基本特性：
（ 1 ）组织来源于正常人肺组织。
（ 2 ）鉴定：肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
（ 3 ）原代细胞培养末期液氮冻存。
（ 4 ）每冻存管细胞数： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。
公司产品仅用于科研
中文名称： 小鼠主动脉内皮细胞直销
简称：MAEC

种属：小鼠

来源：主动脉；内皮细胞

培养基：DMEM

状态：贴壁

产品规格：

单位：

货号：AE0819

使用方法：
收到细胞小鼠主动脉内皮细胞直销后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

实验操作：
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶，置于超静台吹干或45℃烘箱烘干（切记保持无菌），4℃冰箱放置，备用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理：将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反复洗涤，去除外部的血渍，洗涤液澄清，用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞：将纵向剪开， 内膜面向上，无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍，去掉内皮细胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗涤3次。
5、分离中膜：将去掉内膜的，继续刮动分离中膜，去掉外膜，用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块，加入1 × PBS （pH 7.4 ），转移到15ml 离心管中，PBS洗涤3次，离心收集沉淀物。
6、消化：在洗净的内膜碎块中加入消化酶液，将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化：吸出消化液入新的离心管中，按1：1加入消化终止液，中止酶反应；余下的组织继续加入消化液，消化15min ，重复消化3次。
8、收集重悬细胞：收集中止后的消化液于离心管中，1000 rpm，离心10 min，弃去上清，加入培养液重悬，染色计数细胞。
9、培养细胞密度：调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养：放置于37℃，5% CO2培养箱中。

操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

紫脲酸5克  小鼠Apelin小鼠13蛋白(AP13)ELISA试剂盒 ，英文名： AP13 ELISA Kit

(预杂交液)  人胶原酶I(CollagenaseI)ELISA检测试剂盒HumanCollagenaseIELISAKit 96T/48T

五水亚嶙酸钠，英文名或英文缩写：wo7ium phosphite dibasic pentahydrate，级别：BR，95%，规格：100克  大鼠复制蛋白A 70kDaDNA结合亚基(RPA1)免疫试剂盒 Rat replication protein A 70 kDa DNA-binding subunit,RPA1 ELISA kit

1本隆 ;赛本隆 5-Phqnylccrbcmoylcmino-1,2,3-thicdiczolq 21707-22-  CLIAKitforUU-Ab(HumanUreaplasmaurealyticumaibody)ELISAKit人解脲脲原体抗体规格：48T/96T

1,4-氧氮杂环已烷，英文名或英文缩写：Morpholine，级别：2N，200-300目，规格：25毫克  离子膜通道转运功能检测试剂盒20次
微量可调移液器P20shēng huà shì jì容量：5克  Mouseamyloidbetapeptide1-42,Aβ1-42ELISA试剂盒小鼠β淀粉样蛋白1-42(Aβ1-42)ELISA试剂盒规格：96T/48T

(电泳等电点标准PH2.5-6.5)  ELISAKitMCP-3/CCL7小鼠单核细胞趋化蛋白3规格：48T/96T

L-脯酰胺25克  Hamstehyroxine-BindingGlobulinAssay,TBGELISAKit仓鼠甲状腺结合球蛋白(TBG)ELISA试剂盒规格：96T/48T

9-基 9-Mqthylcnthrccqnq 779-0-  人抗蛋白酶3抗体IgG(PR3 Ab-IgG)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

FERROUSSULFATE,ANxy7noUS亚铁,无水美国药典级1KG7720-78-7RT  小鼠基质金属蛋白酶4(MMP-4)免疫试剂盒 Mouse maix metalloproteinase 4,MMP-4 ELISA Kit
硼酸shēng huà shì jì容量：RT10克  CLIAKitforVA(HumanVitaminA)ELISAKit人维生素A规格：48T/96T

Pronase 250mg/1g Roche分装  膜相关结构免疫化学固着溶液10毫升

苹果酸钠三水物5克2～8℃  ELISAKitCG人冷球蛋白规格：48T/96T

1本隆 ;赛本隆 5-Phqnylccrbcmoylcmino-1,2,3-thicdiczolq 21707-22-  小鼠ATP结合盒转运蛋白C6(ABCC6)ELISA试剂盒 ，英文名： ABCC6 ELISA Kit

IODOACETAMIDE代乙酰胺蛋白组学级  人降钙素原(PCT)ELISA检测试剂盒HumanProcalcitonin,PCTELISAKit 96T/48T
小鼠主动脉内皮细胞直销钾shēng huà shì jì容量：RT25克  βAMYLOID蛋白免疫共沉淀分析试剂盒5次

4043-87-22-派啶DL-Pipecolinic acid  RabbieceptoractivatorofnuclearfactorkappaBligand,RANKLELISA试剂盒兔核因子κB受体活化因子配基(RANKL)ELISA试剂盒规格：96T/48T

定量滤纸100毫克保存：-20℃  小鼠癌胚抗原(CEA)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

2,4,6-三(烯炳氧基)-1,3,5-三嗪 2,4,6-Tricllyloxy-1,3,5-triczi 101-37-1  Rat adrenergic receptor a1A (ADRA1A) ELISA Kit 大鼠能a1A受体(ADRA1A)ELISA试剂盒

移液器吸头25U2～8℃  HumancrosslinkedN-telopeptideoftypeⅠcollagen,XELISAKit 人Ⅰ型胶原N末端肽(X)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装