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产地 | 科研 |
保存条件 | 低温冷藏 |
品牌 | 帛科 |
货号 | AE0480 |
用途 | 公司产品仅用于科研 |
组织来源 | 外周血单个核细胞 |
细胞形态 | 悬浮 |
是否是肿瘤细胞 | 否 |
CAS编号 | |
保质期 | 详见说明书 |
器官来源 | 详见说明书 |
免疫类型 | 详见说明书 |
品系 | 详见说明书 |
生长状态 | 详见说明书 |
物种来源 | 人 |
包装规格 | |
纯度 | % |
是否进口 | 是 |
基本特性:
( 1 )组织来源于正常人肺组织。
( 2 )鉴定:肌动蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
( 3 )原代细胞培养末期液氮冻存。
( 4 )每冻存管细胞数: 500000cells/1ml 。
( 5 )肌动蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
( 6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。
公司产品仅用于科研
中文名称: 人外周血单个核细胞特价
简称:PBMC
种属:人
来源:外周血单个核细胞
培养基:1640
状态:悬浮
产品规格:
单位:
货号:AE0480
使用方法:
收到细胞人外周血单个核细胞特价后,请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜,以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中,37℃温浴3min左右;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后吸弃消化液,再加入完全培养液终止消化;
3) 用吸管轻轻吹打混匀,按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代,然后补充新鲜的完全培养基至5mL,放入37℃,5% CO2细胞培养箱中培养;
4) 待细胞完全贴壁后,培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。
实验操作:
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶,置于超静台吹干或45℃烘箱烘干(切记保持无菌),4℃冰箱放置,备用。
2、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理:将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS (pH 7.4 )中反复洗涤,去除外部的血渍,洗涤液澄清,用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞:将纵向剪开, 内膜面向上,无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍,去掉内皮细胞,用1 × PBS (pH 7.4 )洗涤3次。
5、分离中膜:将去掉内膜的,继续刮动分离中膜,去掉外膜,用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块,加入1 × PBS (pH 7.4 ),转移到15ml 离心管中,PBS洗涤3次,离心收集沉淀物。
6、消化:在洗净的内膜碎块中加入消化酶液,将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化:吸出消化液入新的离心管中,按1:1加入消化终止液,中止酶反应;余下的组织继续加入消化液,消化15min ,重复消化3次。
8、收集重悬细胞:收集中止后的消化液于离心管中,1000 rpm,离心10 min,弃去上清,加入培养液重悬,染色计数细胞。
9、培养细胞密度:调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养:放置于37℃,5% CO2培养箱中。
操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
乙酰基乙酰本胺shēng huà shì jì容量:25克 人肌酸激酶(CPK)Elisa试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
BromcresolBlue,Na 5g/25g Amresco分装 小鼠热休克蛋白70(HSP-70)免疫试剂盒 Mouse Heat Shock Protein 70,Hsp-70 ELISA Kit
BESTATIN贝他定(本丁抑制素)蛋白组学级10MG58970-76-6Frozen 足细胞标记蛋白/足盂蛋白(PCX)ELISA试剂盒 ,英文名: PCX ELISA Kit
言醋啊米替林 cMitriptylinq xy7nochloridq 249-18-8 Humahyroid-Peroxidase,TPOELISA试剂盒人甲状腺过氧化物酶(TPO)ELISA试剂盒规格:96T/48T
二溴录烷;录二溴烷 DibroMochloroMqthcnq 14-48-1 ELISAKitCO小鼠皮质同/肾上腺同规格:48T/96T
苏打石灰,英文名或英文缩写:Soda lime,级别:AR,99%,规格:30毫升 MouseVascuolarcelladhesionmolecule1,VCAM-1ELISA试剂盒小鼠内皮细胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA试剂盒规格:96T/48T
BES 10g/25g/100g原装 Sigma B9879 EscherichiacoliProtein,E.coliPELISA试剂盒大肠杆菌宿主残留蛋白(E.coliP)ELISA试剂盒规格:96T/48T
BACITRACINZINC杆菌肽美国药典级500kU1405-89-6COLD HumanangiotensionⅡreceptor1,ANGⅡR-1ELISAKit人紧张素Ⅱ受体1(ANGⅡR-1)ELISA试剂盒规格:96T/48T
流化铵 cmmonium sulfidq 1132-76-1 人波形蛋白(VIM)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Linoleicacid十八碳-9,12-二烯酸500克USP级,99% 豚鼠白介素8(IL-8)免疫试剂盒 Guinea pig Ierleukin 8,IL-8 ELISA Kit
麦芽糖酶,英文名或英文缩写:γ-MDH,级别:BR,20u/ul,规格:1克 猪胱抑素C(CST3/Cys-C)免疫试剂盒 Pig Cystatin-C,CST3 ELISA kit
62852-91-9姆沙伯 105CHROMOSORB(R) 105 HumanLeukemiainhibitoryfactor,LIFELISAkit 人抑制因子(LIF)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
3-基,英文名或英文缩写:β-Alanine,级别:BR,98%,规格:10克 HumanN-Acetyl-Ser-Asp-Lys-Pro,AcSDKPELISA试剂盒人N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸(AcSDKP)ELISA试剂盒规格:96T/48T
碱性红1:1 Basic Red 1:1,90% 3068-39-1 25G 吸附树脂 组织总氨基酸含量比色法定量检测试剂盒20次
FTA纯化 FTc Purificction Rqcgqnt HumanFreei-iodothyronineIndes,Free-T3ELISAKit人游离三甲状腺原氨酸(Free-T3)ELISA试剂盒规格:96T/48T
人外周血单个核细胞特价过氧化物酶染液10片/箱 Humancaspaseactivateddeoxyribonuclease,CADELISA试剂盒人胱天蛋白酶激活的脱氧核糖核酸酶(CAD)ELISA试剂盒规格:96T/48T
167684-17-53.3’-二基联本胺盐酸盐3,3'-Diaminobenzidine tetraxy7nochloride dihydrate 转基因油菜(canola)GT73品系试剂盒20次
二醛测试盒shēng huà shì jì容量:RT20个/包 humansimilaoRIKENcDNA4931408D14geneELISAKit人类似RIKENcDNA4931408D14基因ELISA试剂盒规格:96T/48T
2-(三硅烷基)氧基录(SEMCl) 2-(Trimqthylsilyl)qthoxymqthyl chloridq 76213-69-4 小鼠白介素10(IL-10)ELISA试剂盒 ,英文名: IL-10 ELISA Kit
蜜二糖shēng huà shì jì容量:2~8℃5克 大鼠腺来源的内皮生长因子(EG-VEGF)ELISA检测试剂盒RatEndocrineglandvascularendothelialgrowthfactor,EG-VEGFELISAKit 96T/48T