使用方法：
收到细胞人急性T淋巴细胞细胞直销后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

公司产品仅用于科研
中文名称： 人急性T淋巴细胞细胞直销
简称：J45.01

种属：人

来源：急性T淋巴细胞；男性

培养基：1640

状态：悬浮

产品规格：

单位：

货号：AE0968

基本特性：
（ 1 ）组织来源于正常人肺组织。
（ 2 ）鉴定：肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
（ 3 ）原代细胞培养末期液氮冻存。
（ 4 ）每冻存管细胞数： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。

操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

有水氧化铁，英文名或英文缩写：Ferric xy7noxide，级别：2.7N，99.7%，规格：1克  人分泌成分(SC)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

57260-71-61-Boc-tert-Butyl 1-pipercarboxylate  小鼠αL岩藻糖苷酶(AFU)免疫试剂盒 Mouse alpha-L-fucosidase,AFU ELISA Kit

pHSTANDARD,10.0pH标准液10.0生物技术级  细胞绒毛蛋白/埃兹蛋白(cytovillin/ezrin)ELISA试剂盒 ，英文名： cytovillin/ezrin ELISA Kit

4，4，5，5，6，6，7，7，8，8，9，9，9-十三拂壬醋 2H,2H,3H,3H-PqRFLUORONONcNOIC cCID 7824-30-4  MouselymphocytefactorELISA试剂盒小鼠淋巴细胞因子ELISA试剂盒规格：96T/48T

UREA,8MSOLUTION尿素,8M溶液超纯级250MLCOLD  ELISAKitPⅢNP兔子Ⅲ型前胶原肽规格：48T/96T
碳化硅1克RT  组织组蛋白脱乙酰化酶(HDAC)总活性比色法定量检测试剂盒20次

96-43-52-录1吩2-Chlorothiopxene  Humanfilameoushemagglinin,FHAELISAKit人丝狀血球凝集素(FHA)ELISA试剂盒规格：96T/48T

铝shēng huà shì jì容量：100毫克  人胃泌素释放多肽(GRP)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

O,P'-2,4-DDT 789-0-6  猪脯氨酸羟化酶(PHD)免疫试剂盒 Pig prolyl hydroxylases,PHD ELISA Kit

亚钠琼脂shēng huà shì jì容量：1公斤  HumanIerleukin11,IL-11ELISAKIT 人白介素11(IL-11)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
木聚糖酶，英文名或英文缩写：Xylanase，级别：精制级，2000U/mg，规格：100克  MouseDehydroepiandrosteronesulfate,DHEA-SELISA试剂盒小鼠脱氢表雄同酯(DHEA-S)ELISA试剂盒规格：96T/48T

(L-胱酸)  ELISAKitOH小鼠25羟基维生素D3规格：48T/96T

Indoxyl-Glucoside吲哚酚-β-葡糖苷10毫克BR  ChickenIerferonβ,IFN-β/IFNBELISAKit鸡β干扰素(IFN-β/IFNB)ELISA试剂盒规格：96T/48T

单丁基氧化锡 Butyltin oxidq 73-43-0  人基质金属蛋白酶10(MMP-10)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

安替福民 Sodium Hypochlorite Solution (Antiform... 7681-52-9 100ML 通用试剂  小鼠胆固醇酯转移蛋白(CETP)免疫试剂盒 Mouse cholest erolester ansfer protein,CETP ELISA Kit
人急性T淋巴细胞细胞直销煌绿黄胺嘧啶琼脂shēng huà shì jì容量：500克  小鼠MAP激酶活化蛋白激酶2(MAPKAPK2)免疫试剂盒 Mouse MAP kinase-activated protein kinase 2,MAPKAPK2 ELISA kit

Saponin 10g/100g 国产  胃泌素细胞抗体(GCA)ELISA试剂盒 ，英文名： GCA ELISA Kit

3-[(3-胆固醇丙基)二甲基基]-2-羟基-1-丙磺酸2×0.25毫升保存：-20℃  MouseNeuroglobin,NGBELISA试剂盒小鼠脑红蛋白(NGB)ELISA试剂盒规格：96T/48T

5,6-二基本并咪坐 5,6-DiMqthylbqnziMidczolq 28-60-2  ELISAKitHSP-70兔热休克蛋白70规格：48T/96T

还原辅酶Ⅰ二钠盐1公斤  GuineaPigadvancedglycationendproducts,AGEsELISAKit豚鼠晚期糖基化终末产物(AGEs)ELISA试剂盒规格：96T/48T

实验操作：
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶，置于超静台吹干或45℃烘箱烘干（切记保持无菌），4℃冰箱放置，备用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理：将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反复洗涤，去除外部的血渍，洗涤液澄清，用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞：将纵向剪开， 内膜面向上，无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍，去掉内皮细胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗涤3次。
5、分离中膜：将去掉内膜的，继续刮动分离中膜，去掉外膜，用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块，加入1 × PBS （pH 7.4 ），转移到15ml 离心管中，PBS洗涤3次，离心收集沉淀物。
6、消化：在洗净的内膜碎块中加入消化酶液，将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化：吸出消化液入新的离心管中，按1：1加入消化终止液，中止酶反应；余下的组织继续加入消化液，消化15min ，重复消化3次。
8、收集重悬细胞：收集中止后的消化液于离心管中，1000 rpm，离心10 min，弃去上清，加入培养液重悬，染色计数细胞。
9、培养细胞密度：调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养：放置于37℃，5% CO2培养箱中。