使用方法：
收到细胞人套细胞细胞现货供应后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

公司产品仅用于科研
中文名称： 人套细胞细胞现货供应
简称：Granta-519

种属：人

来源：套细胞；女性

培养基：1640

状态：悬浮

产品规格：

单位：

货号：AE0461

基本特性：
（ 1 ）组织来源于正常人肺组织。
（ 2 ）鉴定：肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
（ 3 ）原代细胞培养末期液氮冻存。
（ 4 ）每冻存管细胞数： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。

操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

乙酰乙酸shēng huà shì jì容量：1公斤  Humanangiostatin,ANGELISA试剂盒人抑素/稳定蛋白(ANG)ELISA试剂盒规格：96T/48T

633-96-5酸性橙 7Acid Orange 7  HumanATP-bindingcassetteanspoerG2,ABCG2ELISAKit人腺苷三结合盒转运体G2(ABCG2)ELISA试剂盒规格：96T/48T

脂质体2000，英文名或英文缩写：Lipofectamine 2000 Transfection Reagent，级别：AR，99%，规格：5克  人β干扰素(IFN-β/IFNB)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

蚕蛹蛋白胨 Silkworm chrysalis protein peptone Null 250G 通用试剂  兔子肝细胞生长因子(HGF)免疫试剂盒 Rabbit hepatocyte growth factor,HGF ELISA Kit

二流代赤藓醇 Dithioqrythritol　(DTq) 689-68-8  三角形四肽重复蛋白1(TTC1/TPR1)ELISA试剂盒 ，英文名： TTC1/TPR1 ELISA Kit
苏木色精25克  小鼠抗IgE受体抗体免疫试剂盒 Mouse ai-IgE receptor aibody ELISA Kit

14337-53-2环氧树脂2-(5-BROMO-2-PYRIDYLAZO)-5-(DIetxylAMINO)pxenOL  游离血红蛋白(f-Hb)ELISA试剂盒 ，英文名： f-Hb ELISA Kit

草酸低铁，英文名或英文缩写：Ferrous oxalate dihydrate，级别：3N，规格：25克  Lensculinarisagglinin,LCAELISA试剂盒扁豆凝集素(LCA)ELISA试剂盒规格：96T/48T

邻录本安 2-Chlorocnilinq 92-21-  ELISAKitBMPs小鼠骨形成蛋白规格：48T/96T

，英文名或英文缩写：MSA，级别：BR，99%，规格：10克  Humanadaptormoleculeapoptoticpeptidaseactivatingfactor1,APAF1ELISAKit人衔接蛋白酶活化因子1(APAF1)ELISA试剂盒规格：96T/48T
毛地黄皂苷5克RT  组织S6KINASE激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次

9001-42-7α-葡糖苷酶(+4℃)EC 3.2.1.20  Humanosteoclastdiffereiationfactor,ODFELISAKit人破骨细胞分化因子(ODF)ELISA试剂盒规格：96T/48T

五氧化二钶，英文名或英文缩写：Niobium(V) oxide，级别：BR，45%，规格：500毫克  兔子补体蛋白4(C4)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

2-磺基苯酐 2-Sulfobenzoic anhydride,98% 1981-8-3 25G 通用试剂  Human vascular endothelial cell growth factor receptor 1 (VEGFR-1) ELISA Kit 人内皮细胞生长因子受体1(VEGFR-1)ELISA试剂盒

LiChroCcRT@250-4  Humanperoxisomeproliferatorsactivatorreceptorsalpha,PPAR-αELISAKit 人过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPAR-α)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
人套细胞细胞现货供应海藻糖无水物shēng huà shì jì容量：RT5克  Humanai-hepatitisBviruscoreaibody,HBcAbELISA试剂盒人核心抗体(HBcAb)ELISA试剂盒规格：96T/48T

10387-40-3硫代乙酸钾potewwium thioacetate  HumanCaldesmon，CALDELISAKit人钙调结合蛋白(CALD)ELISA试剂盒规格：96T/48T

免疫血清兔抗人IgG，Fcshēng huà shì jì容量：RT250克  人P53抗体(P53-ab)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

3-基对 2-Methoxy-5-methylaniline,99% 120-71-8 25G 通用试剂  兔子Ⅰ型胶原N末端肽(X)免疫试剂盒 Rabbit cross linked N-telopeptide of type Ⅰ collagen,X ELISA Kit

醋醋双拂拉松 Diflorcsonq Diccqtctq 33264-31-7  趋化因子CXCL16(CXCL16)ELISA试剂盒 ，英文名： CXCL16 ELISA Kit

实验操作：
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶，置于超静台吹干或45℃烘箱烘干（切记保持无菌），4℃冰箱放置，备用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理：将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反复洗涤，去除外部的血渍，洗涤液澄清，用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞：将纵向剪开， 内膜面向上，无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍，去掉内皮细胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗涤3次。
5、分离中膜：将去掉内膜的，继续刮动分离中膜，去掉外膜，用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块，加入1 × PBS （pH 7.4 ），转移到15ml 离心管中，PBS洗涤3次，离心收集沉淀物。
6、消化：在洗净的内膜碎块中加入消化酶液，将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化：吸出消化液入新的离心管中，按1：1加入消化终止液，中止酶反应；余下的组织继续加入消化液，消化15min ，重复消化3次。
8、收集重悬细胞：收集中止后的消化液于离心管中，1000 rpm，离心10 min，弃去上清，加入培养液重悬，染色计数细胞。
9、培养细胞密度：调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养：放置于37℃，5% CO2培养箱中。