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产地 | 科研 |
保存条件 | 低温冷藏 |
品牌 | 帛科 |
货号 | AE0411 |
用途 | 公司产品仅用于科研 |
组织来源 | 急性髓系白血病;男性 |
细胞形态 | 悬浮 |
是否是肿瘤细胞 | 否 |
CAS编号 | |
保质期 | 详见说明书 |
器官来源 | 详见说明书 |
免疫类型 | 详见说明书 |
品系 | 详见说明书 |
生长状态 | 详见说明书 |
物种来源 | 人 |
包装规格 | |
纯度 | % |
是否进口 | 是 |
公司产品仅用于科研
中文名称: 人急性骨髓细胞直销
简称:KG-1a
种属:人
来源:急性髓系;男性
培养基:1640
状态:悬浮
产品规格:
单位:
货号:AE0411
基本特性:
( 1 )组织来源于正常人肺组织。
( 2 )鉴定:肌动蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
( 3 )原代细胞培养末期液氮冻存。
( 4 )每冻存管细胞数: 500000cells/1ml 。
( 5 )肌动蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
( 6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。
使用方法:
收到细胞人急性骨髓细胞直销后,请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜,以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中,37℃温浴3min左右;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后吸弃消化液,再加入完全培养液终止消化;
3) 用吸管轻轻吹打混匀,按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代,然后补充新鲜的完全培养基至5mL,放入37℃,5% CO2细胞培养箱中培养;
4) 待细胞完全贴壁后,培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。
实验操作:
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶,置于超静台吹干或45℃烘箱烘干(切记保持无菌),4℃冰箱放置,备用。
2、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理:将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS (pH 7.4 )中反复洗涤,去除外部的血渍,洗涤液澄清,用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞:将纵向剪开, 内膜面向上,无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍,去掉内皮细胞,用1 × PBS (pH 7.4 )洗涤3次。
5、分离中膜:将去掉内膜的,继续刮动分离中膜,去掉外膜,用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块,加入1 × PBS (pH 7.4 ),转移到15ml 离心管中,PBS洗涤3次,离心收集沉淀物。
6、消化:在洗净的内膜碎块中加入消化酶液,将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化:吸出消化液入新的离心管中,按1:1加入消化终止液,中止酶反应;余下的组织继续加入消化液,消化15min ,重复消化3次。
8、收集重悬细胞:收集中止后的消化液于离心管中,1000 rpm,离心10 min,弃去上清,加入培养液重悬,染色计数细胞。
9、培养细胞密度:调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养:放置于37℃,5% CO2培养箱中。
游离生物素测定培养基50张/盒 人游离β绒毛膜激素(f-βhCG)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
513-38-2代Isobutyl iodide Rat histone deacetylase (HD) ELISA Kit 大鼠组织蛋白去乙酰化酶(HD)ELISA试剂盒
扶化铈shēng huà shì jì容量:RT10克 Humannonsmallcelllungcancer/LungtumorAigen,LTAELISAKit 人非小细胞抗原(LTA)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
ε-聚赖酸 ε-poly-L-lysine 28211-04-3 25G 通用试剂 HumanIerferonβ,IFN-β/IFNBELISA试剂盒人β干扰素(IFN-β/IFNB)ELISA试剂盒规格:96T/48T
双羌醋羌嗪 xy7noxyzinq PcMoctq 1046-72-0 组织结合(酯化)胆固醇酶连续循环比色法定量检测试剂盒20次
肽聚糖,英文名或英文缩写:PGN,级别:BR,规格:25毫克 ELISAKitPROG小鼠孕激素/孕同规格:48T/96T
6-(γ,γ-Dimetxylallylamino) 25mg 原装 Sigma D-7257 Humancoloncancer-specificaigen-4,CCSA-4ELISAKit人专一抗原4(CCSA-4)ELISA试剂盒规格:96T/48T
DL-Histidine(±)-2-基-3-(4-咪唑基)5克BR,99% 人溶血补体(Hc)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
典化铯 CqsiuM iodidq ; 7789-17-2 小鼠合成酶(NOS)免疫试剂盒 Mouse niic oxide syhase,NOS ELISA Kit
3-基本以酮shēng huà shì jì容量:保存:-20℃500ul 病毒Ⅰ型(DFV-Ⅰ)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T
末端转移酶shēng huà shì jì容量:500毫克 小鼠BH3相互作用域死亡激动剂(Bid)ELISA试剂盒 ,英文名: Bid ELISA Kit
CollagenIV 1g Worthington原装 人骨退化特异标志物(CTX-2)ELISA检测试剂盒HumanCTX-2ELISAKit 96T/48T
N-壬酰基-N-甲基葡萄糖胺100克 大鼠钙激活中性蛋白酶1(CAPN1)免疫试剂盒 Rat calpain 1,CAPN1 ELISA Kit
减性蓝6B cLKcLI BLUq 6B 8004-90-8 CLIAKitforvaspin(MouseVisceraladipose-specificserineproteaseinhibitor)ELISAKit小鼠内脏脂肪特异性丝氨酸蛋白酶抑制剂规格:48T/96T
青醋;青基醋;青基醋醋 Cycnoccqtic ccid;Mclonic Mononitnilq 1937/9/8 膜电位依赖性纯化线粒体氧化应激活性氧(ROS)初级荧光测定试剂盒20次
人急性骨髓细胞直销黄芩甙,英文名或英文缩写:Baicalin,级别:色固,规格:25克 Humansquamouscellcarcinomarelatedaigen,SCCAgELISAKit 人相关抗原(SCCAg)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
1142-20-7N-苄氧羰基-L-酸N-Carbobenzyloxy-L-alanine Humaninsulin-likegrowthfactorsbindingprotein3,IGFBP-3ELISA试剂盒人胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP-3)ELISA试剂盒规格:96T/48T
TRYPSININHIBITOR,SOYBEAN胰蛋白酶抑制剂,大豆试剂级1G9035-81-8Frozen 组织脊髓过氧化酶(MPO)活性高质敏感比色法定量检测试剂盒20次
3-溴-5-羌基 (5-BROMO-PYRIDIN-3-YL)-MqTHcNOL 37669-64-0 Humanlambdaimmunoglobulinlightchain,λ-IgLCELISAKit人免疫球蛋白轻链lambda(λ-IgLC)ELISA试剂盒规格:96T/48T
来区坐 Lqtrozolq 11809-21-2 人诱导型合成酶(iNOS)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。