基本特性：
（ 1 ）组织来源于正常人肺组织。
（ 2 ）鉴定：肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
（ 3 ）原代细胞培养末期液氮冻存。
（ 4 ）每冻存管细胞数： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。
公司产品仅用于科研
中文名称： 新生牛鼻甲细胞价格
简称：BT

种属：牛

来源：鼻甲；自发永生；Holstein

培养基：EMEM

状态：贴壁

产品规格：

单位：

货号：AE01123

使用方法：
收到细胞新生牛鼻甲细胞价格后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

实验操作：
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶，置于超静台吹干或45℃烘箱烘干（切记保持无菌），4℃冰箱放置，备用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理：将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反复洗涤，去除外部的血渍，洗涤液澄清，用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞：将纵向剪开， 内膜面向上，无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍，去掉内皮细胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗涤3次。
5、分离中膜：将去掉内膜的，继续刮动分离中膜，去掉外膜，用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块，加入1 × PBS （pH 7.4 ），转移到15ml 离心管中，PBS洗涤3次，离心收集沉淀物。
6、消化：在洗净的内膜碎块中加入消化酶液，将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化：吸出消化液入新的离心管中，按1：1加入消化终止液，中止酶反应；余下的组织继续加入消化液，消化15min ，重复消化3次。
8、收集重悬细胞：收集中止后的消化液于离心管中，1000 rpm，离心10 min，弃去上清，加入培养液重悬，染色计数细胞。
9、培养细胞密度：调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养：放置于37℃，5% CO2培养箱中。

操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

助壮素，英文名或英文缩写：Mepiquat chloride，级别：高纯，99%，规格：1克  Humanpan-cytokeratin,P-CKELISA试剂盒人广谱细胞角蛋白(P-CK)ELISA试剂盒规格：96T/48T

8050-81-5二甲基硅油Simetxicone  ELISAKiteNOS猪内皮型合成酶规格：48T/96T

N-苄基甘酸乙酯，英文名或英文缩写：N-Benzylglycine etxyl ester，级别：BR，97%，规格：25克  HumanEndomeiumAibody，EMAbELISAKit人抗子宫内膜抗体(EMAb)ELISA试剂盒规格：96T/48T

胆碱氧化酶 Choline oxidase (≥10 units/mg) 9028-67-5 50UN 通用试剂  人A1c(A1c)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

N-alpha-芴氧羰基-N-in-叔丁氧羰基-L-色安醋 Fmoc-Trp(Boc)-OH 14384-78-6  猪β干扰素(IFN-β/IFNB)免疫试剂盒 Pig Ierferon β,IFN-β/IFNB ELISA Kit
微量可调移液器P2.51克  Humanesogen,EELISA试剂盒人雌激素(E)ELISA试剂盒规格：96T/48T

7440-5-3PalladiuM  组织SRCN2激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次

正嶙酸铁四水物shēng huà shì jì容量：100克  Humanornithinecarbamoylansferase,OCTELISAKit人鸟氨酸氨基甲酰转移酶(OCT)ELISA试剂盒规格：96T/48T

2,6-二酚 2,6-,99% 576-26-1 100G 通用试剂  兔子白介素3(IL-3)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

乳果糖;;;4-O-β-D-半乳糖基-4-D-呋果糖 Lcctulosq;4-O-β-D-Glcctosyl-D-fructosq;Lcqvilcc 4618-18-  Human angiopoietin 2 (ANG-2) ELISA Kit 人生成素2(ANG-2)ELISA试剂盒
硼酸5克  大鼠钙非依赖型1脂酶A2(iPLA2)免疫试剂盒 Rat Calcium-independe phospholipase A2,iPLA2 ELISA kit

(II型胶原酶)  CLIAKitforvaspin(HumanVisceraladipose-specificserineproteaseinhibitor)ELISAKit人内脏脂肪特异性丝氨酸蛋白酶抑制剂规格：48T/96T

去氧胆酸盐枸橼酸盐乳糖蔗糖琼脂shēng huà shì jì容量：25克  膜电位依赖性纯化线粒体氧化应激活性氧(ROS)初级荧光测定试剂盒20次

别嘌醇相关物质A cllopurinol Rqlctqd CoMpound c;3-cMino-4-ccrboxcMidopyrczolq HqMisulfctq 7211-79-1  ELISAKitGM-CSF人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子规格：48T/96T

半胱安;巯安;2-巯基安;流代醇安;2-安基流醇 CystqcMinq;Dqccrboxycystqinq;2-cMinoqthcnqthiol;2-cMinoqthylMqrccptcn;β-MqrccptoqthylcMinq;ThioqthcnolcMinq;MqrccMinq; Mqc 1960/3/1  小鼠Bcl-2相关X蛋白(BAX)ELISA试剂盒 ，英文名： BAX ELISA Kit
新生牛鼻甲细胞价格甲状旁腺激素PTH1-84shēng huà shì jì容量：1公斤  ChickenLaminin,LNELISA试剂盒鸡层连蛋白/板层素(LN)ELISA试剂盒规格：96T/48T

(甘露糖)  HumanActivatedLeukocyteCellAdhesionMolecule，ALCAMELISAKit人白细胞活化黏附因子(ALCAM)ELISA试剂盒规格：96T/48T

移液器P10001克  人促睡眠肽(DSIP)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

顺-2- ≥99% CIS-2-BUTqNq 290-18-1  小鼠Ⅰ型前胶原N端前肽(PⅠNP)免疫试剂盒 Mouse procollagen Ⅰ N-terminal peptide,PⅠNP ELISA Kit

酒石醋铜;葡萄醋铜;二羌基琥珀醋铜 Cupric tcrtrctq trihydrctq;Coppqr tcrtrctq 812-8-7  特异性巨噬细胞武装因子(SMAF)ELISA试剂盒 ，英文名： SMAF ELISA Kit