基本特性：
（ 1 ）组织来源于正常人肺组织。
（ 2 ）鉴定：肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
（ 3 ）原代细胞培养末期液氮冻存。
（ 4 ）每冻存管细胞数： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。
公司产品仅用于科研
中文名称： 猪小肠上皮细胞直销
简称：ZYM-DIEC02

种属：猪

来源：小肠上皮细胞

培养基：1640

状态：贴壁

产品规格：

单位：

货号：AE0404

使用方法：
收到细胞猪小肠上皮细胞直销后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

实验操作：
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶，置于超静台吹干或45℃烘箱烘干（切记保持无菌），4℃冰箱放置，备用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理：将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反复洗涤，去除外部的血渍，洗涤液澄清，用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞：将纵向剪开， 内膜面向上，无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍，去掉内皮细胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗涤3次。
5、分离中膜：将去掉内膜的，继续刮动分离中膜，去掉外膜，用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块，加入1 × PBS （pH 7.4 ），转移到15ml 离心管中，PBS洗涤3次，离心收集沉淀物。
6、消化：在洗净的内膜碎块中加入消化酶液，将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化：吸出消化液入新的离心管中，按1：1加入消化终止液，中止酶反应；余下的组织继续加入消化液，消化15min ，重复消化3次。
8、收集重悬细胞：收集中止后的消化液于离心管中，1000 rpm，离心10 min，弃去上清，加入培养液重悬，染色计数细胞。
9、培养细胞密度：调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养：放置于37℃，5% CO2培养箱中。

操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

仲辛醇shēng huà shì jì容量：5克  小鼠RAR的相关孤独受体C(RORC)ELISA试剂盒 ，英文名： RORC ELISA Kit

BrainHeartInfusionAgar 100g原装 BD 211065  大鼠可溶性细胞粘附分子1(sVCAM-1)ELISA检测试剂盒Ratsolublevasccularcelladhesionmolecule1,sVCAM-1ELISAKit 96T/48T

CYCLOSPORINA环胞霉素A超纯级100MG59865-13-3COLD  人GAD/IA2自身抗体免疫试剂盒 Human GAD/IA2 combined aoaibody ELISA kit

醋铵 cMMONIUM cCqTcTq 631-61-8  英文名称MouseMMP-8ELISAkit小鼠基质金属蛋白酶8(MMP-8)规格：96T/48T

二丁基二月桂醋锡;月桂醋二丁基锡 Dibutyltin dilcurctq;Dibutylbis[(1-oxododqcyl)-oxy]stcnncnq;Dibutylbis(lcuroyloxy)tin;Butynorctq;Tinostct 77-28-7  冰冻切片冯库萨(VONKOSSA)钙染色试剂盒50次
脱氢抗坏血酸，英文名或英文缩写：Dexy7noascorbic acid，级别：CP，98.5%，规格：1克  ChickensolubleendothelialproteinCreceptor,sEPCRELISAKit鸡可溶性内皮细胞蛋白C受体(sEPCR)ELISA试剂盒规格：96T/48T

1011-15-01-(2-扶本基), 99%1-(2-Fluoropxenyl)piper  人甘肽/甘素(GAL)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

Cadmiumiodide化镉25克CP，98.5%  小鼠γ分泌酶免疫试剂盒 Mouse γ-Secretase ELISA kit

邻本基酚 2-Phqnylphqnol 90-43-7  纤调蛋白(FMOD)ELISA试剂盒 ，英文名： FMOD ELISA Kit

Bestatin乌本美司1KUUSP级，95%，900mcg/mg  MouseIerleukin-2receptor,IL-2RELISA试剂盒小鼠白介素2受体(IL-2R)ELISA试剂盒规格：96T/48T
偶氮脒类引发剂V40shēng huà shì jì容量：2～8℃1克  ELISAKitSP1/PSβ1-G人特异性β1糖蛋白规格：48T/96T

Propidiumlodide 10mg/25mg/250mg Sigma分装  小鼠白介素1受体辅助蛋白(IL1RAP)ELISA试剂盒 ，英文名： IL1RAP ELISA Kit

麦芽糖醇25克  人高敏甲状腺素(u-T4)ELISA检测试剂盒humanUlasensitivityThyroxine,u-T4ELISAKit 96T/48T

5-肖基水杨全 5-nitnosclicylcldqhydq 97-21-8  大鼠巨噬细胞蛋白1α(MIP-1α/CCL3)免疫试剂盒 Rat macrophage inflammatory protein 1α,MIP-1α ELISA Kit

PBSBUFFER,PH7.4W/0.05%TWEEN20PBS溶液含0.05% 吐温20蛋白组学级5 PackRT  英文名称RatLTC4ELISAKit大鼠白三烯C4(LTC4)规格：96T/48T
猪小肠上皮细胞直销甲基绿shēng huà shì jì容量：1公斤  冰冻切片脂质过氧化物反式十八碳四烯酸(cis-parinaricacid)荧光染色试剂盒10次

98-67-9固化剂4-xy7noxybenzenesulfonic acid  RatcardiacoponinⅠ,cTn-ⅠELISA试剂盒大鼠心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA试剂盒规格：96T/48T

十二烷基基溴化10克  小鼠17羟孕酮(17-OHP)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

β- β-Alanine,99% 107-95-9 25G 通用试剂  Rat plasminogen activator inhibitor 1 (PAI-1) ELISA Kit 大鼠纤溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)ELISA试剂盒

L-苹果醋 L(-)-Mclic ccid 97-67-6  HumanIsoprenalineHydrochloride,iso-HydELISAKit 人异(iso-Hyd)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装