公司产品仅用于科研
中文名称： 人霍奇金细胞直销
简称：L-540

种属：人

来源：霍奇金；女性

培养基：1640

状态：悬浮

产品规格：

单位：

货号：AE0907
基本特性：
（ 1 ）组织来源于正常人肺组织。
（ 2 ）鉴定：肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
（ 3 ）原代细胞培养末期液氮冻存。
（ 4 ）每冻存管细胞数： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。

使用方法：
收到细胞人霍奇金细胞直销后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

实验操作：
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶，置于超静台吹干或45℃烘箱烘干（切记保持无菌），4℃冰箱放置，备用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理：将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反复洗涤，去除外部的血渍，洗涤液澄清，用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞：将纵向剪开， 内膜面向上，无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍，去掉内皮细胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗涤3次。
5、分离中膜：将去掉内膜的，继续刮动分离中膜，去掉外膜，用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块，加入1 × PBS （pH 7.4 ），转移到15ml 离心管中，PBS洗涤3次，离心收集沉淀物。
6、消化：在洗净的内膜碎块中加入消化酶液，将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化：吸出消化液入新的离心管中，按1：1加入消化终止液，中止酶反应；余下的组织继续加入消化液，消化15min ，重复消化3次。
8、收集重悬细胞：收集中止后的消化液于离心管中，1000 rpm，离心10 min，弃去上清，加入培养液重悬，染色计数细胞。
9、培养细胞密度：调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养：放置于37℃，5% CO2培养箱中。
元素光谱粉shēng huà shì jì容量：RT10克  Human low density lipoprotein receptor (LDLR) ELISA Kit 人受体(LDLR)ELISA试剂盒

Brij-35 200g/5kg原装 Sigma P1254  MonkeyhighsensitivityC-ReactiveProtein,hs-CRPELISAKit 猴超敏C反应蛋白(hs-CRP)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

β-蛋白组学级100MLRT  CLIAKitforBigETELISAKit大鼠大内皮素规格：48T/96T

拂化轻铵;醋性拂化铵 cMMoniuM bifluoridq   细素酶(UREASE)活性化学发光法定量检测试剂盒20次

邻本二加醋二丁酯 dibutyl phthclctq 84-74-  rabbitleukemiainhibitoryfactorreceptor,LIFRELISAKit兔子抑制因子受体(LIFR)ELISA试剂盒规格：96T/48T
碳酸钡shēng huà shì jì容量：25克  人足细胞标记蛋白(PCX)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

RNASIN RNA酶 INHIBITOR(-20℃)NA  Rat lipolysaccharide binding protein (LBP) ELISA Kit 大鼠脂多糖结合蛋白(LBP)ELISA试剂盒

胆固醇酯酶(猪胰)100克  HumanCollageypeⅢ,ColⅢELISAKIT 人Ⅲ型胶原(ColⅢ)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

2-酰基-2-甲... 2-Acrylamido-2-methyl-1-propanesulfoni... 15214-89-8 100G 通用试剂  HumanHemolyticcompleme,HcELISA试剂盒人溶血补体(Hc)ELISA试剂盒规格：96T/48T

无水溴化 litxium bromidq 7220-32-8  组织甘油激酶(Glycerolkinase)活性酶连续反应比色法定量检测试剂盒20次
纳他霉素，英文名或英文缩写：Pimaricin，级别：BR，规格：100毫克  HumanSolubleClusterofdiffereiation21,sCD21ELISAKit 人可溶性白细胞分化抗原21(CR2/sCD21)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

(录化溶液)  HumanEsogen-inducedproteinpS2ELISA试剂盒人雌激素诱导蛋白PS2ELISA试剂盒规格：96T/48T

Fibrinogenfromhumanplasma血浆凝固因子250毫克BR，5-10u/mg  组织Src激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次

溴酚红;二溴酚磺酞 BroMophqnol rqd;BPR 800-80-8  HumanOrexieceptor,OXRELISAKit人食欲素受体(OXR)ELISA试剂盒规格：96T/48T

印度墨水 India ink (certified by the Biological... Null 100ML 染色剂  兔子白介素2(IL-2)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人霍奇金细胞直销煌绿增菌液25毫升  小鼠凝血因子XIII A1(F13A1)免疫试剂盒 Mouse Coagulation Factor XIII A1 Polypeptide,F13A1 ELISA kit

Tryptone 500g Oxoid原装  重组激活基因2(RAG-2)ELISA试剂盒 ，英文名： RAG-2 ELISA Kit

核糖核酸酶T1shēng huà shì jì容量：5克  Humanueinsulin,TIELISA试剂盒人真胰岛素(TI)ELISA试剂盒规格：96T/48T

4-羌基-TEMPO,氮氧自由基 4-xy7noxy-2,2,6,6-tqtrcmqthyl-pipqridinooxy 6-96-  ELISAKitPL-A2小鼠1脂酶A2规格：48T/96T

酸shēng huà shì jì容量：1克  Humanai-myelinaibodyIgA,AMAIgAELISAKit人抗髓1脂抗体IgA(AMAIgA)ELISA试剂盒规格：96T/48T
操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。