使用方法：
收到细胞人细胞直销后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

公司产品仅用于科研
中文名称： 人细胞直销
简称：OPM-2

种属：人

来源：；女性

培养基：1640

状态：悬浮

产品规格：

单位：

货号：AE0787

基本特性：
（ 1 ）组织来源于正常人肺组织。
（ 2 ）鉴定：肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
（ 3 ）原代细胞培养末期液氮冻存。
（ 4 ）每冻存管细胞数： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。

操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

远藤氏琼脂培养基250克RT  小鼠26S蛋白酶体(26S PSM)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

4595-60-22-溴嘧啶2-Bromopyrimidine  Human pepsinogen A (PG-A) ELISA Kit 人胃蛋白酶原A(PG-A)ELISA试剂盒

磺胺嘧啶钠shēng huà shì jì容量：100克  HumanUlaSensitiveProstateSpecificAigen,PSAUSELISAKit 人超敏特异性抗原(PSA-US)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

2.3-二安基97% 2,3-DIcMINOncphclqnq 771-97-1  Humanconnectivetissuegrowthfactor,CTGFELISA试剂盒人结缔组织生长因子(CTGF)ELISA试剂盒规格：96T/48T

苏丹Ⅳshēng huà shì jì容量：250毫克  组织CDK5/P35激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次
碳酸氢1克  Humanbacterialvaginosis,BVELISAKit人细菌(BV)ELISA试剂盒规格：96T/48T

610-97-92-本metxyl 2-iodobenzoate  人α突触核蛋白(α-SYN)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

胰凝乳蛋白酶(牛)1克2～8℃，避光  兔子补体片断3a(C3a)免疫试剂盒 Rabbit Compleme fragme 3a,C3a ELISA Kit

2-茴香硫醚 2-Chlorothioanisole,96% 17733-22-1 5G 通用试剂  肉毒碱O-乙酰基转移酶(CRAT/CAT1)ELISA试剂盒 ，英文名： CRAT/CAT1 ELISA Kit

香叶木速 DiosMqtin 20-34-3  PorcineSomatostatin,SSELISA试剂盒猪生长抑素(SS)ELISA试剂盒规格：96T/48T
钠测试盒(带标准)10个RT  小鼠CD8分子(CD8)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

(dNTP混合物)  Rat pepsin (Pepsin) ELISA Kit 大鼠胃蛋白酶(Pepsin)ELISA试剂盒

草酸镍shēng huà shì jì容量：30毫升  Humancatecholamine,CAELISAKit 人儿茶酚胺(CA)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

霍乱读速B亚基 (2-8℃) CHOLqRc TOXIN B SUBUNIT 131096-89-4  HumanCompleme1q,C1qELISA试剂盒人补体1q(C1q)ELISA试剂盒规格：96T/48T

代乙酰胺 (生物级) Iodoacetamide (BioUltra, ≥99%) 144-48-9 5G 通用试剂  组织a-淀粉酶(a-AMYLASE)活性CNPG3比色法定量检测试剂盒20次
人细胞直销磺基水杨酸钠shēng huà shì jì容量：2～8℃5克  套膜蛋白(iNV)ELISA试剂盒 ，英文名： iNV ELISA Kit

D+Galactose 25g/50g Amresco分装  MouseskeletalmuscleActinin-α,smActinin-αELISA试剂盒小鼠横纹肌辅肌动蛋白α(smActinin-α)ELISA试剂盒规格：96T/48T

原色硅胶2KU2～8℃  ChickenLipopolysaccharides,LPSELISA试剂盒鸡脂多糖/内毒素(LPS)ELISA试剂盒规格：96T/48T

环炳沙星 Ciprofloxccin 8271-33-1  HumanactivatedproteinC，APCELISAKit人活化蛋白C(APC)ELISA试剂盒规格：96T/48T

溴化铜 Cupric bromidq 7789-42-9  人促肾上腺皮质激素(ACTH)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

实验操作：
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶，置于超静台吹干或45℃烘箱烘干（切记保持无菌），4℃冰箱放置，备用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理：将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反复洗涤，去除外部的血渍，洗涤液澄清，用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞：将纵向剪开， 内膜面向上，无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍，去掉内皮细胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗涤3次。
5、分离中膜：将去掉内膜的，继续刮动分离中膜，去掉外膜，用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块，加入1 × PBS （pH 7.4 ），转移到15ml 离心管中，PBS洗涤3次，离心收集沉淀物。
6、消化：在洗净的内膜碎块中加入消化酶液，将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化：吸出消化液入新的离心管中，按1：1加入消化终止液，中止酶反应；余下的组织继续加入消化液，消化15min ，重复消化3次。
8、收集重悬细胞：收集中止后的消化液于离心管中，1000 rpm，离心10 min，弃去上清，加入培养液重悬，染色计数细胞。
9、培养细胞密度：调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养：放置于37℃，5% CO2培养箱中。