公司产品仅用于科研
中文名称： 人髓系细胞现货供应
简称：EM-3

种属：人

来源：髓系；女性

培养基：IMDM

状态：悬浮

产品规格：

单位：

货号：AE01258
基本特性：
（ 1 ）组织来源于正常人肺组织。
（ 2 ）鉴定：肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
（ 3 ）原代细胞培养末期液氮冻存。
（ 4 ）每冻存管细胞数： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。

使用方法：
收到细胞人髓系细胞现货供应后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

实验操作：
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶，置于超静台吹干或45℃烘箱烘干（切记保持无菌），4℃冰箱放置，备用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理：将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反复洗涤，去除外部的血渍，洗涤液澄清，用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞：将纵向剪开， 内膜面向上，无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍，去掉内皮细胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗涤3次。
5、分离中膜：将去掉内膜的，继续刮动分离中膜，去掉外膜，用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块，加入1 × PBS （pH 7.4 ），转移到15ml 离心管中，PBS洗涤3次，离心收集沉淀物。
6、消化：在洗净的内膜碎块中加入消化酶液，将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化：吸出消化液入新的离心管中，按1：1加入消化终止液，中止酶反应；余下的组织继续加入消化液，消化15min ，重复消化3次。
8、收集重悬细胞：收集中止后的消化液于离心管中，1000 rpm，离心10 min，弃去上清，加入培养液重悬，染色计数细胞。
9、培养细胞密度：调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养：放置于37℃，5% CO2培养箱中。
异去氧胆酸1公斤  Guineapigmajorhistocompatibilitycomplex,MHC/GPLAELISAKit豚鼠主要组织相容性复合体(MHC/GPLA)ELISA试剂盒规格：96T/48T

(转铁蛋白)  人受体(LDLR)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

嶙酸shēng huà shì jì容量：100克  小鼠DNA(胞嘧啶-5)甲基转移酶3A(DNMT3A)免疫试剂盒 Mouse DNA(cytosine-5)-methylansferase 3A,DNMT3A ELISA kit

4-氧基本同;4-氧基酰本;4-酰茴香迷;4-酰本迷;队氧基本同 4-Mqthoxyccqtophqnonq;4-ccqtylcnisolq;ccqtcnisol 100-06-1  维生素D(VD)ELISA试剂盒 ，英文名： VD ELISA Kit

抗生素Ⅷ号培养基shēng huà shì jì容量：100克  Mouseoxidizidedglathione,GSGSELISA试剂盒小鼠氧化型谷胱甘肽(GSGS)ELISA试剂盒规格：96T/48T
苏木素染液shēng huà shì jì容量：10片/箱  ChickenHyaluronicacid,HAELISA试剂盒鸡透明质酸(HA)ELISA试剂盒规格：96T/48T

pNPG 1g/5g/25g 原装 Amresco 0680  Human5-lipoxygenase,5-LO/LOXELISAKit人5脂加氧酶(5-LO/LOX)ELISA试剂盒规格：96T/48T

蛋白酶K溶液5克  人单核细胞趋化蛋白3(MCP-3/CCL7)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

8-羌基;8-轻氧化;8-羌基氮(杂);邻羌基氮(杂) 8-xy7noxyinoneolinq;Oxyinoneolinq;Oxinq;inoneophqnol;8-inoneolinonq;xy7noxybqnzopyridinq;Oxybqnzopyridinq;Phqnopyridinq;Oxy 148-4-3  小鼠5羟色胺(5-HT)免疫试剂盒 Mouse 5-Hydroxyyptamine,5HT ELISA Kit

CAPS,wo7iumSALTCAPS, Na超纯级100GRT  透明质酸结合蛋白2(HABP2)ELISA试剂盒 ，英文名： HABP2 ELISA Kit
玫瑰红酸钠shēng huà shì jì容量：250U  小鼠DNA(胞嘧啶-5)甲基转移酶1(DNMT1)ELISA试剂盒 ，英文名： DNMT1 ELISA Kit

Putrescinexy7nochloride 5g/25g Sigma分装  大鼠白介素27(IL-27)ELISA检测试剂盒RatIerleukin27,IL-27ELISAKit 96T/48T

荧光素100克  人C型凝集素结构域家族4成员E(CLEC4E)免疫试剂盒 human CLEC4E ELISA Kit

5-氧基-2-巯基本并咪坐 99% 5-Mqthoxy-2-mqrccptobqnzimidczolq 3702-78-1  英文名称MouseBonemorphogeneticprotein2ELISAKit小鼠骨成型蛋白质2(BMP-2)规格：96T/48T

RIBOREADY100BRNALADDERRNA laddeTFrozen  冰冻切片1脂皮尔斯(Pearse)染色试剂盒50次
人髓系细胞现货供应核糖核酸酶(牛胰)25克  PorcineHyaluronicacid,HAELISA试剂盒猪透明质酸(HA)ELISA试剂盒规格：96T/48T

1910-42-5甲基紫精 98%Paraquat dichloride  HumanActivinA,ACV-AELISA试剂盒人活化素A(ACV-A)ELISA试剂盒规格：96T/48T

1-Dodecanethiol正十二100克AR，99%  Humanai-rubellavirusIgMaibody，ai-RVIgMELISAKit人IgM抗体(ai-RVIgM)ELISA试剂盒规格：96T/48T

反式-2-羟基肉桂酸 2-Hydroxycinnamic acid, predominantly ... 614-60-8 5G 标准品  人白介素15(IL-15)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

DL-色安醋;DL-胰化蛋柏安基醋;DL-色安基醋;DL-2-安基-3-吲哚基-1-炳醋;DL-安基吲哚炳醋 DL-Tryptophcn ;DL-2-cMino-3-indolqpropionic ccid;DL-2-cMino-3-indolylpro-pcnoic ccid;DL-β-3-Indolyl clcninq;(±)-2-cMino-3-(3-indolyl)propionic ccid 1924-1-6  兔子硫氧化还原蛋白(x)免疫试剂盒 Rabbit Thioredoxin,x ELISA Kit
操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。