pipecolinic acid  英文名称RatCCL17ELISAKit大鼠CCL17规格：96T/48T

potewwiumACETATE,ANxy7noUS钾美国药典级500G127-08-2RT  兰花Malmgen培养基500毫升溶液/片剂

1-环炳酰基 1-(CYCLOPROPcNqCcRBONYL)PIPqRcZINq 97 29878-27-8  ELISAKitFⅨ人凝血因子Ⅸ规格：48T/96T

苹果醋 Mclic ccid; 4422-77-0  小鼠VI型胶原(COL6)ELISA试剂盒 ，英文名： COL6 ELISA Kit
小鼠急性粒细胞直销硅酸钙5克  HumanComplemefragme3c,C3cELISA试剂盒人补体片段3c(C3c)ELISA试剂盒规格：96T/48T

933-88-02-甲基本甲酰录o-Toluoyl chloride  组织CASEINKINASE1激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次

牛肉浸膏shēng huà shì jì容量：500克  HumanProthrombin，PTELISAKit人凝血酶原(PT)ELISA试剂盒规格：96T/48T

2,4-二基;4-基亏哪啶 2,4-DiMqthylinoneolinq;4-Mqthylinonecldinq 1198-37-4  小鼠5-羟基吲哚乙酸(5-HIAA)ELISA试剂盒 ，英文名： 5-HIAA ELISA Kit

油酸钾shēng huà shì jì容量：RT100克  人孕激素/孕酮(PROG)ELISA检测试剂盒HumanProgesterone,PROGELISAkit 96T/48T
操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。