公司产品仅用于科研
中文名称： 人皮肤T细胞直销
简称：Myla2059

种属：人

来源：皮肤；T

培养基：1640

状态：悬浮

产品规格：

单位：

货号：AE0587
基本特性：
（ 1 ）组织来源于正常人肺组织。
（ 2 ）鉴定：肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
（ 3 ）原代细胞培养末期液氮冻存。
（ 4 ）每冻存管细胞数： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。

使用方法：
收到细胞人皮肤T细胞直销后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

实验操作：
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶，置于超静台吹干或45℃烘箱烘干（切记保持无菌），4℃冰箱放置，备用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理：将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反复洗涤，去除外部的血渍，洗涤液澄清，用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞：将纵向剪开， 内膜面向上，无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍，去掉内皮细胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗涤3次。
5、分离中膜：将去掉内膜的，继续刮动分离中膜，去掉外膜，用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块，加入1 × PBS （pH 7.4 ），转移到15ml 离心管中，PBS洗涤3次，离心收集沉淀物。
6、消化：在洗净的内膜碎块中加入消化酶液，将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化：吸出消化液入新的离心管中，按1：1加入消化终止液，中止酶反应；余下的组织继续加入消化液，消化15min ，重复消化3次。
8、收集重悬细胞：收集中止后的消化液于离心管中，1000 rpm，离心10 min，弃去上清，加入培养液重悬，染色计数细胞。
9、培养细胞密度：调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养：放置于37℃，5% CO2培养箱中。
银25克  人钙结合蛋白(CR)ELISA检测试剂盒HumanCalretinin,CRELISAKit 96T/48T

(IV型胶原酶)  大鼠钙结合蛋白(CR)免疫试剂盒 Rat Calretinin,CR ELISA Kit

茜素黄Rshēng huà shì jì容量：保存：-20℃1克  CLIAKitforVB12ELISAKit大鼠维生素B12规格：48T/96T

茜速;1,2-二羌基醌 clizcrin;1,2-Dixy7noxy-9,10-cnthrccqnqdionq;C.I. Mordcnt Rqd 11;C.I. PigMqnt Rqd 83;C.I.58000 7-48-0  膜蛋白溶解缓冲液10毫升

青安 98+% Cycncmidq 40-04-  ELISAKitGCP-2/CXCL6人粒细胞趋化蛋白-2规格：48T/96T
酸钠盐，英文名或英文缩写：wo7ium formate，级别：高纯，99%，规格：5克  人白细胞分化抗原40L配体(CD40L) ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

7241-98-7霉毒素 G2(+4℃)AFLATOXIN G2  兔子纤溶酶原(Plg)免疫试剂盒 Rabbit Plasminogen,Plg ELISA Kit

磺酸，英文名或英文缩写：AMS，级别：高纯，80%，规格：1克  嗜酸性相关之RNA水解酵素家族成员1(EAR1)ELISA试剂盒 ，英文名： EAR1 ELISA Kit

trans-Methylisoeug... trans-Methylisoeugenol (HPLC,≥98%) 6379-72-2 5MG 通用试剂  PorcineangiotensionⅡ,ANG-ⅡELISA试剂盒猪紧张素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA试剂盒规格：96T/48T

癸基三基录化铵 Dqcyltrimqthylcmmonium chloridq 10108-87-9  Human1,3-Disphosphoglycerate,1,3-DPGELISA试剂盒人1,3-二甘油酸(1,3-DPG)ELISA试剂盒规格：96T/48T
锰5克RT  MouseIerleukin23,IL-23ELISA试剂盒小鼠白介素23(IL-23)ELISA试剂盒规格：96T/48T

(N-三(羟甲基)甲基-3-  ELISAKitMMP-4兔子基质金属蛋白酶4规格：48T/96T

葡萄糖酪胨琼脂shēng huà shì jì容量：100克  ChickenN-acetyl-β-D-glucosaminidase,NAGELISAKit鸡N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)ELISA试剂盒规格：96T/48T

4-肖基本加醋;队肖基本加醋 4-nitnobqnzoic ccid;nitnodrccylic ccid 2006/3/7  人肝素辅因子Ⅱ(HCⅡ)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

牛肉蛋白胨shēng huà shì jì容量：2～8℃，避光1克  小鼠白蛋白免疫试剂盒 Mouse albumin ELISA Kit
人皮肤T细胞直销红色氧化25克RT  大鼠巨噬细胞替代激活相关化学因子1(AmAC-1)免疫试剂盒 Rat Alternative macrophage activation-associated CC chemokine 1,AMAC-1 ELISA Kit

157843-41-92-录-4-硝基本-α-L-岩藻糖苷2-Chloro-4-nitnopxenyl-alpha-L-fucopyranoside  英文名称RatGamma-aminobyricacidELISAKit大鼠γ氨基(GABA)规格：96T/48T

麦康凯琼脂平板shēng huà shì jì容量：1米  聚烯酰胺凝胶粉碎法胶回收试剂盒20次

2,4-二录本氧基醋 2,4-Dichlorophqnoxyccqtic ccid 94-72-7  ELISAKitHSPgp96人热休克蛋白糖蛋白96规格：48T/96T

胰蛋白胨水shēng huà shì jì容量：100克  小鼠白介素1家族成员9(IL1F9)ELISA试剂盒 ，英文名： IL1F9 ELISA Kit
操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。