公司产品仅用于科研
中文名称： 小鼠细胞直销
简称：NS-1

种属：小鼠

来源：

培养基：IMDM

状态：半贴壁

产品规格：

单位：

货号：AE0788
基本特性：
（ 1 ）组织来源于正常人肺组织。
（ 2 ）鉴定：肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
（ 3 ）原代细胞培养末期液氮冻存。
（ 4 ）每冻存管细胞数： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。

使用方法：
收到细胞小鼠细胞直销后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

实验操作：
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶，置于超静台吹干或45℃烘箱烘干（切记保持无菌），4℃冰箱放置，备用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理：将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反复洗涤，去除外部的血渍，洗涤液澄清，用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞：将纵向剪开， 内膜面向上，无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍，去掉内皮细胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗涤3次。
5、分离中膜：将去掉内膜的，继续刮动分离中膜，去掉外膜，用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块，加入1 × PBS （pH 7.4 ），转移到15ml 离心管中，PBS洗涤3次，离心收集沉淀物。
6、消化：在洗净的内膜碎块中加入消化酶液，将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化：吸出消化液入新的离心管中，按1：1加入消化终止液，中止酶反应；余下的组织继续加入消化液，消化15min ，重复消化3次。
8、收集重悬细胞：收集中止后的消化液于离心管中，1000 rpm，离心10 min，弃去上清，加入培养液重悬，染色计数细胞。
9、培养细胞密度：调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养：放置于37℃，5% CO2培养箱中。
中分子量标准蛋白，英文名或英文缩写：Middle range protein MW marker，级别：BR，100u/mg，规格：100克  Ratbasicfibroblastgrowthfactor6,bFGF-6ELISA试剂盒大鼠碱性成纤维细胞生长因子6(bFGF-6)ELISA试剂盒规格：96T/48T

12650-88-3溶菌酶LysozyMe froM chicken egg white BioCheMika  humancolicinELISA试剂盒人大肠菌素(colicin)ELISA试剂盒规格：96T/48T

AZUREB天青B高纯级深绿色/紫色粉末RTsigma  Humanerythropoiesisstimulatingfactor,ESFELISAKit人红细胞刺激因子(ESF)ELISA试剂盒规格：96T/48T

2--5- 2-Chloro-5-fluoro,98% 84194-30-9 5G 通用试剂  牛金属硫蛋白(MT)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

铵/铔/硫铵/硫/Ammonium sulfate AR，99% 500克 国产/进口  人转化生长因子β3(TGF-β3)免疫试剂盒 Human ansforming Growth factor β3,TGF-β3 ELISA kit
吐温65100克  人癌标志物-CA153ELISAKit人癌标志物-CA153ELISAKit，48T/96T人癌标志物-CA153ELISAKit，48T/96T规格：48T/96T

94-75-72,4-二录本氧基乙酸2,4-Dichloropxenoxyacetic acid  小鼠白介素3(IL-3)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

盐培养基shēng huà shì jì容量：100克  Human dehydroepiandrosterone sulfate (DHEA-S) ELISA Kit 人脱氢表雄酮酯(DHEA-S)ELISA试剂盒

2-溴代酰安 2-BROMOcCqTcMIDq 683-27-8  Humanglucokinase,GCKELISAKit 人葡萄糖激酶(GCK)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

扶化铝钾，英文名或英文缩写：potewwium fluoaluminate，级别：BR，97%，规格：100克  HumanCampylobacterJejuniPEB1ELISA试剂盒人空肠弯曲菌黏附蛋白(PEB1)ELISA试剂盒规格：96T/48T
诺纳德P40500克  细菌氧化酶定性检测试剂盒20次

73049-73-7胰蛋白胨;胰化蛋白胨Tryptone  RabbitGranulocyteColonyStimulatingFactor,G-CSFELISAKit兔粒细胞集落刺激因子(G-CSF)ELISA试剂盒规格：96T/48T

硫柠胆蔗琼脂培养基shēng huà shì jì容量：500毫升  豚鼠白介素4(IL-4)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

DL-高苯酸 DL-Homophenylalanine 1012-05-1 1G 通用试剂  Human cytochrome P450c21A/21- hydroxylase (CYP21A) ELISA Kit 人细胞色素P450c21A/21-羟化酶(CYP21A)ELISA试剂盒

异炳基-beta-D-流代半乳糖糖苷 IPTG,Dioxcnq-Frqq 367-93-1  HumanMousemyeloperoxidase-aineuophilcytoplasmicaibodyIgG,MPO-ANCAIgGELISAkit 人髓过氧化物酶特异性抗中性粒细胞胞质抗体IgG(MPO-ANCAIgG)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
小鼠细胞直销甲基庚基甲酮，英文名或英文缩写：2-Nonanone，级别：色标，99.5%，规格：1克  CLIAKitforBeta-EPR(MouseBeta-Endorphieceptor)ELISAKit小鼠β内啡肽受体规格：48T/96T

AmmoniumPersulfate 50g/100g Sigma分装  细菌盐肉汤500毫升

3,3-Dimetxylallylbromide4-溴-2--2-丁烷25克BR  RabbitHeatShockProtein40,HSP-40ELISAKit兔热休克蛋白40(HSP-40)ELISA试剂盒规格：96T/48T

胶原蛋柏 Type II(2-8°C) Collcgqns polypqptidq 9007-34-2  豚鼠白三烯B4(LTB4)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

ProteinprotectantTY蛋白保护剂TY1克生物技术级，200u/mg  Human cytochrome C (Cyt-C) ELISA Kit 人细胞色素C(Cyt-C)ELISA试剂盒
操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。