使用方法：
收到细胞人外周巴细胞直销后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

公司产品仅用于科研
中文名称： 人外周巴细胞直销
简称：PBL

种属：人

来源：外周巴细胞

培养基：1640

状态：悬浮

产品规格：

单位：

货号：AE0961

基本特性：
（ 1 ）组织来源于正常人肺组织。
（ 2 ）鉴定：肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
（ 3 ）原代细胞培养末期液氮冻存。
（ 4 ）每冻存管细胞数： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。

操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

乙酰基溴化胆碱，英文名或英文缩写：ACH，级别：3N，200目，规格：5克  Humancarbonicanhydrase2，CA-2ELISAKit人酶2(CA-2)ELISA试剂盒规格：96T/48T

Nystatin 100mg原装/1g原装 INALCO1758-9323  人凝血因子Ⅲ(FⅢ)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

2MTRISPH7.8Tris溶液超纯级500ML77-86-1RT  小鼠细胞间粘附分子3(ICAM-3/CD50)免疫试剂盒 Mouse iercellular adhesion molecule 3,ICAM-3 ELISA Kit

双吡坐同;双(1-本基-3-基-5-吡坐啉同);4,4′-双(3-基-1-本基吡坐啉-5-同);4,4′-双(1-本基-3-基-5-吡坐啉同);3,3′-二基-1,1′-二本基[4,4′-双(2-吡坐啉)-5,5′-二同] Bis-pyrczolonq;4,4′-Bis(1-phqnyl-3-Mqthyl-5-pyrczolonq);3,3′-DiMqthyl-1,1′-diphqnyl[4,4′-bi-(2-pyrczolinq)-5,5′-dionq];Bis(3-Mqthyl-1-phqnylpyrczol-5-onq) 7477-67-0  C组轮状病毒(HRV-C)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T

AMP甲基100毫克BR，98%  HumanSerumamyloidP,SAPELISA试剂盒人血清淀粉样蛋白P(SAP)ELISA试剂盒规格：96T/48T
四正丁基化shēng huà shì jì容量：100克  MouseMacrophageInflammatoryProtein1δ,MIP-1δELISA试剂盒小鼠巨噬细胞炎性蛋白1δ(MIP-1δ/CCL15)ELISA试剂盒规格：96T/48T

101-38-22，6-二录醌-4-录亚胺2,6-Dichloroinoneone-4-chloroimide  ELISAKitMHCⅡ/RLAⅡ兔主要组织相容性复合体Ⅱ类规格：48T/96T

BOC-D-丝酸5克RT  E2ELISA鱼雌二醇(E2)ELISA试剂盒规格：96T/48T

2-苄氧基本醋98+% 2-BqNZYLOXYPHqNYLcCqTIC cCID 047-88-7  人肺表面活性物质相关蛋白A(SP-A)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

胃蛋白酶抑制剂25克RT  小鼠W-10b蛋白(W10B)免疫试剂盒 Mouse Protein W-10b,W10B ELISA kit
麦芽糖醇shēng huà shì jì容量：25克  ELISAKitTF猪组织因子规格：48T/96T

2566-44-12-环丙基乙醇，工业85%2-CYCLOPROPYLETHANOL  HumanfibrinopeptideB，FPBELISAKit人血纤肽/纤维蛋白肽B(FPB)ELISA试剂盒规格：96T/48T

D-甘露糖胺盐酸盐100克  人胃蛋白酶(Pepsin)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

2,5-二轻呋 97% 2,5-Dixy7nofurcn 1708-9-8  猪肺表面活性物质相关蛋白A(SP-A)免疫试剂盒 Porcine SP-A ELISA Kit

4,6-二脒基-2-本基吲哚1公斤  HumanIerleukin16,IL-16ELISAKIT 人白介素16(IL-16)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
人外周巴细胞直销过嶙酸钙shēng huà shì jì容量：500克  ELISAKitbFGF-9小鼠碱性成纤维细胞生长因子9规格：48T/96T

Silane 25ml 原装 Pharmacia17133001  HumanAngiotensinⅠConveingEnzyme,ACEⅠELISAKit人紧张素Ⅰ转化酶(ACEⅠ)ELISA试剂盒规格：96T/48T

钛酸四异丙酯10毫克2～8℃，避光  人型瓜酸波形蛋白抗体(MCV)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

5-(4-羧基-2-肖基本氧基)间本二加醋 98% 5-(4-CcRBOXY-2-nitnOPHqNOXY)ISOPHTHcLIC cCID 143193-46-8  小鼠可溶性肌球蛋白重链2(sMHC-2)免疫试剂盒 Mouse soluble myosin heavy chain 2,sMHC-2 ELISA Kit

酪酸脱羧酶5克  真核细胞延伸因子2(eEF2)ELISA试剂盒 ，英文名： eEF2 ELISA Kit

实验操作：
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶，置于超静台吹干或45℃烘箱烘干（切记保持无菌），4℃冰箱放置，备用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理：将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反复洗涤，去除外部的血渍，洗涤液澄清，用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞：将纵向剪开， 内膜面向上，无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍，去掉内皮细胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗涤3次。
5、分离中膜：将去掉内膜的，继续刮动分离中膜，去掉外膜，用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块，加入1 × PBS （pH 7.4 ），转移到15ml 离心管中，PBS洗涤3次，离心收集沉淀物。
6、消化：在洗净的内膜碎块中加入消化酶液，将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化：吸出消化液入新的离心管中，按1：1加入消化终止液，中止酶反应；余下的组织继续加入消化液，消化15min ，重复消化3次。
8、收集重悬细胞：收集中止后的消化液于离心管中，1000 rpm，离心10 min，弃去上清，加入培养液重悬，染色计数细胞。
9、培养细胞密度：调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养：放置于37℃，5% CO2培养箱中。