使用方法：
收到细胞人朗格汉斯细胞型树突状细胞特价后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

公司产品仅用于科研
中文名称： 人朗格汉斯细胞型树突状细胞特价
简称：ELD-1

种属：人

来源：朗格汉斯细胞型树突状细胞

培养基：1640

状态：悬浮

产品规格：

单位：

货号：AE01555

基本特性：
（ 1 ）组织来源于正常人肺组织。
（ 2 ）鉴定：肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
（ 3 ）原代细胞培养末期液氮冻存。
（ 4 ）每冻存管细胞数： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。

操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

硬脂酸25克  CLIAKitforbFGF-9(Humanbasicfibroblastgrowthfactor9)ELISAKit人碱性成纤维细胞生长因子9规格：48T/96T

2303-1-7间紫;间酚紫;间磺酞M-Cresol purple  细菌同还原酶(aldo-ketoreductase)总活性比色法定量检测试剂20次

柠檬酸钠shēng huà shì jì容量：25克  rabbitIerleukin6,IL-6ELISAKit兔子白介素6(IL-6)ELISA试剂盒规格：96T/48T

土槿D Pseudolaric acid D (HPLC,≥98%) 115028-67-6 5MG 通用试剂  豚鼠降钙素基因相关肽(CGRP)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

依思明蓝 IscMin bluq;Brillicnt sky bluq 5G;C.I. 42700 134-86-3  Rat androstene two ketone (ASD) ELISA Kit 大鼠雄(ASD)ELISA试剂盒
随机引物，英文名或英文缩写：Random primers，级别：BR，40u/ul，规格：500克  RatapoproteinB100,apo-B100ELISA试剂盒大鼠载脂蛋白B100(apo-B100)ELISA试剂盒规格：96T/48T

9010-41-7曲拉通 X200wo7ium ALKYLARYLPOLY SULFONATE  Humanc-mycOncogeneproduct,c-mycELISA试剂盒人c-myc癌基因产物(c-myc)ELISA试剂盒规格：96T/48T

BROMOCRESOLGREENFREEACID溴绿ACS级淡棕色粉末RTsigma  Humanepidermalkeratin,EKELISAKit人表皮角蛋白(EK)ELISA试剂盒规格：96T/48T

5--2-甲基 5-Fluoro-2-methyl,96% 22062-53-9 1G 通用试剂  牛脑源性神经营养因子(BDNF)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

钴/亚钴/七水钴/赤矾/Cobalt sulfate heptahydrate AR，99.5%， 100克 国产  人转录因子抗体-1(ATF-1)免疫试剂盒 Human activating anscription factor-1,ATF-1 ELISA Kit
免疫血清兔抗人κ链shēng huà shì jì容量：RT500克  HumanEuglobulinLysis,ELELISAKit人优球蛋白(EL)ELISA试剂盒规格：96T/48T

29632-74-42-扶-4-本胺2-Fluoro-4-iodoaniline  人晚期氧化蛋白产物(AOPP)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

癸基葡萄糖苷25克  猪促卵泡素(FSH)免疫试剂盒 Porcine Follicle-stimulating hormone,FSH ELISA Kit

2,5-二基-2,5-二(叔丁基过氧化) 2,5-Dimqthyl-2,5-di(tqrt-butylpqroxy)hqxcnq 78-63-7  Humanneuophilactivatingprotein-2,NAP-2ELISAKit 人中性粒细胞趋化蛋白2(NAP-2/CXCL7)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

阿尔新蓝8GX250克2～8°C  HumanN-terminalprocollagenⅢpropeptide,PⅢNPELISA试剂盒人Ⅲ型前胶原肽(PⅢNP)ELISA试剂盒规格：96T/48T
人朗格汉斯细胞型树突状细胞特价环孢霉素A，英文名或英文缩写：Cyclosporin A，级别：BR，2ml/支，规格：100毫克  humanphospholipidscramblase1,PLSCR1ELISA试剂盒人1脂爬行酶1(PLSCR1)ELISA试剂盒规格：96T/48T

87-69-4锡Tin  ELISAKitIL-1α猪白介素1α规格：48T/96T

Fmoc-D-Met-OHFMOC-D-蛋酸100克特纯，98%  Humancytotoxin,CTXELISAKit人细胞毒素(CTX)ELISA试剂盒规格：96T/48T

1,4-二(二基硅烷基)本 1,4-Bis(dimqthylsilyl)bqnzqnq 488-1-9  人输血传播病毒/辛型肝炎病毒((TTV)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

氧西林内 Mqthicillin wo7ium (cS) 746-14-  小鼠转化生长因子α(TGF-α)免疫试剂盒 Mouse ansforming growth factor α,TGF-α ELISA Kit

实验操作：
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶，置于超静台吹干或45℃烘箱烘干（切记保持无菌），4℃冰箱放置，备用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理：将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反复洗涤，去除外部的血渍，洗涤液澄清，用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞：将纵向剪开， 内膜面向上，无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍，去掉内皮细胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗涤3次。
5、分离中膜：将去掉内膜的，继续刮动分离中膜，去掉外膜，用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块，加入1 × PBS （pH 7.4 ），转移到15ml 离心管中，PBS洗涤3次，离心收集沉淀物。
6、消化：在洗净的内膜碎块中加入消化酶液，将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化：吸出消化液入新的离心管中，按1：1加入消化终止液，中止酶反应；余下的组织继续加入消化液，消化15min ，重复消化3次。
8、收集重悬细胞：收集中止后的消化液于离心管中，1000 rpm，离心10 min，弃去上清，加入培养液重悬，染色计数细胞。
9、培养细胞密度：调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养：放置于37℃，5% CO2培养箱中。