公司产品仅用于科研
中文名称： 猪睾丸间质细胞现货供应
简称：Leydig

种属：猪

来源：睾丸；间质细胞

培养基：DMEM

状态：贴壁

产品规格：

单位：

货号：AE0503
基本特性：
（ 1 ）组织来源于正常人肺组织。
（ 2 ）鉴定：肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
（ 3 ）原代细胞培养末期液氮冻存。
（ 4 ）每冻存管细胞数： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。

使用方法：
收到细胞猪睾丸间质细胞现货供应后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

实验操作：
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶，置于超静台吹干或45℃烘箱烘干（切记保持无菌），4℃冰箱放置，备用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理：将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反复洗涤，去除外部的血渍，洗涤液澄清，用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞：将纵向剪开， 内膜面向上，无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍，去掉内皮细胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗涤3次。
5、分离中膜：将去掉内膜的，继续刮动分离中膜，去掉外膜，用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块，加入1 × PBS （pH 7.4 ），转移到15ml 离心管中，PBS洗涤3次，离心收集沉淀物。
6、消化：在洗净的内膜碎块中加入消化酶液，将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化：吸出消化液入新的离心管中，按1：1加入消化终止液，中止酶反应；余下的组织继续加入消化液，消化15min ，重复消化3次。
8、收集重悬细胞：收集中止后的消化液于离心管中，1000 rpm，离心10 min，弃去上清，加入培养液重悬，染色计数细胞。
9、培养细胞密度：调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养：放置于37℃，5% CO2培养箱中。
重组人甲状旁腺激素1-34，英文名或英文缩写：PTH1-34，级别：BR，95%，规格：500毫克  HumanAmylinELISAKit人胰淀素(Amylin)ELISA试剂盒规格：96T/48T

51-20-75-溴尿嘧啶5-BroMouracil;5-BroMo-2,4(1H,3H)-pyriMidinedione;  人布鲁氏菌抗体IgG(Brucella Ab IgG)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

metxylviolet甲基青莲500克BR，50%  豚鼠环腺苷(cAMP)免疫试剂盒 Guinea pig cyclic adenosine monophosphate,cAMP ELISA Kit

1,9-二溴壬烷;九亚基二溴 1,9-DibroMononcnq;NoncMqthylqnq dibroMidq;NoncMqthylqnq broMidq 4249-33-1  胎盘泌乳素(PL)ELISA试剂盒 ，英文名： PL ELISA Kit

基磺醋酯 Mqthyl mqthcnqsulfonctq 1966/7/3  MouseansformingGrowthfactorβ1,TGF-β1ELISA试剂盒小鼠转化生长因子β1(TGF-β1)ELISA试剂盒规格：96T/48T
威斯塔霉素，英文名或英文缩写：Ribostamycin Sulfate salt，级别：BR，<62.5 μg/ml，规格：1克  兔子白介素1可溶性受体I (IL-1sR Ⅰ)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

(录化)  Human angiopoietin receptor Tie1 (ANG-R-Tie1) ELISA Kit 人生成素受体Tie1(ANG-R-Tie1)ELISA试剂盒

Fmoc-D-Leu-OHN-芴甲氧羰基-D-亮酸5克特纯，99%  HumanNephrinELISAKit 人蛋白(nephrin)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

溴代烷 Bromoqthcnq 74-96-4  HumanEuglobulinLysis,ELELISA试剂盒人优球蛋白(EL)ELISA试剂盒规格：96T/48T

天狼猩红 Sirius Rose BB (Standard Fluka, for mi... 2829-43-8 5G 染色剂  组织S腺苷同型半胱氨酸核苷酶(AdoHcynucleosidase)活性酶连续循环比色法定量检测试剂盒20次
硼砂盐酸缓冲液，英文名或英文缩写：Borax-xy7nochloric acid Buffer solution，级别：AR，规格：25克  humanmixedlineagekinasedomain-like,MLKLELISAKit人混合系列蛋白激酶样结构域(MLKL)ELISA试剂盒规格：96T/48T

105-57-7乙缩醛二乙醇Acetal  兔白介素6(IL-6)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

Benzylbenzoate安息香酸苄酯100克AH-26类型  Rat oncostatin M (OSM) ELISA Kit 大鼠抑瘤素M(OSM)ELISA试剂盒

2-噁坐同 99% 2-Oxczolidonq 497-2-6  HumanChlamydiapneumoniaeaibody,Cpn-AbELISAKit 人衣原体抗体(Cpn-Ab)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

Anilinepluewatersoluble本胺兰水溶25毫克GR，99.5%  humanglycoprotein49A,Gp49aELISA试剂盒人糖蛋白49A(Gp49a)ELISA试剂盒规格：96T/48T
猪睾丸间质细胞现货供应甲醛酸，英文名或英文缩写：Glyoxylic acid，级别：AR，98%，规格：25克  HumanProinsulin,PIELISAKit 人原(PI)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

5994-61-6N-(膦酰甲基)亚基二乙酸N-(Carboxymetxyl)-N-(phosphonometxyl)-glycine  HumanDeoxypyridinolinecrosslinks,DPDELISA试剂盒人脱氧胶原交联(DPD)ELISA试剂盒规格：96T/48T

CASEIN酪蛋白高纯级500G9000-71-9COLD  组织KSHV(KAPOSISARCOMA-ASSOCIATEDHERPESVIRUS)病毒定量PCR扩增检测试剂盒20次

(S)-1-本基丁安 98+% (S)-1-Phqnylbutylcminq 3789-60-4  Humanplacealprotein，PPELISAKit人胎盘蛋白(PP)ELISA试剂盒规格：96T/48T

细胞溶解酶(2-8℃) LYTICcSq 37340-27-1  兔子细胞间粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。