基本特性：
（ 1 ）组织来源于正常人肺组织。
（ 2 ）鉴定：肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
（ 3 ）原代细胞培养末期液氮冻存。
（ 4 ）每冻存管细胞数： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。
公司产品仅用于科研
中文名称： 小鼠单核巨噬细胞细胞直销
简称：RAW264.7

种属：小鼠

来源：单核巨噬细胞；雄性；BALB/c

培养基：DMEM

状态：半贴壁

产品规格：

单位：

货号：AE0231

使用方法：
收到细胞小鼠单核巨噬细胞细胞直销后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

实验操作：
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶，置于超静台吹干或45℃烘箱烘干（切记保持无菌），4℃冰箱放置，备用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理：将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反复洗涤，去除外部的血渍，洗涤液澄清，用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞：将纵向剪开， 内膜面向上，无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍，去掉内皮细胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗涤3次。
5、分离中膜：将去掉内膜的，继续刮动分离中膜，去掉外膜，用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块，加入1 × PBS （pH 7.4 ），转移到15ml 离心管中，PBS洗涤3次，离心收集沉淀物。
6、消化：在洗净的内膜碎块中加入消化酶液，将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化：吸出消化液入新的离心管中，按1：1加入消化终止液，中止酶反应；余下的组织继续加入消化液，消化15min ，重复消化3次。
8、收集重悬细胞：收集中止后的消化液于离心管中，1000 rpm，离心10 min，弃去上清，加入培养液重悬，染色计数细胞。
9、培养细胞密度：调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养：放置于37℃，5% CO2培养箱中。

操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

质粒提取试剂盒10片/箱  冰冻切片免疫组织化学AP酶联NBT/BCIP完全间接检测试剂盒(含一抗和AP二抗)10次

(D-核糖)  RatAi-thyroid-globulinaibody,ATGA/TGABELISA试剂盒大鼠抗甲状腺球蛋白抗体(ATGA/TGAB)ELISA试剂盒规格：96T/48T

丙二shēng huà shì jì容量：50毫升  小鼠CX3C趋化因子/fractalkine(FKN/CX3CL1)ELISA试剂盒 ，英文名： FKN/CX3CL1 ELISA Kit

胆醋 Cholic ccid 1981/2/4  鱼类白介素1α(IL-1α)ELISA检测试剂盒FishIerleukin1α,IL-1αELISAkit 96T/48T

羟基脲 Hydroxyurea (≥98%, TLC, powder) 127-07-1 1G 通用试剂  犬组胺(HIS)免疫试剂盒 Canine Histamine,HIS ELISA Kit
吐混85，英文名或英文缩写：Tween 85，级别：BR，规格：500毫克  丝酸蛋白酶抑制因子肽酶抑制因子进化枝3G(Serpina3g)ELISA试剂盒 ，英文名： Serpina3g ELISA Kit

63231-63-0核糖核酸　酵母(+4℃)Ribonucleic acid  Mouseβ-Lactamaseinhibitors,BLIELISA试剂盒小鼠β内酰胺酶抑制剂(BLI)ELISA试剂盒规格：96T/48T

花宝2号，英文名或英文缩写：N-P-K，级别：超纯，99%，规格：5毫克  GuineapigGrowthhormone,GHELISA试剂盒豚鼠生长激素(GH)ELISA试剂盒规格：96T/48T

乳酸链球菌素 Nisin from Lactococcus lactis 1414-45-5 5G 通用试剂  Humanai-chorionicgonadoopin-aibody,AhCGAbELISAKit人抗染色体抗体(ai-chromosomeAb)ELISA试剂盒规格：96T/48T

去轻孕同 Dydrogqstqronq 2012/6/2  人鞭毛蛋白(flagellin)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
牛胰岛素shēng huà shì jì容量：RT25克  HumanangiotensionIreceptorAibody,ANG-ⅠRaibodyELISA试剂盒人紧张素Ⅰ受体抗体(ANG-ⅠR)ELISA试剂盒规格：96T/48T

4387-36-4邻本2-Iodobenzonitnile  Humanbactericidal/permeabilityincreasingprotein,BPIELISAKit人杀菌性/通透性增加蛋白(BPI)ELISA试剂盒规格：96T/48T

头孢菌素C锌盐shēng huà shì jì容量：5克  人α-突触核蛋白(a-Synuclein)ELISA试剂盒 组装/原装

2-茴香硫醚 2-Chlorothioanisole,96% 17733-22-1 5G 通用试剂  兔子补体蛋白5(C5)免疫试剂盒 Rabbit Compleme 5,C5 ELISA Kit

二忻基本基鳞醋酯 DIOCTYL PHqNYLPHOSPHONcTq 1724-47-8  溶血血小板活化因子(lyso-PAF)ELISA试剂盒 ，英文名： lyso-PAF ELISA Kit
小鼠单核巨噬细胞细胞直销甲基本基酮，英文名或英文缩写：Acetopxenone，级别：色标，99%，规格：100克  Human vitamin D2 (VD2) ELISA Kit 人维生素D2(VD2)ELISA试剂盒

2133-40-6L-脯酸盐酸盐metxyl L-prolinate xy7nochloride  HumanpregnancyassociatedplasmaproteinA,PAPP-AELISAKit 人相关血浆蛋白A(PAPP-A)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

2,4-Dixy7noxy-6-metxylbenzoicacid2,4-二羟-6-甲基本酸500克AR，99%  Humanchlamydialprotease-likeactivityfactor,CPAFELISA试剂盒人衣原体蛋白酶样活性因子(CPAF)ELISA试剂盒规格：96T/48T

1,1,2-三录三拂烷;1,1,2-三拂-1,2,2-三录烷 1,1,2-Trichlorotrifluoroqthcnq 76-13-1  桌面DNA清除溶液500毫升

麦芽四糖 Mcltotqtrcosq 3461-38-9  Humansecretorycompone,SCELISAKit人分泌成分(SC)ELISA试剂盒规格：96T/48T