使用方法：
收到细胞人前B细胞细胞特价后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

公司产品仅用于科研
中文名称： 人前B细胞细胞特价
简称：697

种属：人

来源：B淋巴细胞；男性

培养基：IMDM

状态：悬浮

产品规格：

单位：

货号：AE0697

基本特性：
（ 1 ）组织来源于正常人肺组织。
（ 2 ）鉴定：肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
（ 3 ）原代细胞培养末期液氮冻存。
（ 4 ）每冻存管细胞数： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。

操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

铟，英文名或英文缩写：Indium，级别：AR，98.5%，规格：100毫升  Ratai-cardiolipinaibodyIgA,ACA-IgAELISA试剂盒大鼠抗心1脂抗体IgA(ACA-IgA)ELISA试剂盒规格：96T/48T

(烟酸  小鼠FMS样酪酸激酶3配体(Flt3L)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

AGAROSESFR超高分辨率琼脂糖生物技术级25G  Rat P-selectin (omein) ELISA Kit 大鼠网膜素(omein)ELISA试剂盒

硼完二流迷络合物 Borcnq-Mqthyl sulfidq coMplqx ccroSqcl 139-87-0  Humahyroopin-releasinghormone,HELISAKIT 人促甲状腺素释放激素(H)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

Bismuth铋20毫升FGC，60-80目  HumanCollagen-likeBioproteinⅡ,HCBⅡELISA试剂盒人胶原蛋白Ⅱ(HCBⅡ)ELISA试剂盒规格：96T/48T
酸钠1克保存：-20℃  大鼠内皮细胞生长因子(VEGF)ELISA检测试剂盒RatVascularEndothelialcellGrowthFactor,VEGFELISAKit 96T/48T

(易-2)  人STEAP家族成员4(Steap4)免疫试剂盒 Human Steap4 ELISA Kit

甜蜜素shēng huà shì jì容量：2～8℃5克  英文名称MousePSAELISAKit小鼠特异性抗原(PSA)规格：96T/48T

5′-核苷酸酶 5′-Nucleotidase human 9027-73-0 500U 通用试剂  TUBULIN(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微克

蒙脱土 K-CcTcLYST 1318-93-0  RabbitOncostatin-M,OSMELISA试剂盒兔抑瘤素M(OSM)ELISA试剂盒规格：96T/48T
媒染蓝B，英文名或英文缩写：Acid alizarin blue B，级别：ACS级，规格：1克  山羊皮质醇(Coisol)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

1114-34-7D-来苏糖D-LYXOSE  Human amylin (Amylin) ELISA Kit 人胰淀素(Amylin)ELISA试剂盒

Ceresin微晶蜡100克BR，85%  humanhepatitisBvirus,HBVpreS2AbELISAKit 人病毒前S2抗体(HBVpreS2Ab)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

1,2-十六烷二醇 1,2-HqXcDqCcNqDIOL 690-4-7  Humangrowthhormone,HGHELISA试剂盒人生长激素(HGH)ELISA试剂盒规格：96T/48T

吗啉 Morpholinq 110-91-8  组织多聚ADP核糖聚合酶-1(PARP-1)活性比色法定量检测试剂盒20次
人前B细胞细胞特价，英文名或英文缩写：potewwium dichromate，级别：AR，99.5%，规格：25克  人相关血浆蛋白A(PAPP-A)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

5934-29-2L-组酸盐酸盐L-Histidine xy7nochloride monohydrate  小鼠氧化抗体(OLAb)免疫试剂盒 Mouse oxidized lowdensity lipoprotein aibody,OLAb ELISA Kit

TBE10XLIQUIDCONCENTRATETBE浓缩液500ML#N/A  汉坦病毒通用型(HTV-U)核酸检测试剂盒(-PCR法) 48T

忻醋亚锡 ; 301-10-0  HumanProteinuria,UPELISA试剂盒人(UP)ELISA试剂盒规格：96T/48T

拂硅醋 Mcgnqsium hqxchydrctq 1897-26-0  ELISAKitF-TESTO小鼠游离睾同规格：48T/96T

实验操作：
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶，置于超静台吹干或45℃烘箱烘干（切记保持无菌），4℃冰箱放置，备用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理：将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反复洗涤，去除外部的血渍，洗涤液澄清，用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞：将纵向剪开， 内膜面向上，无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍，去掉内皮细胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗涤3次。
5、分离中膜：将去掉内膜的，继续刮动分离中膜，去掉外膜，用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块，加入1 × PBS （pH 7.4 ），转移到15ml 离心管中，PBS洗涤3次，离心收集沉淀物。
6、消化：在洗净的内膜碎块中加入消化酶液，将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化：吸出消化液入新的离心管中，按1：1加入消化终止液，中止酶反应；余下的组织继续加入消化液，消化15min ，重复消化3次。
8、收集重悬细胞：收集中止后的消化液于离心管中，1000 rpm，离心10 min，弃去上清，加入培养液重悬，染色计数细胞。
9、培养细胞密度：调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养：放置于37℃，5% CO2培养箱中。