使用方法：
收到细胞猪骨髓间质干细胞特价后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

公司产品仅用于科研
中文名称： 猪骨髓间质干细胞特价
简称：MSC

种属：猪

来源：骨髓间质干细胞

培养基：1640

状态：贴壁

产品规格：

单位：

货号：AE0530

基本特性：
（ 1 ）组织来源于正常人肺组织。
（ 2 ）鉴定：肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
（ 3 ）原代细胞培养末期液氮冻存。
（ 4 ）每冻存管细胞数： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。

操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

重组蚂蟥素，英文名或英文缩写：Hirudin recombinant，级别：BR，98%，规格：100克  伤寒抗体(St-Ab)ELISA试剂盒 ，英文名： St-Ab ELISA Kit

7320-34-5焦钾potewwium pyrophosphate  Porcineleukemiainhibitoryfactorreceptor,LIFRELISA试剂盒猪抑制因子受体(LIFR)ELISA试剂盒规格：96T/48T

环戊二烯铁，英文名或英文缩写：Ferrocene，级别：3N，99.9%，规格：25片  Humanalpha-fetoproteinLensculinarisaggliin2,AFP-L2ELISA试剂盒人小扁结合型甲胎蛋白/甲胎蛋白异质体2(AFP-L2)ELISA试剂盒规格：96T/48T

鸡肉浸粉 Chicken extract powder Null 250G 通用试剂  Humanapoptosissignalregulatingkinase1,ASK-1ELISAKit人凋亡信号调节激酶I(ASK-1)ELISA试剂盒规格：96T/48T

4-羌基-3-氧基扁桃醋 DL-4-xy7noXY-3-MqTHOXYMcNDqLIC cCID 394-0-9  人β细胞素(BTC) ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
计数液1公斤  大鼠肝细胞生长因子激活物(HGFA)免疫试剂盒 Rat hepatocyte growth factor activator,HGFA ELISA Kit

(D-绵子糖)  CLIAKitforVD3ELISAKit大鼠维生素D3规格：48T/96T

酰胺&甲叉双酰胺溶液shēng huà shì jì容量：2～8℃1KU  免疫荧光细胞流式仪基础检测试剂盒(无一抗和二抗)50次

录化胆减 Cholinq Chloridq 67-48-1  ELISAKitPCK人烯醇式同酸羧激酶规格：48T/96T

咪唑 (常规) Imidazole (ACS reagent, ≥99%) 288-32-4 100G 通用试剂  小鼠Cerberus蛋白(CER)ELISA试剂盒 ，英文名： CER ELISA Kit
培养基shēng huà shì jì容量：100克  MouseTumornecrosisfactorβ,TNF-βELISA试剂盒小鼠β(TNF-β)ELISA试剂盒规格：96T/48T

123-38-6丙醛¤Propionaldehyde  Elisa病毒抗体检测试剂盒5*96孔5*96孔

对羟基本酸正丁酯5毫升保存：-20℃  Humanangiopoietin-likeprotein3,ANGPTL3ELISAKit人生成素样蛋白3(ANGPTL3)ELISA试剂盒规格：96T/48T

十四烷基基化铵 Trimethyl-tetradecylammonium chloride,... 4574-4-3 1G 通用试剂  人补体片断3a(C3a)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

异拂烷相关物质A Isoflurcnq Rqlctqd CoMpound c;1-Chloro-2,2,2-trifluoroqthyl chlorodifluoroMqthyl qtqr 3778/8/8  豚鼠单核细胞趋化蛋白4(MCP-4/CCL13)免疫试剂盒 Guinea Pig monocyte chemotactic protein 4,MCP-4 ELISA kit
猪骨髓间质干细胞特价甲基紫10毫克  Porcinemyeloperoxidase,MPOELISA试剂盒猪髓过氧化物酶(MPO)ELISA试剂盒规格：96T/48T

6132-2-1碳酸钠十水合物wo7ium te decahydrate  Humanamyloidbetapeptide1-40,Aβ1-40ELISA试剂盒人β淀粉样蛋白1-40(Aβ1-40)ELISA试剂盒规格：96T/48T

C12E8C12 E8超纯级1G3055-98-9COLD  HumanArachidonicAcid,AAELISAKit人花生四烯酸(AA)ELISA试剂盒规格：96T/48T

a-糜蛋白酶 α-Chymotrypsin from bovine pancreas 9004-7-3 250MG 通用试剂  人β内啡肽受体(β-EPR)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

叔丁基过氧化物 Di-tqrt-butyl pqroxidq 110-02-4  兔子谷胱甘肽(GSH)免疫试剂盒 Rabbit glathione,GSH ELISA Kit

实验操作：
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶，置于超静台吹干或45℃烘箱烘干（切记保持无菌），4℃冰箱放置，备用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理：将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反复洗涤，去除外部的血渍，洗涤液澄清，用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞：将纵向剪开， 内膜面向上，无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍，去掉内皮细胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗涤3次。
5、分离中膜：将去掉内膜的，继续刮动分离中膜，去掉外膜，用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块，加入1 × PBS （pH 7.4 ），转移到15ml 离心管中，PBS洗涤3次，离心收集沉淀物。
6、消化：在洗净的内膜碎块中加入消化酶液，将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化：吸出消化液入新的离心管中，按1：1加入消化终止液，中止酶反应；余下的组织继续加入消化液，消化15min ，重复消化3次。
8、收集重悬细胞：收集中止后的消化液于离心管中，1000 rpm，离心10 min，弃去上清，加入培养液重悬，染色计数细胞。
9、培养细胞密度：调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养：放置于37℃，5% CO2培养箱中。