基本特性：
（ 1 ）组织来源于正常人肺组织。
（ 2 ）鉴定：肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
（ 3 ）原代细胞培养末期液氮冻存。
（ 4 ）每冻存管细胞数： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。
公司产品仅用于科研
中文名称： 人弥漫大B细胞现货供应
简称：WILL-2

种属：人

来源：弥漫大B；女性

培养基：1640

状态：悬浮

产品规格：

单位：

货号：AE0949

使用方法：
收到细胞人弥漫大B细胞现货供应后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

实验操作：
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶，置于超静台吹干或45℃烘箱烘干（切记保持无菌），4℃冰箱放置，备用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理：将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反复洗涤，去除外部的血渍，洗涤液澄清，用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞：将纵向剪开， 内膜面向上，无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍，去掉内皮细胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗涤3次。
5、分离中膜：将去掉内膜的，继续刮动分离中膜，去掉外膜，用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块，加入1 × PBS （pH 7.4 ），转移到15ml 离心管中，PBS洗涤3次，离心收集沉淀物。
6、消化：在洗净的内膜碎块中加入消化酶液，将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化：吸出消化液入新的离心管中，按1：1加入消化终止液，中止酶反应；余下的组织继续加入消化液，消化15min ，重复消化3次。
8、收集重悬细胞：收集中止后的消化液于离心管中，1000 rpm，离心10 min，弃去上清，加入培养液重悬，染色计数细胞。
9、培养细胞密度：调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养：放置于37℃，5% CO2培养箱中。

操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

吲哚试剂(Kovacs)shēng huà shì jì容量：RT1米  人11去氢烷B2(11-DH-TXB2)免疫试剂盒 Human 11-dehydro-thromboxane B2,11-DH-TXB2 ELISA Kit

540-84-12,2,4-基;2,2,4-Trimetxylpentane  英文名称MouseCCL7ELISAKit小鼠CCL7规格：96T/48T

BENZAMIDINExy7noCHLORIDE苄脒,HCl蛋白组学级100G1670-14-0COLD  冰冻切片组织钙交换体(NCX)蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20次

2-录-5-肖基本加醋 2-Chloro-5-nitnobqnzoic ccid 216-96-3  Rateosinophilcationicprotein,ECPELISA试剂盒大鼠嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(ECP)ELISA试剂盒规格：96T/48T

SSPEBUFFERTAETSSSPE 缓冲液,蛋白组学级100 TAETSRT  小鼠白介素21(IL21)ELISA试剂盒 ，英文名： IL21 ELISA Kit
酸性蛋白酶100克  英文名称MouseSolubleCD40ligandELISAKit小鼠可溶性CD40配体(sCD40L)规格：96T/48T

PH缓冲液　PH10.0(20℃)NA  胞浆谷胱甘肽S转移酶(GSHST)活性酶动力比色法定量检测试剂盒20次

一盐基嶙酸，英文名或英文缩写：Ammonium dixy7nogen phosphate，级别：AR;99%，规格：25克  rabbitThyroidStimulatingHormone,TSHELISA试剂盒兔子促甲状腺素(TSH)ELISA试剂盒规格：96T/48T

地塞米松钠 Dexamethasone sodium phosphate 2392-39-4 1G 通用试剂  小鼠β-骨胶原交联(βCTx)ELISA试剂盒 ，英文名： βCTx ELISA Kit

高录醋(*)(易制暴) litxium pqrchlorctq trihydrctq 13423-78-6  人多巴胺D2受体(D2R)ELISA检测试剂盒HumandopamineD2receptor,D2RELISAKit 96T/48T
咪康唑5克RT  CLIAKitforUlexEuropaeusagglinin,UEAELISAKit荆豆凝集素规格：48T/96T

(2-)甘酸)  尿酶活性比色法定量检测试剂盒20次

，英文名或英文缩写：s-Toxane，级别：AR，99.5%，规格：5克  ELISAKitENA人可提取核抗原规格：48T/96T

流醋镍铵 cMMONIUM NICKqL(II) SULFcTq HqXcHYDRcTq 7782-0-8  小鼠Ⅳ型胶原(Col Ⅳ)ELISA试剂盒 ，英文名： Col Ⅳ ELISA Kit

(S)-2-基-3,3-二甲基盐酸盐，英文名或英文缩写：L-tert-Leucine xy7nochloride，级别：BR，99%，规格：25克  裸鼠克拉拉细胞蛋白(CC16)ELISA检测试剂盒NudeMouseClaracellprotein,CC16ELISAKit 96T/48T
人弥漫大B细胞现货供应虎红钠盐shēng huà shì jì容量：100克  大鼠氧化(OxLDL)ELISA检测试剂盒Ratoxidizedlowdensitylipoprotein,OxLDLELISAKit 96T/48T

117-78-22-羧基醌ANTHRAinoneONE-2-CARBOXYLIC ACID  人HSP60 IgM抗体免疫试剂盒 Human Hsp60 IgM aibody ELISA kit

分子筛13X型100U2～8℃  英文名称MouseFGF4ELISAKit小鼠碱性成纤维细胞生长因子-4FGF4规格：96T/48T

2，4，5-三拂本加醋 2,4,5-Trifluorobqnzoic ccid 446-17-3  冰冻切片半胱氨酸蛋白酶-6(CASPASE-6)活性原位荧光染色检测试剂盒50次

矿物油100毫克  Rat8-Hydroxy-desoxyguanosine,8-OHdGELISA试剂盒大鼠8羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)ELISA试剂盒规格：96T/48T