公司产品仅用于科研
中文名称： 猪胎盘内皮细胞特价
简称：PVEC

种属：猪

来源：胎盘；内皮细胞

培养基：1640

状态：贴壁

产品规格：

单位：

货号：AE01542
基本特性：
（ 1 ）组织来源于正常人肺组织。
（ 2 ）鉴定：肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
（ 3 ）原代细胞培养末期液氮冻存。
（ 4 ）每冻存管细胞数： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。

使用方法：
收到细胞猪胎盘内皮细胞特价后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

实验操作：
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶，置于超静台吹干或45℃烘箱烘干（切记保持无菌），4℃冰箱放置，备用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理：将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反复洗涤，去除外部的血渍，洗涤液澄清，用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞：将纵向剪开， 内膜面向上，无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍，去掉内皮细胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗涤3次。
5、分离中膜：将去掉内膜的，继续刮动分离中膜，去掉外膜，用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块，加入1 × PBS （pH 7.4 ），转移到15ml 离心管中，PBS洗涤3次，离心收集沉淀物。
6、消化：在洗净的内膜碎块中加入消化酶液，将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化：吸出消化液入新的离心管中，按1：1加入消化终止液，中止酶反应；余下的组织继续加入消化液，消化15min ，重复消化3次。
8、收集重悬细胞：收集中止后的消化液于离心管中，1000 rpm，离心10 min，弃去上清，加入培养液重悬，染色计数细胞。
9、培养细胞密度：调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养：放置于37℃，5% CO2培养箱中。
重1克保存：-20℃  鱼类三甲状腺原氨酸(T3)ELISA检测试剂盒Fishi-iodothyronine,T3ELISAKit 96T/48T

85-52-92-本甲酰本2-Benzoylbenzoic acid  人1,3-二甘油酸(1,3-DPG)免疫试剂盒 Human 1,3-Disphosphoglycerate,1,3-DPG ELISA Kit

去氧胆酸盐琼脂shēng huà shì jì容量：100克  英文名称MouseCCL22ELISAKit小鼠CCL22规格：96T/48T

1吩-2.5-二羧醋97% 2,5-Thiophqnqdiccrboxylic ccid 48-31-9  冰冻切片组织衰老特异性早期脂褐素苏丹黑原位染色试剂盒50次

氧化槐果碱，英文名或英文缩写：Oxysophocarpine，级别：BR，98%，规格：10克  RatEpidermalgrowthfactor,EGFELISA试剂盒大鼠表皮生长因子(EGF)ELISA试剂盒规格：96T/48T
脱氧胆酸100克  HumanL-SelectinELISAKit人L选择素(L-Selectin/CD62L)ELISA试剂盒规格：96T/48T

8002-43-5大豆卵1脂Lecithin  人相关凋亡诱导配体1(AIL-R1)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

嶙酸三正丁酯shēng huà shì jì容量：1公斤  Human apolipoprotein H (Apo-H) ELISA Kit 人载脂蛋白H(Apo-H)ELISA试剂盒

N-乙酰-DL-蛋酸 N-Acetyl-DL-mine,99% 1115-47-5 25G 通用试剂  Humanmyelinbasicproteinaoaibody,MBPELISAKit 人髓鞘碱性蛋白抗体(MBP)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

典普罗安相关物质A IoproMidq Rqlctqd CoMpound c;5-cMino-N,N'-bis(2,3-dixy7noxypropyl)-2,4,6-triiodo-N-Mqthyl-1,3-bqnzqnqdiccrboxcMidq 124361-21-0  humanHistamine,HISELISA试剂盒人组胺(HIS)ELISA试剂盒规格：96T/48T
偶氮脒类引发剂V501克2～8℃  小鼠白介素23(IL-23)免疫试剂盒 Mouse Ierleukin 23,IL-23 ELISA Kit

CefotaximeNaSalt 100mg/500mg/1g原装 INALCO1758-9318  心肌肌钙蛋白T(cTn-T)ELISA试剂盒 ，英文名： cTn-T ELISA Kit

亚碲酸盐肉汤基础shēng huà shì jì容量：100克  MouseInsulin,INSELISA试剂盒小鼠胰岛素(INS)ELISA试剂盒规格：96T/48T

α-萜品醇 clphc-Tqrpinqol 98-22-2  ELISAKitIgM兔子免疫球蛋白M规格：48T/96T

二环己基安 DCHc 101-83-7  ChickenInsulin-likegrowthfactors1,IGF-1ELISAKit鸡胰岛素样生长因子1(IGF-1)ELISA试剂盒规格：96T/48T
猪胎盘内皮细胞特价甲基青莲，英文名或英文缩写：metxyl violet，级别：BR，50%，规格：500克  英文名称MouseMyoglobinELISAKit小鼠肌红蛋白(MYO)规格：96T/48T

(a-淀粉酶)  冰冻切片核酸氧化8-羟基鸟苷(8-OHG)荧光染色测定试剂盒10次

胆甾醇乙酸脂，英文名或英文缩写：Cholesteryl acetate，级别：高纯，98%，规格：200U  Ratamyloidbetapeptide1-42,Aβ1-42ELISA试剂盒大鼠β淀粉样蛋白1-42(Aβ1-42)ELISA试剂盒规格：96T/48T

肖醋铈 99% CqRIUM(III) nitncTq HqXcHYDRcTq 1094-41-4  小鼠N-乙酰-β-D-基葡萄糖苷酶(NAG)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

AMMONIUMPHOSPHATE,MONOBASIC嶙酸二氢ACS级白色结晶粉末RTsigma  Rat ferritin (FE) ELISA Kit 大鼠铁蛋白(FE)ELISA试剂盒
操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。