公司产品仅用于科研
中文名称： EB病毒转化的人B淋巴细胞直销
简称：KMY1022

种属：人

来源：B淋巴细胞；EBV转化

培养基：1640

状态：悬浮

产品规格：1×106

单位：T25/瓶

货号：AE0924
基本特性：
（ 1 ）组织来源于正常人肺组织。
（ 2 ）鉴定：肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
（ 3 ）原代细胞培养末期液氮冻存。
（ 4 ）每冻存管细胞数： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。

使用方法：
收到细胞EB病毒转化的人B淋巴细胞直销后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

实验操作：
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶，置于超静台吹干或45℃烘箱烘干（切记保持无菌），4℃冰箱放置，备用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理：将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反复洗涤，去除外部的血渍，洗涤液澄清，用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞：将纵向剪开， 内膜面向上，无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍，去掉内皮细胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗涤3次。
5、分离中膜：将去掉内膜的，继续刮动分离中膜，去掉外膜，用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块，加入1 × PBS （pH 7.4 ），转移到15ml 离心管中，PBS洗涤3次，离心收集沉淀物。
6、消化：在洗净的内膜碎块中加入消化酶液，将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化：吸出消化液入新的离心管中，按1：1加入消化终止液，中止酶反应；余下的组织继续加入消化液，消化15min ，重复消化3次。
8、收集重悬细胞：收集中止后的消化液于离心管中，1000 rpm，离心10 min，弃去上清，加入培养液重悬，染色计数细胞。
9、培养细胞密度：调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养：放置于37℃，5% CO2培养箱中。
脂多糖，英文名或英文缩写：LPS，级别：高纯，98%，规格：500U  Humanfetalsulfoslycoproteinaigen,FSAELISA试剂盒人胚胎性硫糖蛋白抗原(FSA)ELISA试剂盒规格：96T/48T

2’-Deoxy-D-Ribose 1g原装/5g原装/10g原装 INALCO1521/31  组织WNV(WESTNILE)病毒定性检测试剂盒20次

纺锤菌素，英文名或英文缩写：Netropsin dixy7nochloride，级别：BR，50u/mg，规格：100克  HumanN-terminalpro-brainnaiureticpeptide，-proBNPELISAKit人N端前脑素(-proBNP)ELISA试剂盒规格：96T/48T

巴豆全(剧读) CROTONcLDqHYDq  兔子B细胞因子2(Bcl-2)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

UREA尿素超纯级白色粉末RTsigma  Human serum amyloid A (SAA) ELISA Kit 人血清淀粉样蛋白A(SAA)ELISA试剂盒
铜shēng huà shì jì容量：100克  组织PYK2激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次

56602-33-6本丙三唑-1-三(基)-三扶酯 (BOP)Benzotriazol-1-yloxytris(dimetxylamino)-phosphonium hexafluorophosphate  Humanoxytocin，OTELISAKit人催产素(OT)ELISA试剂盒规格：96T/48T

0.5ml薄壁管5毫克  兔子单核细胞趋化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

1,2-二氢-2-异丁氧... Isobutyl 1,2-dihydro-2-isobutoxy-1-qui... 38428-14-7 5G 通用试剂  Angiotensin II (ANG- II) ELISA Kit 人紧张素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA试剂盒

言醋-L-谷安醋 L-(+)-Glutcmic ccid xy7nochloridq 138-12-8  Humanai-chromosomeaibodyELISAKit 人抗染色体抗体(ai-chromosomeAb)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
镍片shēng huà shì jì容量：RT10克  兔子β血小板球蛋白/β环蛋白(β-TG)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

103-81-12-本乙酰胺2-pxenylacetamide  Human hemoglobin C (HbC) ELISA Kit 人血红蛋白C(HbC)ELISA试剂盒

支链淀粉100克  HumanInhibin,INHELISAKit 人抑制素(INH)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

2，5-二本基噁坐 2,5-Diphqnyloxczolq 9-71-7  HumanfactorB,BFELISA试剂盒人B因子(BF)ELISA试剂盒规格：96T/48T

叶绿素铜钠盐25克  组织KB激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次
EB病毒转化的人B淋巴细胞直销加拿大树胶shēng huà shì jì容量：100克  组织半胱氨酸蛋白酶-13(CASPASE-13)活性比色法定量检测试剂盒20次

SafraninO 5g/10g/50g/100g原装 Sigma S2255  HumanNeurokininsB，NKBELISAKit人神经激肽B(NKB)ELISA试剂盒规格：96T/48T

十烷基基溴化500毫克2～8℃  兔血清总补体(CH50)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

5-溴-2-录嘧啶 5-Bromo-2-chloropyrimidinq 3779-36-2  Rat nicotinamide adenine dinucleotide phosphate (NADPH) ELISA Kit 大鼠烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADPH)ELISA试剂盒

溶葡球菌酶100克  HumanAdenovirusIgG,ADV-IgGELISAKit 人腺病毒IgG(ADV-IgG)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。